昆蟲生殖期,發(fā)育中的卵巢吸收和儲存大量卵黃原蛋白（Vitellogenin,Vg）作為卵母細胞成熟和胚胎發(fā)育的營養(yǎng)物質(zhì)。該過程中,卵母細胞表面的卵黃原蛋白受體（Vitellogenin receptor,VgR）通過介導胞吞作用轉(zhuǎn)運Vg至卵母細胞內(nèi)。先前研究報道保幼激素（juvenile hormone,JH）通過蛋白激酶C（Protein kinase C,PKC）調(diào)控VgR介導的卵巢Vg吸收過程,但是其中的內(nèi)分泌調(diào)控機制尚不明晰,特別是VgR如何響應JH-PKC信號通路并介導Vg吸收的機制不明。飛蝗（Locusta migratoria）是世界性蟲災防治對象,其卵黃發(fā)生由保幼激素主導,是保幼激素調(diào)控昆蟲生殖發(fā)育研究的模式昆蟲之一。我們使用飛蝗作為實驗對象,利用RNAi、Western blot、免疫共沉淀、免疫組織化學等分子生物學和細胞生物學相關的技術(shù)手段,探究飛蝗保幼激素調(diào)控VgR介導Vg吸收的分子機制,以期闡明VgR響應JH-PKC信號轉(zhuǎn)導通路并介導卵母細胞吸收Vg的分子調(diào)控機制。首先我們從飛蝗卵巢的轉(zhuǎn)錄組中篩選出了7種PKC亞型,分別進行RNA干擾,發(fā)現(xiàn)在對PKC delta... 

【文章來源】：河南大學河南省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 飛蝗的研究意義
        1.1.1 飛蝗的災害性
        1.1.2 保幼激素研究的代表性昆蟲
    1.2 保幼激素調(diào)控昆蟲生殖
        1.2.1 保幼激素調(diào)控Vg表達和吸收
        1.2.2 卵黃原蛋白受體的研究進展
    1.3 保幼激素信號通路研究進展
        1.3.1 保幼激素的基因組轉(zhuǎn)錄調(diào)控
        1.3.2 保幼激素的非基因組信號通路
    1.4 擬解決的科學問題及實驗方案
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗對象
        2.1.2 實驗所用試劑
        2.1.3 實驗常用儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 飛蝗卵巢RNA的提取
        2.2.2 cDNA反轉(zhuǎn)錄
        2.2.3 RNA干擾
        2.2.4 熒光定量PCR
        2.2.5 兔源多克隆抗體制備
        2.2.6 Western blot
        2.2.7 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)
        2.2.8 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)
        2.2.9 PKC亞細胞定位
        2.2.10 免疫組織化學
        2.2.11 膜質(zhì)蛋白分離
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 證明PKC參與VgR的磷酸化調(diào)控
    3.2 保幼激素誘導PKC的亞細胞定位
    3.3 JH誘導PKC iota結(jié)合VgR
        3.3.1 飛蝗PKC的抗體制備
        3.3.2 檢測與VgR有互作的蛋白激酶
    3.4 保幼激素通過PKC iota誘導VgR上細胞膜
    3.5 PKC激活VgR的絲氨酸位點磷酸化
    3.6 驗證VgR被JH誘導上細胞膜具有保守性
第四章 討論
    4.1 JH誘發(fā)VgR磷酸化和質(zhì)-膜遷移介導Vg吸收
    4.2 JH-PKC信號通路調(diào)控VgR磷酸化
第五章 總結(jié)
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]我國飛蝗災害的成因及防治[J]. 周曉鐘.  生物學教學. 2003(04)



本文編號：3187858