L-苯丙氨酸（L-phenylalanine,L-Phe）是人體八大必須氨基酸之一,在人類的新陳代謝中起著重要的作用。而現(xiàn)在生產(chǎn)L-Phe的技術(shù)還遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了市場(chǎng)的需求,本研究目的是利用DNA重組技術(shù)以及微生物發(fā)酵的方法提高L-Phe產(chǎn)量。研究方法包括利用易錯(cuò)PCR技術(shù)對(duì)rpo A基因進(jìn)行點(diǎn)突變建立一個(gè)基因庫,通過突變作用于rpo A的正常轉(zhuǎn)錄從而調(diào)控工程菌株產(chǎn)生L-Phe的量;利用質(zhì)粒ptrc99a作為載體轉(zhuǎn)化到感受態(tài)細(xì)胞中,并從中篩選出高產(chǎn)菌株;通過質(zhì)粒的構(gòu)建、篩選、驗(yàn)證、發(fā)酵等一系列試驗(yàn),結(jié)果表明工程菌株構(gòu)建成功,為L(zhǎng)-Phe規(guī)�；a(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。 

【文章來源】：天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào). 2020,27(02)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

rpoA基因電泳凝膠結(jié)果

經(jīng)發(fā)酵數(shù)據(jù)分析，從發(fā)酵開始到第26 h發(fā)酵菌株處于自身生長(zhǎng)期，并沒有L-苯丙氨酸產(chǎn)生，并且在第24 h溶氧達(dá)到40 mg/L時(shí)，開始與通氣量耦聯(lián)，此時(shí)溫度調(diào)為38℃，從第28 h開始的取樣中測(cè)得有L-苯丙氨酸的產(chǎn)量，最終經(jīng)過66 h的發(fā)酵試驗(yàn)，L-苯丙氨酸的最終產(chǎn)量為41.75 g/L，見圖2，與現(xiàn)有工程菌株34.68 g/L的產(chǎn)量相比有明顯提升。4 討論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]易錯(cuò)PCR研究進(jìn)展及應(yīng)用[J]. 高義平,趙和,呂孟雨,楊學(xué)舉,王海波.  核農(nóng)學(xué)報(bào). 2013(05)
[2]L-苯丙氨酸生產(chǎn)的代謝工程研究[J]. 賈紅華,韋萍,何冰芳.  生物加工過程. 2004(02)
[3]熒光法測(cè)定發(fā)酵液中的苯丙氨酸含量[J]. 范長(zhǎng)勝,陳力,余震,鄭善良,楊仁根,周培林.  氨基酸雜志. 1989(02)

博士論文
[1]利用重組大腸桿菌生產(chǎn)L-色氨酸的研究[D]. 古鵬飛.山東大學(xué) 2013
[2]L-苯丙氨酸生產(chǎn)菌株的構(gòu)建、代謝調(diào)控和發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 周海巖.江南大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3107472