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水稻OsNAC45基因參與脫落酸和鹽響應(yīng)的功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-04-21 10:16
  鹽脅迫是導(dǎo)致世界上農(nóng)作物產(chǎn)量減少的重要非生物脅迫原因之一,我國(guó)鹽漬化土地分布廣泛,約占可耕種土地面積的四分之一,并且鹽漬化的土地面積仍在逐年增加。水稻是世界上最重要的糧食作物之一,全世界大約一半的人口以水稻作為日常主食,因此水稻的產(chǎn)量和質(zhì)量關(guān)系到人類最基本的生存問(wèn)題。研究水稻耐鹽機(jī)制,揭示其對(duì)鹽脅迫的響應(yīng)不僅對(duì)培育耐鹽水稻提供了理論基礎(chǔ),而且有較高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值,對(duì)解決世界糧食短缺問(wèn)題有重要的意義。NAC轉(zhuǎn)錄因子是植物特有的基因家族,目前的研究發(fā)現(xiàn)NAC在植物一生過(guò)程中均發(fā)揮重要的作用,如植物根的生長(zhǎng)與發(fā)育,頂端分生組織的形成,花器官的形態(tài)建成,葉片的衰老以及非生物脅迫抗性等方面均有報(bào)道。Os NAC45在鹽脅迫響應(yīng)過(guò)程中起到關(guān)鍵作用,研究Os NAC45的功能可以為耐鹽水稻的培育提供重要的基因資源。本論文以水稻轉(zhuǎn)錄因子基因Os NAC45作為研究對(duì)象,主要取得結(jié)果如下:1.用熒光定量PCR的技術(shù)分析了水稻不同組織中Os NAC45的表達(dá)量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其在根、莖、葉、葉鞘和穗中均有表達(dá),其中根部的表達(dá)量最高,穗中的表達(dá)量最低。Na Cl可以誘導(dǎo)該基因在根中的表達(dá),Na Cl處理的時(shí)間梯度... 

【文章來(lái)源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 土壤鹽漬化現(xiàn)狀
    1.2 鹽脅迫對(duì)植物的危害
        1.2.1 鹽脅迫影響植物的生長(zhǎng)
        1.2.2 鹽脅迫影響植物離子內(nèi)穩(wěn)態(tài)
        1.2.3 鹽脅迫影響植物光合作用
        1.2.4 鹽脅迫影響植物對(duì)水分的吸收
        1.2.5 鹽脅迫影響植物生物膜系統(tǒng)
    1.3 植物的耐鹽機(jī)制
        1.3.1 細(xì)胞區(qū)隔化
        1.3.2 滲透調(diào)節(jié)
    1.4 NAC轉(zhuǎn)錄因子家族的研究進(jìn)展
        1.4.1 NAC轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)
        1.4.2 NAC轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)調(diào)控
        1.4.3 NAC轉(zhuǎn)錄因子功能多樣化
        1.4.4 NAC轉(zhuǎn)錄因子參與植物生長(zhǎng)發(fā)育
        1.4.5 NAC轉(zhuǎn)錄因子參與植物細(xì)胞壁的形成
        1.4.6 NAC轉(zhuǎn)錄因子參與植物應(yīng)對(duì)非生物脅迫
    1.5 OsNAC45研究進(jìn)展
    1.6 研究目的和意義
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 本研究中主要使用的儀器
        2.1.2 本研究中各種溶液的配制
        2.1.3 本研究中各種培養(yǎng)基的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 植物基因組總DNA的提取
        2.2.2 質(zhì)粒DNA的提取
        2.2.3 水稻總RNA的提取
        2.2.4 cDNA的合成
        2.2.5 熒光定量PCR
        2.2.6 PCR反應(yīng)
        2.2.7 DNA的純化
        2.2.8 DNA的酶切
        2.2.9 DNA的連接
        2.2.10 大腸桿菌的轉(zhuǎn)化
        2.2.11 大腸桿菌陽(yáng)性克隆的驗(yàn)證
        2.2.12 敲除載體的構(gòu)建
        2.2.13 水稻原生質(zhì)體相關(guān)實(shí)驗(yàn)
        2.2.14 水稻根免疫組化實(shí)驗(yàn)
        2.2.15 水稻植株表型相關(guān)實(shí)驗(yàn)
        2.2.16 酵母實(shí)驗(yàn)
        2.2.17 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.1 OsNAC45基因的表達(dá)、蛋白定位與自激活
        3.1.1 OsNAC45基因的表達(dá)
        3.1.2 OsNAC45蛋白的亞細(xì)胞定位
        3.1.3 OsNAC45蛋白的組織定位
        3.1.4 OsNAC45蛋白的自激活驗(yàn)證
    3.2 OsNAC45轉(zhuǎn)基因植株表型
        3.2.1 OsNAC45敲除植株的鑒定
        3.2.2 OsNAC45超表達(dá)植株的鑒定
        3.2.3 外源ABA對(duì) OsNAC45 轉(zhuǎn)基因植株發(fā)芽的影響
        3.2.4 外源ABA對(duì) OsNAC45 轉(zhuǎn)基因植株幼苗生長(zhǎng)的影響
        3.2.5 OsNAC45突變體的鹽脅迫表型
    3.3 轉(zhuǎn)錄組相關(guān)實(shí)驗(yàn)
        3.3.1 轉(zhuǎn)錄組結(jié)果分析
        3.3.2 轉(zhuǎn)錄組結(jié)果的驗(yàn)證
    3.4 轉(zhuǎn)基因植株的農(nóng)藝性狀分析
第四章 結(jié)論與討論
    4.1 結(jié)論與討論
第五章 展望
    5.1 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
縮略詞對(duì)照表
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3151572

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