動物的發(fā)情與交配是其擴(kuò)大種群數(shù)量提高自身適合度的重要途徑。在靈長類中,研究雌性的性激素分泌水平和生理周期信息不僅能揭示其繁殖規(guī)律,也是進(jìn)一步了解雌性性行為、性策略、雄性交配投資及物種進(jìn)化的重要途徑。短尾猴（Macaca thibetana）是我國Ⅱ級保護(hù)動物,被自然保護(hù)聯(lián)盟列為易危物種,由于其繁殖期無明顯的性皮腫脹現(xiàn)象,且體型較大受孕后腹部變化不明顯,加之棲息環(huán)境復(fù)雜,不同物種性激素測定方法具有較強(qiáng)的特異性等原因,導(dǎo)致研究人員長期以來對短尾猴雌性生理相關(guān)研究相對滯后。關(guān)于雌性短尾猴不同生理狀態(tài)下性激素水平的分泌規(guī)律及月經(jīng)周期、孕期等基礎(chǔ)生理信息的研究也較為缺乏。本研究以黃山野生短尾猴和銅陵動物園籠養(yǎng)短尾猴中成年雌性個體為研究對象,在2018年10月10日至2019年10月3日期間采用非損傷性取樣法連續(xù)跟蹤采集目標(biāo)雌性個體新鮮糞便633份,使用行為取樣法記錄交配行為,全事件記錄法同時記錄雌性的發(fā)情狀態(tài)、產(chǎn)仔日期等信息。利用野生和籠養(yǎng)兩種取食狀態(tài)下的短尾猴糞便樣本,從不同糞便處理方式（濕便、冷凍干燥粉碎、冷凍干燥研篩）、不同激素提取（乙醇加熱法、甲醇乙醚法、乙醇丙酮法、甲醇乙醇法）與檢測方... 

【文章來源】：安徽大學(xué)安徽省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

野外研究地點(diǎn)Figure2-1Fieldstudysite

短尾猴糞便性激素測定方法評估及其在生理周期研究中的應(yīng)用16圖2-4糞便處理與激素提取Figure2-4Treatmentandextractionofhormonesinfeces2.3糞便性激素提取方法綜合國內(nèi)外研究，參照其他非人靈長類物種中糞便激素提取與改良方法[16,35,38,113]，我們選取了4種常用抽提溶劑和抽提方法（乙醇加熱法，甲醇乙醚法，乙醇丙酮法與甲醇乙醇法），分別對短尾猴糞便樣品中雌二醇（E2）與孕酮（P4）進(jìn)行抽提，詳細(xì)操作步見表2-2。2.4糞便性激素檢測方法采用放射免疫方法（RIA）與酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA）進(jìn)行雌二醇（E2）與孕酮（P4）含量的測定，為減少實(shí)驗(yàn)誤差，樣品的測定與標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備同時進(jìn)行。雌二醇與孕酮測定的基本操作依照北京福瑞生物技術(shù)公司所生產(chǎn)的放免試劑盒和浙江惠嘉生物科技有限公司所生產(chǎn)的酶免試劑盒的研究說明和操作規(guī)程進(jìn)行。每個樣品重復(fù)測定2次，實(shí)驗(yàn)誤差導(dǎo)致兩次數(shù)值相差較大時，將對應(yīng)樣品進(jìn)行第3次測定，保留相近的兩組作為最終數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。2.5實(shí)驗(yàn)試劑盒及操作步驟實(shí)驗(yàn)試劑盒：碘[125I]猴類雌二醇放射免疫分析藥盒（北京福瑞生物技術(shù)公司）碘[125I]猴類孕酮放射免疫分析藥盒（北京福瑞生物技術(shù)公司）猴雌二醇（E2）酶聯(lián)免疫試劑盒（浙江惠嘉生物科技有限公司）猴孕酮（P4）酶聯(lián)免疫試劑盒（浙江惠嘉生物科技有限公司）

短尾猴糞便性激素測定方法評估及其在生理周期研究中的應(yīng)用20圖2-5不同糞便處理方式激素含量比較（圖a：雌二醇，圖b：孕酮；n=20，均值：Mean±SE*：P<0.05，**:P<0.01）Figure2-5Comparisonofhormonecontentindifferentfecaltreatmentmethods.(Figa:Estradiol,Figb:Progesterone;n=20,Mean±SE;*:P<0.05,**:P<0.01)4.2不同取食條件對處理方法的影響不同取食環(huán)境下糞便中高纖維雜質(zhì)含量明顯不同，可能會使糞便處理結(jié)果產(chǎn)生差異。我們另外對籠養(yǎng)與野生個體糞便數(shù)據(jù)分開進(jìn)行分析。結(jié)果表明，籠養(yǎng)狀態(tài)下，凍干研篩法保存雌二醇與孕酮激素含量仍最高（圖2-6a，2-6b），但與凍干粉碎法無顯著差異（P>0.05），兩種糞便處理保存方式均可選擇；但野生狀態(tài)******

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雄性短尾猴維持臨時配偶關(guān)系的行為適應(yīng)性[J]. 方興麗,張啟信,夏東坡,李進(jìn)華.  獸類學(xué)報. 2020(01)
[2]黃山雄性短尾猴的擁抱行為[J]. 劉一鳴,王希,張啟信,方興麗,李進(jìn)華.  獸類學(xué)報. 2019(06)
[3]Interchange between grooming and infant handling in female Tibetan macaques（Macaca thibetana）[J]. Qi Jiang,Dong-Po Xia,Xi Wang,Dao Zhang,Bing-Hua Sun,Jin-Hua Li.  Zoological Research. 2019(02)
[4]野生短尾猴集群運(yùn)動的跟隨者特征研究[J]. 李博文,王希,吳偉,李進(jìn)華.  生物學(xué)雜志. 2019(01)
[5]圈養(yǎng)條件下黑猩猩月經(jīng)、排卵和妊娠周期[J]. 朱迎娣.  動物學(xué)雜志. 2018(05)
[6]雄性短尾猴個體特征與臨時配偶關(guān)系研究[J]. 吳義兵,張啟信,王希,李博文,李進(jìn)華.  獸類學(xué)報. 2018(05)
[7]雄性短尾猴的等級順位、睪酮水平與腸道寄生蟲感染強(qiáng)度的關(guān)系[J]. 吳偉,孫丙華,王希,李文博,李博文,李進(jìn)華.  獸類學(xué)報. 2018(05)
[8]滇金絲猴糞便類固醇激素抽提及檢測方法評估[J]. 黎嘉欣,楊秋立,普天春,盧雁平,王偉,劉學(xué)鋒,劉定震.  野生動物學(xué)報. 2018(03)
[9]虎糞便類固醇激素檢測及影響因素的評估[J]. 傅文源.  野生動物學(xué)報. 2018(02)
[10]近20年白馬雪山國家級自然保護(hù)區(qū)研究綜述[J]. 代萬,李春葉,周順福,王有兵.  林業(yè)調(diào)查規(guī)劃. 2017(06)

碩士論文
[1]人工輔助投食雌性滇金絲猴（Rhinopithecus bieti）的性激素水平與繁殖行為關(guān)系研究[D]. 李小玉.西華師范大學(xué) 2019
[2]秦嶺金絲猴（Rhinopithecus roxellana）繁殖群雌性個體性激素和交配對策研究[D]. 劉燚.西北大學(xué) 2017
[3]川金絲猴雌二醇和孕酮檢測方法評估及其在繁殖周期水平研究[D]. 陳偉貞.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號：3131471