新疆哈密地區(qū)原駝乳中乳酸菌多樣性及產(chǎn)細(xì)菌素菌株的篩選
發(fā)布時(shí)間:2020-12-31 10:55
目的:駱駝乳及其乳粉作為新疆的特色乳品,由于其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、低敏、對(duì)部分病原體具有一定的拮抗作用和醫(yī)療保健作用等優(yōu)點(diǎn)深受追捧。由于駱駝特殊的生存環(huán)境和飼喂方式,造就了駝乳獨(dú)特的微生物菌群。駝乳中天然存在微生物不僅影響駝乳的營(yíng)養(yǎng),也對(duì)駝奶的消費(fèi)者的健康存在潛在的影響。駝乳豐富的微生物也為篩選有效的乳酸發(fā)酵菌株和相關(guān)益生菌提供了獨(dú)特的來(lái)源,研究駝乳中乳酸菌的構(gòu)成和分布,對(duì)發(fā)酵駝乳制品的研發(fā)和利用具有潛在的價(jià)值。方法:本研究用三種選擇性培養(yǎng)基對(duì)采集的新疆哈密地區(qū)駱駝原乳中乳酸菌進(jìn)行分離培養(yǎng),結(jié)合rep-PCR指紋圖譜技術(shù)和16s rRNA測(cè)序技術(shù)將其鑒定到種的水平;然后,采取瓊脂擴(kuò)散法里牛津杯法篩選出具有高效廣譜抗菌的乳酸菌菌株;最后,通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)分析原駝乳中微生物多樣性,并與乳酸菌的培養(yǎng)法的研究結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。結(jié)論:1.對(duì)新疆哈密地區(qū)原駝乳進(jìn)行傳統(tǒng)分離培養(yǎng)后得到227株純培養(yǎng)物,通過(guò)革蘭氏染色和接酶觸反應(yīng)實(shí)驗(yàn)篩選出91株乳酸菌,根據(jù)16s rRNA基因序列測(cè)序技術(shù)結(jié)果統(tǒng)計(jì),91株乳酸菌菌株屬于Lactococcus、Leuconostoc、Enterococcus、Lactobacill...
【文章來(lái)源】:石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
部分初步分離的菌落形態(tài)
最后篩選出91株疑似乳酸菌的菌株。(見(jiàn)表2.4)在革蘭氏染色后的鏡檢觀(guān)察發(fā)現(xiàn),篩選出菌株的細(xì)胞大多數(shù)為球菌,少數(shù)為桿菌,一般是單個(gè)、成對(duì)或者連成一串的形式出現(xiàn)。(如圖2.2)圖2.1 部分初步分離的菌落形態(tài)Fig.2.1 Partially isolated colony morphology圖2.2 部分細(xì)胞形態(tài)FIg.2.2 Partial cell morphology表 2.4 原駝奶中乳酸菌菌株的形態(tài)特征分析Table 2.4 Morphological characteristics of Lactobacillus strains in Camel Milk菌株 菌落形態(tài) 細(xì)胞形態(tài) 革蘭氏染色 酶觸實(shí)驗(yàn)HMT8-4 乳白色 濕潤(rùn) 0.5-1 mm 球狀 G+-HMT8-5 乳白色 圓形 1-2 mm 球狀 G+-
菌株 DNA 為模板擴(kuò)增,將產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠上電泳實(shí)驗(yàn)后對(duì)選出的 91 株菌的指紋圖譜進(jìn)行對(duì)比去重如圖2.3 所示,圖中為去重后部分菌株的圖譜。圖 2.3 部分菌株(GTG)5-PCR 指紋圖譜Fig 2.3 (GTG)5 -PCR fingerprint patterns of partial Lactic acid bacteriaHMT61-60 乳白色 圓形 濕潤(rùn) 1 mm 球狀 G+-HMT61-63 白色 圓形 0.5-1mm 球狀 G+-HMT61-64 乳白色 凸起 濕潤(rùn) 0.5-1mm 球狀 G+-HMT61-66 乳黃色 濕潤(rùn) 2mm 球狀 G+-HMT61-68 白色 凸起 濕潤(rùn) 0.5-1mm 桿狀 G+-HMT62-1 乳白色 圓形 濕潤(rùn) 1 mm 球狀 G+-HMT62-2 米黃 凸起 濕潤(rùn) 1mm 球狀 G+-HMT62-5 灰白色 圓形 濕潤(rùn) 0.5mm 桿狀 G+-HMT62-11 乳白色 濕潤(rùn) 0.5-1 mm 桿狀 G+-HMT62-14 乳白色 濕潤(rùn) 0
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于16S rRNA技術(shù)分析柴胡龍骨牡蠣湯對(duì)精神分裂癥大鼠腸道菌群多樣性的影響[J]. 李自輝,龐牧,林佩锜,劉樹(shù)民. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2019(13)
[2]馬奶營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)進(jìn)展[J]. 敖敏,趙一萍,康德措,蘇少鋒,白東義,李蓓,格日樂(lè)其木格,張心壯,藺浩宇,魏繼堯,芒來(lái). 內(nèi)蒙古科技與經(jīng)濟(jì). 2018(20)
[3]16S rRNA基因測(cè)序在法醫(yī)學(xué)中的研究進(jìn)展[J]. 宋國(guó)慶,曹禹,李輝,馬克,趙雪瑩,鄒凱南,周懷谷. 法醫(yī)學(xué)雜志. 2018(05)
[4]基于16S rRNA序列對(duì)4種扇貝4個(gè)群體親緣關(guān)系分析[J]. 相明玥,曾令坤,李禎,田瑩,常亞青,丁君. 中國(guó)漁業(yè)質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn). 2018(03)
[5]青藏高原地區(qū)牦牛鮮奶和酸奶營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及微生物組成[J]. 楊超,丁學(xué)智,龍瑞軍. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2018(04)
[6]抑菌活性乳酸菌的篩選及其抑菌物質(zhì)的提取條件優(yōu)化[J]. 雙全,折米娜,薄禮娟. 食品工業(yè)科技. 2017(18)
[7]甘肅牦牛乳的研究進(jìn)展[J]. 席斌,高雅琴,郭天芬,李維紅,熊琳. 中國(guó)草食動(dòng)物科學(xué). 2017(03)
[8]高通量測(cè)序技術(shù)在乳制品微生物多樣性中的研究進(jìn)展[J]. 張敏,張艷,蘭國(guó)偉,關(guān)波,劉憶冬,周紅,倪永清. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2016(32)
[9]西藏羊八井地區(qū)牦牛酸乳中乳酸菌菌種鑒定[J]. 劉珊春,趙欣,騫宇,李鍵,陳煉紅,陳娟,索化夷. 食品工業(yè)科技. 2016(10)
[10]酸馬奶的醫(yī)療價(jià)值[J]. 新疆畜牧業(yè). 2015(09)
碩士論文
[1]鮮馬奶中營(yíng)養(yǎng)成分及微生物群落結(jié)構(gòu)的研究[D]. 李枝.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]青海部分牧區(qū)牦牛乳制品中產(chǎn)胞外多糖乳酸菌的分離鑒定及特性研究[D]. 唐超群.青海大學(xué) 2016
[3]新疆地區(qū)干酪中產(chǎn)細(xì)菌素乳酸菌的篩選、系統(tǒng)發(fā)育及其抑菌活性研究[D]. 楊尚嬌.石河子大學(xué) 2015
[4]新疆傳統(tǒng)發(fā)酵駝乳對(duì)免疫低下BALB/c小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用研究[D]. 楊珊.新疆醫(yī)科大學(xué) 2014
[5]發(fā)酵香腸中高產(chǎn)細(xì)菌素乳酸菌的篩選鑒定及發(fā)酵條件研究[D]. 梁紅敏.齊魯工業(yè)大學(xué) 2013
[6]我國(guó)傳統(tǒng)奶制品中乳酸菌多樣性研究[D]. 何蕾.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[7]西寧地區(qū)泡菜乳酸菌生物學(xué)特性及發(fā)酵工藝的研究[D]. 楊予青.青海師范大學(xué) 2008
[8]酸馬奶酒中兩株產(chǎn)抑菌物質(zhì)乳酸菌培養(yǎng)基優(yōu)化與抑菌物質(zhì)的提取[D]. 翟光超.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
本文編號(hào):2949483
【文章來(lái)源】:石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
部分初步分離的菌落形態(tài)
最后篩選出91株疑似乳酸菌的菌株。(見(jiàn)表2.4)在革蘭氏染色后的鏡檢觀(guān)察發(fā)現(xiàn),篩選出菌株的細(xì)胞大多數(shù)為球菌,少數(shù)為桿菌,一般是單個(gè)、成對(duì)或者連成一串的形式出現(xiàn)。(如圖2.2)圖2.1 部分初步分離的菌落形態(tài)Fig.2.1 Partially isolated colony morphology圖2.2 部分細(xì)胞形態(tài)FIg.2.2 Partial cell morphology表 2.4 原駝奶中乳酸菌菌株的形態(tài)特征分析Table 2.4 Morphological characteristics of Lactobacillus strains in Camel Milk菌株 菌落形態(tài) 細(xì)胞形態(tài) 革蘭氏染色 酶觸實(shí)驗(yàn)HMT8-4 乳白色 濕潤(rùn) 0.5-1 mm 球狀 G+-HMT8-5 乳白色 圓形 1-2 mm 球狀 G+-
菌株 DNA 為模板擴(kuò)增,將產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠上電泳實(shí)驗(yàn)后對(duì)選出的 91 株菌的指紋圖譜進(jìn)行對(duì)比去重如圖2.3 所示,圖中為去重后部分菌株的圖譜。圖 2.3 部分菌株(GTG)5-PCR 指紋圖譜Fig 2.3 (GTG)5 -PCR fingerprint patterns of partial Lactic acid bacteriaHMT61-60 乳白色 圓形 濕潤(rùn) 1 mm 球狀 G+-HMT61-63 白色 圓形 0.5-1mm 球狀 G+-HMT61-64 乳白色 凸起 濕潤(rùn) 0.5-1mm 球狀 G+-HMT61-66 乳黃色 濕潤(rùn) 2mm 球狀 G+-HMT61-68 白色 凸起 濕潤(rùn) 0.5-1mm 桿狀 G+-HMT62-1 乳白色 圓形 濕潤(rùn) 1 mm 球狀 G+-HMT62-2 米黃 凸起 濕潤(rùn) 1mm 球狀 G+-HMT62-5 灰白色 圓形 濕潤(rùn) 0.5mm 桿狀 G+-HMT62-11 乳白色 濕潤(rùn) 0.5-1 mm 桿狀 G+-HMT62-14 乳白色 濕潤(rùn) 0
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于16S rRNA技術(shù)分析柴胡龍骨牡蠣湯對(duì)精神分裂癥大鼠腸道菌群多樣性的影響[J]. 李自輝,龐牧,林佩锜,劉樹(shù)民. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2019(13)
[2]馬奶營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)進(jìn)展[J]. 敖敏,趙一萍,康德措,蘇少鋒,白東義,李蓓,格日樂(lè)其木格,張心壯,藺浩宇,魏繼堯,芒來(lái). 內(nèi)蒙古科技與經(jīng)濟(jì). 2018(20)
[3]16S rRNA基因測(cè)序在法醫(yī)學(xué)中的研究進(jìn)展[J]. 宋國(guó)慶,曹禹,李輝,馬克,趙雪瑩,鄒凱南,周懷谷. 法醫(yī)學(xué)雜志. 2018(05)
[4]基于16S rRNA序列對(duì)4種扇貝4個(gè)群體親緣關(guān)系分析[J]. 相明玥,曾令坤,李禎,田瑩,常亞青,丁君. 中國(guó)漁業(yè)質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn). 2018(03)
[5]青藏高原地區(qū)牦牛鮮奶和酸奶營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及微生物組成[J]. 楊超,丁學(xué)智,龍瑞軍. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2018(04)
[6]抑菌活性乳酸菌的篩選及其抑菌物質(zhì)的提取條件優(yōu)化[J]. 雙全,折米娜,薄禮娟. 食品工業(yè)科技. 2017(18)
[7]甘肅牦牛乳的研究進(jìn)展[J]. 席斌,高雅琴,郭天芬,李維紅,熊琳. 中國(guó)草食動(dòng)物科學(xué). 2017(03)
[8]高通量測(cè)序技術(shù)在乳制品微生物多樣性中的研究進(jìn)展[J]. 張敏,張艷,蘭國(guó)偉,關(guān)波,劉憶冬,周紅,倪永清. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2016(32)
[9]西藏羊八井地區(qū)牦牛酸乳中乳酸菌菌種鑒定[J]. 劉珊春,趙欣,騫宇,李鍵,陳煉紅,陳娟,索化夷. 食品工業(yè)科技. 2016(10)
[10]酸馬奶的醫(yī)療價(jià)值[J]. 新疆畜牧業(yè). 2015(09)
碩士論文
[1]鮮馬奶中營(yíng)養(yǎng)成分及微生物群落結(jié)構(gòu)的研究[D]. 李枝.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]青海部分牧區(qū)牦牛乳制品中產(chǎn)胞外多糖乳酸菌的分離鑒定及特性研究[D]. 唐超群.青海大學(xué) 2016
[3]新疆地區(qū)干酪中產(chǎn)細(xì)菌素乳酸菌的篩選、系統(tǒng)發(fā)育及其抑菌活性研究[D]. 楊尚嬌.石河子大學(xué) 2015
[4]新疆傳統(tǒng)發(fā)酵駝乳對(duì)免疫低下BALB/c小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用研究[D]. 楊珊.新疆醫(yī)科大學(xué) 2014
[5]發(fā)酵香腸中高產(chǎn)細(xì)菌素乳酸菌的篩選鑒定及發(fā)酵條件研究[D]. 梁紅敏.齊魯工業(yè)大學(xué) 2013
[6]我國(guó)傳統(tǒng)奶制品中乳酸菌多樣性研究[D]. 何蕾.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[7]西寧地區(qū)泡菜乳酸菌生物學(xué)特性及發(fā)酵工藝的研究[D]. 楊予青.青海師范大學(xué) 2008
[8]酸馬奶酒中兩株產(chǎn)抑菌物質(zhì)乳酸菌培養(yǎng)基優(yōu)化與抑菌物質(zhì)的提取[D]. 翟光超.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
本文編號(hào):2949483
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