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選擇性標記方法研究HK853的酸堿調(diào)控機制

發(fā)布時間:2021-01-06 16:45
  雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)(Two-component signal transduction system,TCS)是細菌感知和響應(yīng)周圍環(huán)境的主要手段,細菌的絕大多數(shù)生理過程(例如感知滲透壓、營養(yǎng)元素的代謝、細胞壁的合成、細胞的增值和分裂等)都受到雙組分系統(tǒng)的調(diào)控。雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)在細菌中廣泛存在,一些真菌和植物中也發(fā)現(xiàn)了一些雙組分系統(tǒng),但是目前為止還未在人類和其他哺乳動物中發(fā)現(xiàn)它的存在,雙組分系統(tǒng)因此被認為有發(fā)展為抗菌藥物靶點的潛力。組氨酸激酶(Histidine Kinase,HK)和應(yīng)答調(diào)節(jié)蛋白(Response Regulator,RR)是雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的兩個主要組成蛋白。HK能感應(yīng)環(huán)境刺激并將這種刺激信號通過磷酸基團的轉(zhuǎn)移傳遞給下游的RR,而磷酸化的RR能通過與基因或蛋白質(zhì)靶標的相互作用調(diào)控信號輸出,或者通過去磷酸化對細胞調(diào)控進行終止。在細菌的雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)中,大多數(shù)HK具有多功能性,不僅能實現(xiàn)自身磷酸化并傳遞磷酸基團給RR蛋白,還能介導(dǎo)催化RR蛋白的去磷酸化。在不同pH條件下,組氨酸激酶HK853胞內(nèi)全長蛋白(HK853cp)與底物應(yīng)答調(diào)節(jié)蛋白RR468形成的復(fù)合物的晶... 

【文章來源】:中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院武漢物理與數(shù)學(xué)研究所)湖北省

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

選擇性標記方法研究HK853的酸堿調(diào)控機制


圖1.1雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)??

選擇性標記方法研究HK853的酸堿調(diào)控機制


圖2.1A.RR468的結(jié)構(gòu);B.HK853的結(jié)構(gòu)??

陰離子交換柱層析


八.(???柱層析分離色譜。藍色曲線為1;¥(>1?=?28〇11111),紅色曲線為電導(dǎo)率,綠色為81^『6[8在溶??液中的體積分數(shù);B.?SDS-PAGE鑒定結(jié)果。其中第1孔道為Marker,左方標注為Marker每條條帶對??應(yīng)的蛋白分子量(kDa)?,?2?6孔道的樣品分別對應(yīng)圖2.2A中的標示2?6。??A.?QFF?column?chromatography?separation?chromatography.?The?blue?curve?is?UV?(k?=?280?nm),?the?red??curve?is?the?conductivity,?and?the?green?is?the?volume?fraction?of?Buffer?B;?B.?SDS-PAGE?identification??results.?The?first?well?is?Marker,?the?left?side?is?labeled?as?the?corresponding?protein?molecular?weight?(kDa)??of?each?strip?of?Marker


本文編號:2960908

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