目的研究miR-485-5p和脫氫酶/還原酶3（DHRS3）在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）增殖和分化中的表達(dá)和作用。方法將細(xì)胞分為第1轉(zhuǎn)染組、第2轉(zhuǎn)染組、第3轉(zhuǎn)染組和第4轉(zhuǎn)染組,分別用anti-miR-con、anti-miR-485-5p、si-con和si-DHRS3分別轉(zhuǎn)染/共轉(zhuǎn)染BMSCs細(xì)胞。轉(zhuǎn)染9 d后,用四甲基偶氮唑鹽（MTT）法檢測細(xì)胞存活率,實(shí)時熒光定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測各組細(xì)胞中miR-485-5p和DHRS3 mRNA的表達(dá),Western blot檢測DHRS3、成骨分化蛋白標(biāo)志物核心結(jié)合蛋白因子2（RUNX2）、骨鈣蛋白（OCN）和骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BMP2）,增殖蛋白周期蛋白依賴性激酶4（CDK4）和細(xì)胞周期蛋白D1（Cyclin D1）,Notch受體1（Notch 1）、Notch配體（Jagged1）和Split多毛增強(qiáng)子1（Hes1）蛋白的表達(dá)。結(jié)果第1轉(zhuǎn)染組、第2轉(zhuǎn)染組、第3轉(zhuǎn)染組和第4轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞存活率分別為（100.58±10.09）%,（132.50±11.45）%,（135.62±12.66）%和（110.96±9.58）%;DHR3蛋... 

【文章來源】：中國臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(13)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和成骨定向分化
        2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染前分組與給藥方法
        2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染[4]
    3 檢測指標(biāo)
        3.1 qRT- PCR檢測RNA的表達(dá)
        3.2 MTT法測定細(xì)胞存活率
        3.3 Western blot檢測蛋白表達(dá)
        3.4 雙熒光素酶報告系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)
    4 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 BMSCs定向分化培養(yǎng)后細(xì)胞中RUNX2、OCN和BMP2表達(dá)
    2 BMSCs定向分化培養(yǎng)后細(xì)胞中miR-485-5p低表達(dá)和DHRS3高表達(dá)
    3 miR-485-5p靶向調(diào)控DHRS3的表達(dá)
    4 轉(zhuǎn)染后BMSCs增殖情況
    5 轉(zhuǎn)染后BMSCs細(xì)胞中DHRS3、CDK4、Cyclin D1、RUNX2、OCN、BMP-2、Notch1、Jagged1和 Hes1的表達(dá)情況
討 論



本文編號：3144891