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利用轉(zhuǎn)基因家蠶絲腺表達重組hVEGF165的研究

發(fā)布時間:2020-12-30 15:19
  鱗翅目昆蟲家蠶(Bombyx mori)是重要的產(chǎn)絲昆蟲,至今已被人類飼養(yǎng)利用逾5000年。家蠶絲腺是合成和分泌蠶絲蛋白的專一場所(一頭家蠶可生產(chǎn)約0.5克絲蛋白),是蠶絲業(yè)最為核心的生物學基礎。近些年來,隨著生物技術(shù)的蓬勃發(fā)展,特別是近年在家蠶基因組計劃的推動下,人們對絲腺高效合成與分泌絲蛋白的分子機制有了深入了解,同時也注意到家蠶不僅能用于產(chǎn)絲織綢,其絲腺還是一個理想的生物反應器。2003年,日本學者首次報道了利用轉(zhuǎn)基因家蠶絲腺表達重組人Ⅲ型膠原蛋白,其后,國內(nèi)外學者利用轉(zhuǎn)基因家蠶絲腺已成功表達了數(shù)十種外源蛋白,少數(shù)重組蛋白素材已進入中試或產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)階段,表明利用家蠶絲腺作為生物反應器生產(chǎn)重組蛋白,有著巨大的開發(fā)應用潛力。人血管內(nèi)皮生長因子(human vascular endothelial growth factor,hVEGF)是一種對內(nèi)皮細胞具有高度特異性的有絲分裂原,在血管再生和血管發(fā)生中起著重要作用。hVEGF165是hVEGF-A亞型中組織表達頻率最高、最具生理相關性的一種異構(gòu)體,在外周缺血性疾病或慢性傷口的治療性血管再生研究中效果顯著。目前,重組hVEGF165蛋白... 

【文章來源】:西南大學重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

利用轉(zhuǎn)基因家蠶絲腺表達重組hVEGF165的研究


絲腺表達系統(tǒng)示意圖

三維結(jié)構(gòu)


圖 3 VEGF 的三維結(jié)構(gòu)[59]Figure 3 The three-dimensional structure of VEGF是新生血管網(wǎng)絡的形成,在胚胎發(fā)育,器官穩(wěn)態(tài)和疾病進程中具血管發(fā)成主要由幾種不同的生長因子及其相關的受體酪氨酸激es,RTKs)調(diào)控。其中最為重要的是血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)體(Vascular Endothelial Growth Factor Receptors,VEGFR)。VEGvascular permeability factor,VPF),是內(nèi)皮細胞生理的重要調(diào)節(jié)因大小在 34-42kDa 的由二硫鍵結(jié)合的二聚體糖蛋白[60],在成人正上腺中 VEGF-A 的 mRNA 表達水平最高,而在肝、脾和胃粘膜,但仍可輕易檢測。VEGF-A 基因由 7 個內(nèi)含子和 8 個外顯子組的剪切從而產(chǎn)生不同的異構(gòu)體[61,62]。VEGF-A 至少存在 7 個同型由 121,145,148,165,183,189 和 206 個氨基酸組成(圖 4),編碼的氨基酸在除 VEGF148 以外的所有亞基中都是保守的,而 6 和第 7 外顯子中,它們編碼兩個不同的肝素結(jié)合區(qū),這些結(jié)構(gòu)

結(jié)構(gòu)比較,家族,成員


圖 4 VEGF 家族各成員的結(jié)構(gòu)比較[63]Figure 4 Comparison of structures of the VEGF family皮生長因子受體(Vascular Endothelial Growth Factor Receptors,VEGFR),-like tyrosine kinase,F(xiàn)lt-1)[67],VEGFR-2(kinase domain rFlt-4)[69],它們均屬于受體酪氨酸激酶超家族膜蛋白。其共白同源區(qū)重復序列,一個跨膜結(jié)構(gòu)域和一個分裂酪氨酸激酶EGFR-1 和 VEGFR-2,VEGF-B 和 PIGF 結(jié)合 VEGFR-1,VE但是 VEGF-C,D 經(jīng)過蛋白酶裂解后也可與 VEGFR-2 結(jié)合成員可與非酪氨酸激酶受體(non-tyrosine kinase receptors,為是 VEGFR2 的共受體[71]。中,VEGFR-1 和 VEGFR-2 表達水平最高,在調(diào)節(jié)血管ECs)的增殖,遷移中起著重要作用。在不同的 VEGF 配體中中的作用最為清楚。VEGFR-2 主要表達在血管和淋巴管

【參考文獻】:
期刊論文
[1]家蠶轉(zhuǎn)基因技術(shù)中若干因素對轉(zhuǎn)基因效率的影響[J]. 馬三垣,徐漢福,段建平,趙愛春,張美蓉,夏慶友.  昆蟲學報. 2009(06)



本文編號:2947865

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