發(fā)布時間：2021-05-06 03:57

　　皮膚是人體防御外界的有效屏障,在抵御細菌侵入,異物入侵以及防止脫水等方面起著重要作用,因此其完整性對于人體來說至關(guān)重要。眾所周知,傷口愈合是一個復(fù)雜的生理過程,而糖尿病,血管疾病,高齡等因素會影響傷口愈合,最終形成慢性傷口。傳統(tǒng)觀念認為生長因子是促進傷口愈合的主要驅(qū)動力,但最終FDA只批準了人重組血小板衍生生長因子BB（PDGF-BB）（becaplermin凝膠）來治療糖尿病足潰瘍,但其療效不佳,成本高昂,具有致癌風(fēng)險等弊端逐漸顯露�，F(xiàn)今全球患有慢性傷口的人口在不斷增加,所以我們急需開發(fā)出新型效果良好且價格低廉的促進傷口愈合的藥物。熱休克蛋白90（90 kDa heat shock protein,Hsp90）是一種普遍存在于幾乎所有細胞中的分子伴侶,它在進化上高度保守,主要作用是維持細胞內(nèi)蛋白質(zhì)穩(wěn)定。最近眾多研究表明當(dāng)組織受到創(chuàng)傷時,細胞會通過分泌Hsp90α到胞外來影響細胞的遷移,促進傷口愈合。低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1（LRP-1）,也稱為CD91,是I型跨膜蛋白,主要介導(dǎo)胞吞以及信號通路的傳導(dǎo),近年來越來越多研究證明胞外Hsp90α（eHsp90α）通過LRP-1來傳遞細胞遷... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略詞表
第1章 前言
    1.1 熱休克蛋白90(Hsp90)
        1.1.1 熱休克蛋白
        1.1.2 熱休克蛋白90(Hsp90)
        1.1.3 胞外Hsp90(eHsp90)
    1.2 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)
    1.3 創(chuàng)傷愈合
        1.3.1 皮膚創(chuàng)傷愈合過程
        1.3.2 創(chuàng)傷愈合研究現(xiàn)狀
    1.4 海腎熒光素酶雙分子互補技術(shù)
    1.5 研究內(nèi)容與意義
第2章 SRL-PFAC方法建立
    2.1 研究背景
    2.2 實驗材料與儀器
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗試劑
        2.2.3 溶液配制
        2.2.4 實驗儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.3.2 細胞復(fù)蘇
        2.3.3 細胞培養(yǎng)及細胞傳代
        2.3.4 細胞凍存
        2.3.5 細胞轉(zhuǎn)染
        2.3.6 Western Blot實驗及分析
        2.3.7 Renilla Luciferase分析
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 構(gòu)建pc DNA3.1(+)-S1
        2.4.2 構(gòu)建pc DNA3.1(+)-S1-LRP-1 Ⅱ
        2.4.3 構(gòu)建pc DNA3.1(+)-S1-LRP-1
        2.4.4 測序結(jié)果
        2.4.5 Western Blot驗證
        2.4.6 熒光素酶活性反應(yīng)檢測SRL-PFAC特異性
    2.5 討論與小結(jié)
第3章 SRL-PFAC 方法有效性測定及多肽篩選
    3.1 研究背景
    3.2 實驗材料與儀器
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 實驗試劑
        3.2.3 實驗儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 Transwell Assay實驗分析
        3.3.2 MTS實驗分析
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 SRL-PFAC 具有有效性
        3.4.2 SRL-PFAC篩選出RE-7 與ES-9 可能具有促細胞遷移作用
        3.4.3 RE-7 能夠促進HSF細胞遷移
        3.4.4 ES-9 能夠促進HSF細胞遷移
    3.5 討論與小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
作者簡介及攻讀碩士期間的科研成果
致謝



本文編號：3171189