ETI是植物在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中形成的一種重要抗性機(jī)制,符合“基因?qū)蚣僬f(shuō)”抗病性是其中一種。番茄（Solanum lycopersicum）與葉霉菌（Cladosporium fulvum）的互作是研究這一機(jī)制的經(jīng)典模式系統(tǒng)。通過(guò)該系統(tǒng),已經(jīng)克隆了多個(gè)Cf基因及與其互補(bǔ)的無(wú)毒基因（Avr）,對(duì)Cf-2、Cf-4和Cf-9的互作機(jī)制和信號(hào)傳導(dǎo)途徑也開(kāi)展了較為深入的研究。雖然這些R基因序列高度相似,但互作機(jī)制不同。因此對(duì)Cf-4E/Avr4E的互作機(jī)制及信號(hào)傳導(dǎo)途徑研究會(huì)豐富Cf/Avr互作機(jī)制的理論,從而為抗病育種提供理論基礎(chǔ)。本項(xiàng)目以實(shí)驗(yàn)室前期獲得的由誘導(dǎo)型啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的共含Cf-4E與Avr4E轉(zhuǎn)基因單拷貝本氏煙為研究材料,該材料能在雌二醇條件下,因強(qiáng)烈的過(guò)敏性壞死（Hypersensitive response,HR）導(dǎo)致種子全部不能萌發(fā)。在化學(xué)誘變劑處理后,如果Cf-4E、Avr4E或關(guān)鍵信號(hào)組分三者中任一基因發(fā)生突變,則種子在雌二醇條件下可以正常萌發(fā)并生長(zhǎng);反之,如果三者均未突變,則種子全部不萌發(fā),可便捷的篩選不產(chǎn)生HR的突變體�；谏鲜鲈�,本論文開(kāi)展了如下研究:（1）在化學(xué)誘... 

【文章來(lái)源】：浙江師范大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 植物抗病反應(yīng)和機(jī)理
        1.1 植物抗病反應(yīng)
        1.2 植物抗病機(jī)理
    2 番茄葉霉病的研究
        2.1 番茄葉霉病的危害及致病菌
        2.2 番茄葉霉病Avr基因產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)與功能
        2.3 C.fulvum代謝機(jī)制研究
    3 番茄的抗葉霉病基因
    4 Cf基因產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)與功能
    5 Cf/Avr的蛋白識(shí)別復(fù)合體及下游防衛(wèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
        5.1 Cf/Avr的蛋白識(shí)別復(fù)合體
        5.2 Cf/Avr的下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
    6 突變體庫(kù)的構(gòu)建及篩選技術(shù)
        6.1 理化誘變
            6.1.1 物理誘變
            6.1.2 化學(xué)誘變
        6.2 插入誘變
            6.2.1 T-DNA插入誘變
            6.2.2 轉(zhuǎn)座子插入誘變
        6.3 表型鑒定
        6.4 細(xì)胞學(xué)鑒定
        6.5 分子生物學(xué)鑒定
        6.6 遺傳學(xué)鑒定
    7 研究的目的和意義
    8 研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線
        8.1 研究?jī)?nèi)容
        8.2 技術(shù)路線
第二章 甲基磺酸乙脂(EMS)對(duì)Nb-Avr-Cf種子發(fā)芽率的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 供試材料
            2.1.1 供試煙草品種
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 藥品和試劑
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 PBS溶液的配置
            2.2.2 EMS溶液的配制
            2.2.3 Nb-Avr-Cf種子EMS半致死量濃度確定
            2.2.4 觀察記載和統(tǒng)計(jì)方法
    3 結(jié)果與分析
    4 討論
第三章 Cf-4E/Avr4E介導(dǎo)的過(guò)敏性壞死信號(hào)途徑中關(guān)鍵基因突變體的篩選及鑒定
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
            2.2.1 誘變處理
            2.2.2 雌二醇初篩
            2.2.3 T1 代種植及雌二醇復(fù)篩與T2 代種子收獲
            2.2.4 T2 代種子雌二醇及抗生素篩檢測(cè)及培養(yǎng)
            2.2.5 瞬時(shí)表達(dá)及DAB驗(yàn)證突變類型
            2.2.6 序列比對(duì)明確決定Cf-4E識(shí)別Avr4E的關(guān)鍵氨基酸
    3 結(jié)果與分析
        3.1 喪失HR的突變體庫(kù)構(gòu)建
        3.2 突變體的性狀特征
        3.3 突變體鑒定
        3.4 突變類型的鑒定
            3.4.1 突變體TB-9.2 突變類型鑒定
            3.4.2 突變體TB-12.14 突變類型鑒定
            3.4.3 突變體TB-19.1 突變類型鑒定
            3.4.4 突變體TB-22.1 突變類型鑒定
        3.5 TB-9.2 突變體的突變位點(diǎn)分析
    4 討論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的研究論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[5]美國(guó)玉米誘變（花粉EMS）育種的商業(yè)化實(shí)施典例[J]. 張銘堂,才卓.  玉米科學(xué). 2017(03)
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博士論文
[1]水稻基因激活標(biāo)簽體系的建立及初步分析[D]. 宛淑艷.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2006

碩士論文
[1]EMS誘變番茄突變體庫(kù)的構(gòu)建及表型分析[D]. 尚娜.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]水稻氮素營(yíng)養(yǎng)相關(guān)突變體的鑒定及其生理特性分析[D]. 張莉.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]誘導(dǎo)型啟動(dòng)子在番茄抗葉霉病基因Cf-4E/Avr4E介導(dǎo)的過(guò)敏性壞死中的應(yīng)用[D]. 苗爽.浙江師范大學(xué) 2014
[4]番茄晚疫病抗病信號(hào)傳導(dǎo)突變體篩選[D]. 孫利萍.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]煙草突變體庫(kù)創(chuàng)建及篩選體系建立[D]. 王軍偉.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011



本文編號(hào)：3206227