目的:探討稀有細(xì)胞群單細(xì)胞分選方案的優(yōu)化。方法:分析儀器設(shè)備的設(shè)置、分選前細(xì)胞的準(zhǔn)備和分選方案的選擇。結(jié)果:通過提供的單細(xì)胞分選的方案,使單克隆形成率達(dá)86.5%。結(jié)論:建立了單細(xì)胞分選的優(yōu)化方案,并重點(diǎn)分析了提高單克隆形成率的影響因素和解決方法。 

【文章來源】：生物化工. 2020,6(04)

【文章頁數(shù)】：3 頁

【部分圖文】：

圖1 分選方案

通過流式分析的方法找到細(xì)胞群如圖2a所示，分析出陽性細(xì)胞，并分選至96孔板的每個孔中。7 d以后顯微鏡下觀察，找到如圖2b中的細(xì)胞克隆計數(shù)并統(tǒng)計。3塊孔板形成的單克隆數(shù)分別為88、82和79個，分選并能夠形成單細(xì)胞克隆的平均得率為86.5%。較多文獻(xiàn)中報道了[1-2]驗(yàn)證單細(xì)胞分選得率的方案，但均局限于分選前期，即僅判定是否分至細(xì)胞培養(yǎng)板的孔中，而此次實(shí)驗(yàn)延伸至分選末期，不僅將單個細(xì)胞分選至單個孔中，還可以形成單克隆，采用的單細(xì)胞分選優(yōu)化方案利用單克隆的形成率更加準(zhǔn)確地說明了單細(xì)胞分選的效率。單細(xì)胞分選實(shí)驗(yàn)中影響后期單細(xì)胞成活率或單克隆形成率的主要因素可歸納為以下4點(diǎn)。


本文編號：3095940