DLO Hi-C Tool一款簡單高效的DLO Hi-C分析工具
發(fā)布時間:2021-02-17 12:21
在三維基因組領域,Hi-C技術在研究全基因組交互中扮演關鍵角色。隨著技術的進步,傳統(tǒng)Hi-C實驗中的數(shù)據(jù)利用率低,實驗周期長,實驗成本高等問題逐漸顯露。為了彌補這一不足,2018年5月份Nature Genetics發(fā)表了一篇關于新的Hi-C技術DLO Hi-C(Digestion-ligation-only Hi-C)。相比于傳統(tǒng)Hi-C技術,DLO Hi-C有著測序數(shù)據(jù)質(zhì)量高,實驗周期短,可重復性好,操作簡單等優(yōu)勢。由于實驗方法與傳統(tǒng)Hi-C有較大不同,傳統(tǒng)的Hi-C分析軟件不適應于DLO Hi-C數(shù)據(jù),因此開發(fā)一個適用于DLO Hi-C數(shù)據(jù)的分析軟件就顯得極為重要。在本文中,我們開發(fā)了一款名為DLO Hi-C Tool的工具,用于DLO Hi-C數(shù)據(jù)分析。DLO Hi-C Tool集合了ChIA-PET Tool,MAFFT的部分功能以及傳統(tǒng)的Hi-C流程,并使用Java語言構建出了一個一體化的DLO Hi-C分析軟件。DLO Hi-C Tool有著使用簡單,自動化,軟件依賴少,運行速度快等優(yōu)點。除了一鍵式分析之外,DLO Hi-C Tool還支持分步運行并且提供了一些常用的文件...
【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
C及其衍生技術原理圖(方亞平etal2018)
4圖 2. 染色質(zhì)結(jié)構的層次化(Bonev and Cavalli 2016)Figure 2. Hierarchical organization of chromatin structure(Bonev and Cavalli 2016)ChIA-PET 則是將配對末端標簽測序技術(Pair-End Tag Sequencing)與染色質(zhì)免疫共沉淀技術(ChromatinImmunoprecipitation,ChIP)相結(jié)合,用于測定特定的蛋白因子及其相關聯(lián)的染色質(zhì)相互作用。ChIA-PET 技術在人類癌細胞(Fullwoodet al 2009; Guoliang Li et al 2012)、小鼠胚胎干細胞(Handoko et al 2011)、神經(jīng)組細胞(Zhang et al 2013)等有著大量應用并發(fā)現(xiàn)了不同的交互類型,如增強子-啟動子
有不同的條形碼(barcode),因此可以識別出線性遠離但空間鄰近的多重相互作用的染色質(zhì)位點(Zhenget al2019)。相對于 ChIA-PET 和 Hi-C,ChIA-Drop 實驗操作更加簡單,且可以檢測到真正的多重染色質(zhì)相互作用。1.2 Hi-C 和原位 Hi-C 技術2009 年 Job Dekker 研究團隊首次提出了 Hi-C 技術,目的是為了能捕獲全基因組的染色質(zhì)空間交互。Hi-C 技術的主要步驟為:1. 利用甲醛溶液將蛋白質(zhì)、DNA 交聯(lián)在一起 2. 使用限制性內(nèi)切酶將 DNA 切成短片段 3. 利用有生物素標記的核苷酸將5′粘性末端補平 4. 在 DNA 濃度較低的環(huán)境中將交聯(lián)一起的 DNA 片段連接起來,再使用蛋白酶解除交聯(lián) 5. 利用超聲波打斷 DNA 片段,使用鏈霉親和素磁珠純化出帶有生物素標記的片段 6.雙端測序并用于后續(xù)研究(Lieberm-Anaiden et al 2009)。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]起航三維基因組學研究[J]. 李國亮,阮一駿,谷瑞升,杜生明. 科學通報. 2014(13)
本文編號:3037979
【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
C及其衍生技術原理圖(方亞平etal2018)
4圖 2. 染色質(zhì)結(jié)構的層次化(Bonev and Cavalli 2016)Figure 2. Hierarchical organization of chromatin structure(Bonev and Cavalli 2016)ChIA-PET 則是將配對末端標簽測序技術(Pair-End Tag Sequencing)與染色質(zhì)免疫共沉淀技術(ChromatinImmunoprecipitation,ChIP)相結(jié)合,用于測定特定的蛋白因子及其相關聯(lián)的染色質(zhì)相互作用。ChIA-PET 技術在人類癌細胞(Fullwoodet al 2009; Guoliang Li et al 2012)、小鼠胚胎干細胞(Handoko et al 2011)、神經(jīng)組細胞(Zhang et al 2013)等有著大量應用并發(fā)現(xiàn)了不同的交互類型,如增強子-啟動子
有不同的條形碼(barcode),因此可以識別出線性遠離但空間鄰近的多重相互作用的染色質(zhì)位點(Zhenget al2019)。相對于 ChIA-PET 和 Hi-C,ChIA-Drop 實驗操作更加簡單,且可以檢測到真正的多重染色質(zhì)相互作用。1.2 Hi-C 和原位 Hi-C 技術2009 年 Job Dekker 研究團隊首次提出了 Hi-C 技術,目的是為了能捕獲全基因組的染色質(zhì)空間交互。Hi-C 技術的主要步驟為:1. 利用甲醛溶液將蛋白質(zhì)、DNA 交聯(lián)在一起 2. 使用限制性內(nèi)切酶將 DNA 切成短片段 3. 利用有生物素標記的核苷酸將5′粘性末端補平 4. 在 DNA 濃度較低的環(huán)境中將交聯(lián)一起的 DNA 片段連接起來,再使用蛋白酶解除交聯(lián) 5. 利用超聲波打斷 DNA 片段,使用鏈霉親和素磁珠純化出帶有生物素標記的片段 6.雙端測序并用于后續(xù)研究(Lieberm-Anaiden et al 2009)。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]起航三維基因組學研究[J]. 李國亮,阮一駿,谷瑞升,杜生明. 科學通報. 2014(13)
本文編號:3037979
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