利用轉(zhuǎn)基因家蠶絲腺表達(dá)重組hVEGF165的研究
發(fā)布時(shí)間：2020-12-30 15:19
鱗翅目昆蟲家蠶（Bombyx mori）是重要的產(chǎn)絲昆蟲,至今已被人類飼養(yǎng)利用逾5000年。家蠶絲腺是合成和分泌蠶絲蛋白的專一場(chǎng)所（一頭家蠶可生產(chǎn)約0.5克絲蛋白）,是蠶絲業(yè)最為核心的生物學(xué)基礎(chǔ)。近些年來(lái),隨著生物技術(shù)的蓬勃發(fā)展,特別是近年在家蠶基因組計(jì)劃的推動(dòng)下,人們對(duì)絲腺高效合成與分泌絲蛋白的分子機(jī)制有了深入了解,同時(shí)也注意到家蠶不僅能用于產(chǎn)絲織綢,其絲腺還是一個(gè)理想的生物反應(yīng)器。2003年,日本學(xué)者首次報(bào)道了利用轉(zhuǎn)基因家蠶絲腺表達(dá)重組人Ⅲ型膠原蛋白,其后,國(guó)內(nèi)外學(xué)者利用轉(zhuǎn)基因家蠶絲腺已成功表達(dá)了數(shù)十種外源蛋白,少數(shù)重組蛋白素材已進(jìn)入中試或產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)階段,表明利用家蠶絲腺作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)重組蛋白,有著巨大的開(kāi)發(fā)應(yīng)用潛力。人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（human vascular endothelial growth factor,hVEGF）是一種對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞具有高度特異性的有絲分裂原,在血管再生和血管發(fā)生中起著重要作用。hVEGF165是hVEGF-A亞型中組織表達(dá)頻率最高、最具生理相關(guān)性的一種異構(gòu)體,在外周缺血性疾病或慢性傷口的治療性血管再生研究中效果顯著。目前,重組hVEGF165蛋白...
【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
絲腺表達(dá)系統(tǒng)示意圖
圖 3 VEGF 的三維結(jié)構(gòu)[59]Figure 3 The three-dimensional structure of VEGF是新生血管網(wǎng)絡(luò)的形成，在胚胎發(fā)育，器官穩(wěn)態(tài)和疾病進(jìn)程中具血管發(fā)成主要由幾種不同的生長(zhǎng)因子及其相關(guān)的受體酪氨酸激es，RTKs）調(diào)控。其中最為重要的是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）體（Vascular Endothelial Growth Factor Receptors，VEGFR）。VEGvascular permeability factor，VPF），是內(nèi)皮細(xì)胞生理的重要調(diào)節(jié)因大小在 34-42kDa 的由二硫鍵結(jié)合的二聚體糖蛋白[60]，在成人正上腺中 VEGF-A 的 mRNA 表達(dá)水平最高，而在肝、脾和胃粘膜，但仍可輕易檢測(cè)。VEGF-A 基因由 7 個(gè)內(nèi)含子和 8 個(gè)外顯子組的剪切從而產(chǎn)生不同的異構(gòu)體[61,62]。VEGF-A 至少存在 7 個(gè)同型由 121，145，148，165，183，189 和 206 個(gè)氨基酸組成（圖 4），編碼的氨基酸在除 VEGF148 以外的所有亞基中都是保守的，而 6 和第 7 外顯子中，它們編碼兩個(gè)不同的肝素結(jié)合區(qū)，這些結(jié)構(gòu)
圖 4 VEGF 家族各成員的結(jié)構(gòu)比較[63]Figure 4 Comparison of structures of the VEGF family皮生長(zhǎng)因子受體（Vascular Endothelial Growth Factor Receptors，VEGFR)，-like tyrosine kinase，F(xiàn)lt-1）[67]，VEGFR-2（kinase domain rFlt-4）[69]，它們均屬于受體酪氨酸激酶超家族膜蛋白。其共白同源區(qū)重復(fù)序列，一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和一個(gè)分裂酪氨酸激酶EGFR-1 和 VEGFR-2，VEGF-B 和 PIGF 結(jié)合 VEGFR-1，VE但是 VEGF-C，D 經(jīng)過(guò)蛋白酶裂解后也可與 VEGFR-2 結(jié)合成員可與非酪氨酸激酶受體（non-tyrosine kinase receptors，為是 VEGFR2 的共受體[71]。中，VEGFR-1 和 VEGFR-2 表達(dá)水平最高，在調(diào)節(jié)血管ECs)的增殖，遷移中起著重要作用。在不同的 VEGF 配體中中的作用最為清楚。VEGFR-2 主要表達(dá)在血管和淋巴管
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]家蠶轉(zhuǎn)基因技術(shù)中若干因素對(duì)轉(zhuǎn)基因效率的影響[J]. 馬三垣,徐漢福,段建平,趙愛(ài)春,張美蓉,夏慶友. 昆蟲學(xué)報(bào). 2009(06)
本文編號(hào)：2947865
【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
絲腺表達(dá)系統(tǒng)示意圖
圖 3 VEGF 的三維結(jié)構(gòu)[59]Figure 3 The three-dimensional structure of VEGF是新生血管網(wǎng)絡(luò)的形成，在胚胎發(fā)育，器官穩(wěn)態(tài)和疾病進(jìn)程中具血管發(fā)成主要由幾種不同的生長(zhǎng)因子及其相關(guān)的受體酪氨酸激es，RTKs）調(diào)控。其中最為重要的是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）體（Vascular Endothelial Growth Factor Receptors，VEGFR）。VEGvascular permeability factor，VPF），是內(nèi)皮細(xì)胞生理的重要調(diào)節(jié)因大小在 34-42kDa 的由二硫鍵結(jié)合的二聚體糖蛋白[60]，在成人正上腺中 VEGF-A 的 mRNA 表達(dá)水平最高，而在肝、脾和胃粘膜，但仍可輕易檢測(cè)。VEGF-A 基因由 7 個(gè)內(nèi)含子和 8 個(gè)外顯子組的剪切從而產(chǎn)生不同的異構(gòu)體[61,62]。VEGF-A 至少存在 7 個(gè)同型由 121，145，148，165，183，189 和 206 個(gè)氨基酸組成（圖 4），編碼的氨基酸在除 VEGF148 以外的所有亞基中都是保守的，而 6 和第 7 外顯子中，它們編碼兩個(gè)不同的肝素結(jié)合區(qū)，這些結(jié)構(gòu)
圖 4 VEGF 家族各成員的結(jié)構(gòu)比較[63]Figure 4 Comparison of structures of the VEGF family皮生長(zhǎng)因子受體（Vascular Endothelial Growth Factor Receptors，VEGFR)，-like tyrosine kinase，F(xiàn)lt-1）[67]，VEGFR-2（kinase domain rFlt-4）[69]，它們均屬于受體酪氨酸激酶超家族膜蛋白。其共白同源區(qū)重復(fù)序列，一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和一個(gè)分裂酪氨酸激酶EGFR-1 和 VEGFR-2，VEGF-B 和 PIGF 結(jié)合 VEGFR-1，VE但是 VEGF-C，D 經(jīng)過(guò)蛋白酶裂解后也可與 VEGFR-2 結(jié)合成員可與非酪氨酸激酶受體（non-tyrosine kinase receptors，為是 VEGFR2 的共受體[71]。中，VEGFR-1 和 VEGFR-2 表達(dá)水平最高，在調(diào)節(jié)血管ECs)的增殖，遷移中起著重要作用。在不同的 VEGF 配體中中的作用最為清楚。VEGFR-2 主要表達(dá)在血管和淋巴管
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]家蠶轉(zhuǎn)基因技術(shù)中若干因素對(duì)轉(zhuǎn)基因效率的影響[J]. 馬三垣,徐漢福,段建平,趙愛(ài)春,張美蓉,夏慶友. 昆蟲學(xué)報(bào). 2009(06)
本文編號(hào)：2947865
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