目的:探究自噬相關(guān)蛋白101（autophagyrelated 101,ATG101）對(duì)米色脂肪細(xì)胞增殖、分化和產(chǎn)熱過(guò)程的影響。方法:將小鼠血管基質(zhì)細(xì)胞（stromal vascular fraction,SVF）向米色脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化,運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR及蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)誘導(dǎo)分化過(guò)程中（0、2、4、6和8 d） Atg101 mRNA和蛋白表達(dá)。使用慢病毒介導(dǎo)的shRNA在分化前敲減Atg101并誘導(dǎo)分化成米色脂肪細(xì)胞后,運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)成熟脂肪細(xì)胞（6 d）標(biāo)志基因表達(dá),油紅O染色觀察脂滴形態(tài);同時(shí)檢測(cè)分化過(guò)程中（0、2、4和6 d）產(chǎn)熱相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果:ATG101在米色脂肪細(xì)胞自然分化過(guò)程中表達(dá)量逐漸增加; Atg101敲減后,成熟米色脂肪細(xì)胞標(biāo)志基因脂肪酸結(jié)合蛋白4（fatty acid binding protein 4,Fabp4）,誘導(dǎo)細(xì)胞死亡DNA片斷化因子α樣效應(yīng)因子（cell death-inducing DNA fragmentation factor-α-like effector A,Cidea）和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體4（glucose transport... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2020,30(04)

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ATG101在米色脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中的表達(dá)

分化第6天的米色脂肪細(xì)胞油紅O染色顯示，ATG101下調(diào)后導(dǎo)致分化的米色脂肪細(xì)胞中脂質(zhì)積累減少(圖3A)。在分化第6天，實(shí)時(shí)定量PCR的結(jié)果表明，成熟米色脂肪細(xì)胞標(biāo)志基因Fabp4的表達(dá)降低至對(duì)照組的0.57,Cidea降低至0.46，而Glut4降低至0.68(P<0.01和P<0.05，圖3B)。因此，ATG101在細(xì)胞水平上參與前脂肪細(xì)胞向成熟米色脂肪細(xì)胞的分化成脂過(guò)程。圖3 Atg101敲減對(duì)米色脂肪細(xì)胞分化的影響

Atg101敲減對(duì)米色脂肪細(xì)胞分化的影響


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