乳酸菌細(xì)菌素是乳酸菌生長(zhǎng)代謝產(chǎn)生有抑菌活性的蛋白或多肽類物質(zhì),具有抑菌譜廣、在人體內(nèi)無(wú)殘留、能作為天然防腐劑等優(yōu)點(diǎn)而倍受國(guó)內(nèi)外研究者的廣泛關(guān)注。其中乳酸鏈球菌素（Nisin）已廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)中,但隨著研究的深入,發(fā)現(xiàn)Nisin存在抑菌能力不穩(wěn)定、抑菌譜窄、抑菌時(shí)效短等諸多不足,限制了其在食品防腐領(lǐng)域的應(yīng)用。為了防止食品腐敗變質(zhì)、提高食品安全質(zhì)量,亟需開(kāi)發(fā)抑菌范圍廣、抑菌效果穩(wěn)定的新型生物防腐劑。本論文以金華火腿中分離篩選出的乳酸菌為研究對(duì)象,首先以排除有機(jī)酸、過(guò)氧化氫,蛋白酶驗(yàn)證為指標(biāo),篩選產(chǎn)細(xì)菌素乳酸菌;其次對(duì)細(xì)菌素進(jìn)行分離、純化,然后對(duì)細(xì)菌素純品進(jìn)行鑒定;最后研究細(xì)菌素純品的理化特性,為新型乳酸菌細(xì)菌素的開(kāi)發(fā)應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。本試驗(yàn)具體研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下:1.產(chǎn)廣譜細(xì)菌素乳酸菌的篩選及鑒定。從金華火腿中篩選并保藏的162株乳酸菌中,以大腸桿菌和金黃色葡萄球菌為指示菌,通過(guò)雙層瓊脂平板法和濁度法初篩出159株對(duì)兩種指示菌均有抑菌作用的乳酸菌;經(jīng)有機(jī)酸、過(guò)氧化氫排除試驗(yàn)復(fù)篩出4株具有抑菌作用的乳酸菌;最后經(jīng)蛋白酶消化驗(yàn)證試驗(yàn)獲得1株產(chǎn)細(xì)菌素的乳酸菌,對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌圈直... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１目的菌株的形態(tài)特征??－

中進(jìn)行同源性搜索，目的菌株與戊糖片球菌／＾／％此〇＾７＾；７／〇似（＾似１＾１５８８３４．１的相似度最??高為９８％，其結(jié)果與生理生化鑒定一致，確認(rèn)目的菌株為戊糖片球菌??），系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)如圖２－３所７Ｋ。??Ｍａｒｋｅｒ?目的菌株??２０００ｂｐ????ｌＯＯＯｂｐ????７５０ｂｐ????５００ｂｐ????２５０ｂｐ??ｌＯＯｂｐ????圖２－２目的菌株產(chǎn)物擴(kuò)增圖??Ｆｉｇ．?２－２?Ｐｒｏｄｕｃｔ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔａｒｇｅｔ?ｓｔｒａｉｎ??Ｔａｒｇｅｔ?ｓｔｒａｉｎ??９８?，??Ｐｅａｉｏｃｏｃｃｕｓ?ｐｅｎｒｏｓａｃｅｕｓ?Ｍ５８８３４．１??７３??ｒ＇－Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ?Ｂ．＼Ｆ７１５??＇￣Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ?ａｒｇｅｎｔｉｎｉｃｕｓ?ＣＲＬ７７６????Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ?ｓｒｉｌｅｓｉｉ?ＤＳＭ?１８００１??—Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｍ?ｃｅｌｌｉｃｏｌａ?Ｚ－８???Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ?ｐａｒａｐｌｍｉｆｒｉｎｎ?ＬＭＧ１６６７３??Ｉ?１??０．０５０??圖２－３目的菌株基于１６ＳｒＤＮＡ序列分析結(jié)果的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)??Ｆｉｇ．２－３?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔａｒｇｅｔ?ｓｔｒａｉｎ?ｂａｓｅｄ?ｏｎ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ??３本章小結(jié)??本章篩選產(chǎn)細(xì)菌素的乳酸菌并對(duì)其進(jìn)行菌種鑒定。從金華火腿中保藏的１６２株乳酸菌

?５?１０?１５?２０?２５?３０?３５??則？間（ｈ）??圖３－１戊糖片球菌Ｚ－１生長(zhǎng)曲線、ｐＨ及抑菌活性的變化??Ｆｉｇ．?３－１?Ｃｈａｎｇｅｓ?ｉｎ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ，?ｐＨ?ａｎｄ?ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?ｏｆ?Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ?Ｚ－１??２．１＿２抑菌效價(jià)曲線??由二倍系列稀釋法和雙層平板打孔法測(cè)定抑菌圈直徑，確定戊糖片球菌Ｚ－１培養(yǎng)２０?ｈ??離心上清液的效價(jià)。選取效價(jià)的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，抑菌圈直徑為縱坐標(biāo)，繪制戊糖片球菌??Ｚ－１的效價(jià)標(biāo)準(zhǔn)曲線。如圖３－２所示，在效價(jià)對(duì)數(shù)值在０－３．５的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)Ｒ２值為??０．９９３４，抑菌圈直徑與效價(jià)對(duì)數(shù)值呈良好的線性關(guān)系，可作為后續(xù)蛋白樣品效價(jià)測(cè)定的標(biāo)??準(zhǔn)曲線。??３５?－？??ｙ?＝?６．Ｓ２４２ｘ＾－９．８７８２??Ｒｒ?＝?０．９９３４?＃??ＢＯ?－?？？？＿．??奚?２５．??＇ｉ??沄２０．??－?．．．．??１５?－??１０?＾?１?１?１?１?１??????０?０．５?１?１．５?２?２．５?３?３．５??ｌｏｇＡＵ??圖３－２戊糖片球菌Ｚ－１的效價(jià)標(biāo)準(zhǔn)曲線??Ｆｉｇ．?３－２?Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ?ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ?Ｚ－１?ｔｉｔｅｒ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：2976331