隨著抗生素的廣泛使用,細菌逐漸產(chǎn)生了耐藥性,出現(xiàn)了大量多藥耐藥菌。其中MRSA作為一種超級細菌,攜帶多種耐藥基因,在畜牧業(yè)和動物性食品中多次被檢測到,對公共衛(wèi)生造成了嚴(yán)重的威脅。MRSA通過表達大量毒力提高菌株的致病能力與對宿主環(huán)境的適應(yīng)力,其感染往往依賴于多種編碼粘附蛋白、胞外酶、毒素和鐵攝取等相關(guān)毒力因子的調(diào)控,使細菌產(chǎn)生粘附、損傷宿主細胞,逃避宿主的免疫系統(tǒng)并產(chǎn)生毒性效應(yīng)等危害動物健康。因此,研究MRSA的耐藥機理、毒力表達調(diào)控有助于新抗菌藥物的研發(fā)及感染的臨床治療。本研究對寧夏地區(qū)牛源MRSA的毒力相關(guān)信息及對頭孢喹肟耐藥機制進行初步研究,為LA-MRSA的毒力研究及寧夏地區(qū)LA-MRSA的臨床防治提供參考依據(jù),為LA-MRSA對頭孢喹肟的耐藥機制研究奠定基礎(chǔ)。1.采用微量肉湯稀釋法對97株金黃色葡萄球菌進行18種抗菌藥物敏感性試驗;通過全基因組測序,重點分析LA-MRSA與MSSA攜帶的耐藥基因、毒力因子等相關(guān)信息。結(jié)果顯示97株菌株除了對替米考星、阿米卡星、利奈唑胺、萬古霉素、達托霉素全部敏感外,對其他13種抗菌藥物均存在不同程度的耐藥,尤其青霉素、磺胺異噁唑的耐藥率較高,... 

【文章來源】：寧夏大學(xué)寧夏回族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 文獻綜述
    1.1 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.1.1 LA-MRSA的發(fā)展流行
        1.1.2 MRSA的耐藥機制及毒力因子調(diào)控作用
        1.1.3 頭孢喹肟的作用機制及耐藥研究
        1.1.4 細菌全基因組測序及轉(zhuǎn)錄組分析
    1.2 研究目的與意義
第二章 LA-MRSA與MSSA的耐藥性與毒力分析
    2.1 試驗材料
        2.1.1 菌株來源
        2.1.2 抗菌藥物標(biāo)準(zhǔn)品
        2.1.3 主要培養(yǎng)基和試劑
        2.1.4 抗菌藥物的配制
        2.1.5 主要儀器設(shè)備
    2.2 試驗方法
        2.2.1 牛源金黃色葡萄球菌抗菌藥物敏感性試驗
        2.2.2 菌株基因組的提取
        2.2.3 文庫質(zhì)檢、測序及結(jié)果處理
        2.2.4 數(shù)據(jù)分析
    2.3 試驗結(jié)果
        2.3.1 藥敏試驗
        2.3.2 基因組基本特征
        2.3.3 ARDB數(shù)據(jù)庫注釋
        2.3.4 VFDB數(shù)據(jù)庫注釋及重要毒力因子的比較
        2.3.5 基因島預(yù)測
        2.3.6 物種系進化分析
    2.4 討論
        2.4.1 耐藥情況
        2.4.2 毒力因子及基因島攜帶情況
    2.5 小結(jié)
第三章 LA-MRSA的毒力因子表達分析
    3.1 試驗材料
        3.1.1 菌株來源與細胞系
        3.1.2 主要培養(yǎng)基及試劑
        3.1.3 主要儀器設(shè)備
    3.2 試驗方法
        3.2.1 微量半定量方法檢測金黃色葡萄球菌生物被膜
        3.2.2 細菌體外侵襲試驗
        3.2.3 高毒力LA-MRSA菌株的毒力表達譜
    3.3 試驗結(jié)果
        3.3.1 金黃色葡萄球菌生物被膜檢測結(jié)果
        3.3.2 細菌體外侵襲試驗結(jié)果
        3.3.3 高毒力LA-MRSA菌株的毒力分析
    3.4 討論
        3.4.1 毒力因子的表達
        3.4.2 生物被膜的調(diào)控
        3.4.3 耐藥相關(guān)基因的表達
        3.4.4 細菌的應(yīng)激表達
    3.5 小結(jié)
第四章 MRSA對頭孢喹肟耐藥的比較基因組與轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究
    4.1 試驗材料
        4.1.1 試驗菌株
        4.1.2 主要培養(yǎng)基與藥品
        4.1.3 主要儀器設(shè)備
    4.2 試驗方法
        4.2.1 菌株MIC值測定及高濃度耐藥株的篩選
        4.2.2 樣品處理
        4.2.3 DNA和RNA提取及樣品檢測
        4.2.4 文庫構(gòu)建及庫檢
    4.3 試驗結(jié)果
        4.3.1 菌株MIC值測定及高濃度耐藥菌株篩選結(jié)果
        4.3.2 LA-MRSA D10與高濃度耐藥株Induces比較基因組測序突變分析
        4.3.3 LA-MRSA D10與高濃度耐藥株Induces比較轉(zhuǎn)錄組測序分析結(jié)果
    4.4 討論
        4.4.1 耐藥相關(guān)基因
        4.4.2 毒力及生存代謝基因
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻
致謝
個人簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]細菌毒素-抗毒素系統(tǒng)的功能[J]. 何志利,王慧.  生物工程學(xué)報. 2018(08)
[2]細菌基因島研究進展[J]. 鄧瑞,陳亮.  重慶醫(yī)學(xué). 2018(06)
[3]金黃色葡萄球菌毒力調(diào)控系統(tǒng)TCRSs和SarA[J]. 唐俊妮,史賢明,曾志光,王紅寧,胡瑜.  上海交通大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)科學(xué)版). 2009(02)
[4]青霉素結(jié)合蛋白研究進展[J]. 熊亞莉.  國外醫(yī)藥(抗生素分冊). 2004(05)
[5]細菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的熱點問題[J]. 陸堅,唐英春.  國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊). 2003(09)

博士論文
[1]豬源耐甲氧西林金黃色葡萄球菌流行病學(xué)特征及遺傳進化分析[D]. 李君.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]奶牛乳腺炎性金黃色葡萄球菌耐藥基因檢測、分子分型和耐甲氧西林菌株全基因組測序[D]. 王登峰.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]DNA修復(fù)相關(guān)基因及耐輻射球菌基因組進化生物信息學(xué)研究[D]. 林軍.浙江大學(xué) 2007

碩士論文
[1]牛源耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥性和毒力基因的檢測[D]. 陳云.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]牛源金黃色葡萄球菌耐藥性及分子流行病學(xué)研究[D]. 趙吳靜.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[3]體外多酶催化確定乳酸合成途徑關(guān)鍵酶的研究[D]. 馬春玲.天津科技大學(xué) 2016
[4]SOS應(yīng)答對大腸桿菌抗藥性與毒力的調(diào)控機制[D]. 王進文.山東大學(xué) 2015
[5]志賀菌臨床株耐藥性分析及對氟喹諾酮抗生素耐藥機制的研究[D]. 梁帆.天津醫(yī)科大學(xué) 2012
[6]對苯唑西林耐藥的金黃色葡萄球菌耐藥性及分子流行病學(xué)調(diào)查[D]. 杜娜.吉林大學(xué) 2007
[7]耐甲氧西林金黃色葡萄球菌femA調(diào)控基因的初步研究[D]. 李曉芳.四川大學(xué) 2006



本文編號：3050735