發(fā)布時間：2020-08-31 20:03

　　 蟈螽屬Gampsocleis Fieber,1852隸屬于直翅目(Orthoptera)螽斯科(Tettigoniidae)。迄今,世界記錄蟈螽屬17種,中國記錄11種。多數(shù)蟈螽屬物種發(fā)表時間較早,形態(tài)學(xué)特征描述簡單,對基于形態(tài)學(xué)的物種鑒定造成一定困難。本研究基于線粒體COI(DNA條形碼標(biāo)準(zhǔn)片段)和CytB基因片段,運(yùn)用BIN、ABGD、jMOTU、GMYC和bPTP等5種單分子物種界定方法對中國蟈螽屬樣本進(jìn)行分子界定的基礎(chǔ)上,聯(lián)合形態(tài)學(xué)特征與鳴聲數(shù)據(jù),以期確定物種界限和種間親緣關(guān)系。本研究共涉及蟈螽屬6種536個樣本,形態(tài)學(xué)初步鑒定為優(yōu)雅蟈螽G.gratiosa、暗褐蟈螽G.sedakovii、烏蘇里蟈螽G.ussuriensis、中華蟈螽G.sinensis、隆線蟈螽G.carinata和禿毛蟈螽G.glabra,以3個鼓翅鳴螽Uvarovites inflatus樣本作為外群。研究結(jié)果如下:1、共測得蟈螽屬536條COI和487條CytB序列,去除重復(fù)后分別得到264和237個單倍型,用于后續(xù)分析;獲得3個鼓翅鳴螽U.inflatus樣本的COI和CytB序列,分別獲得3和2個單倍型。2、基于K2P構(gòu)建的NJ系統(tǒng)樹及5種分子界定結(jié)果均支持禿毛蟈螽G.glabra分類學(xué)地位。3、多種分析方法均無法將烏蘇里蟈螽G.ussuriensis與中華蟈螽G.sinensis分開;經(jīng)詳細(xì)檢視樣本,未發(fā)現(xiàn)顯著的形態(tài)特征差異。將中華蟈螽G.sinensis與模式標(biāo)本詳細(xì)比較,確定本研究中的中華蟈螽G.sinensis樣本鑒定無誤。因此,本研究中烏蘇里蟈螽G.ussuriensis樣本是中華蟈螽G.sinensis的錯誤鑒定,推測我國北方的烏蘇里蟈螽G.ussuriensis應(yīng)是中華蟈螽G.sinensis。4、基于COI和CytB構(gòu)建的NJ系統(tǒng)樹均將暗褐蟈螽G.sedakovii分為2個分支。其中,COI分析結(jié)果中2個分支組成1個大的單系支,而CytB分析結(jié)果中,暗褐蟈螽指名亞種G.sedakovii sedakovii與中華蟈螽G.sinensis呈姊妹群關(guān)系。進(jìn)一步檢視兩個分支的樣本,發(fā)現(xiàn)其在雄性外生殖器和尾須、以及雌性下生殖板等方面存在差異,但基于先前亞種形態(tài)學(xué)劃分依據(jù)(前翅長、前翅長與前胸背板比)不能將2個分支完全分開;鳴聲分析結(jié)果也無顯著差異。綜合得出,本研究支持暗褐蟈螽指名亞種G.sedakovii sedakovii與遠(yuǎn)東亞種G.sedakovii obscura的劃分,但仍需進(jìn)一步找尋形態(tài)學(xué)劃分依據(jù)。5、不同分子界定方法將隆線蟈螽G.carinata劃分為1 5個OTUs�；贑OI構(gòu)建的NJ系統(tǒng)樹,采自甘肅的樣本和山西的樣本各自形成單系分支;而基于CytB構(gòu)建的NJ系統(tǒng)樹,采自山西的樣本無法形成單系分支。進(jìn)一步檢視樣本,未發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定的形態(tài)特征差異。鳴聲分析,在組成音節(jié)的脈沖和音節(jié)持續(xù)時間上存在差異。6、基于COI和CytB的多種分析均支持將采自山東的優(yōu)雅蟈螽G.gratiosa與其他地區(qū)分開。檢視樣本,發(fā)現(xiàn)外生殖器和尾須存在顯著差異。鳴聲分析,在組成音節(jié)的脈沖和音節(jié)持續(xù)時間上存在差異。因此,本研究認(rèn)為應(yīng)恢復(fù)傅氏蟈螽G.fletcheri的分類學(xué)地位。本研究發(fā)現(xiàn)擴(kuò)散能力較弱的短翅昆蟲更易受到生境破碎化的影響,僅基于DNA分子界定方法難以有效劃分,應(yīng)聯(lián)合多種數(shù)據(jù)進(jìn)行物種界定。因此,整合3種物種界定方法,并與地理分布相結(jié)合,最終將中國蟈螽屬劃分為6個種(亞種),分別為:中華蟈螽G.sinensis,暗褐蟈螽指名亞種G.sedakovii sedakovii,暗褐蟈螽遠(yuǎn)東亞種G.sedakovii obscura,隆線蟈螽G.carinata,優(yōu)雅蟈螽G.gratiosa與傅氏蟈螽G.fletcheri。
【學(xué)位單位】：河北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：Q969.263.2
【部分圖文】：

圖 3-1 部分樣本 COI 基因 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖Figure 3-1 The electrophorisis result of PCR product of COI gene of part of specimen

圖 3-2 部分樣本 CytB 基因 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖Figure 3-2 The electrophorisis result of PCR product of CYTB gene of part of specimen1.1.1 序列測定將測序結(jié)果進(jìn)行拼接，并上傳到 NCBI 進(jìn)行 Blast，查看物種和擴(kuò)增片段相似度，

圖 3-3 COI 和 CytB 基因種間、種內(nèi)遺傳距離頻率分布柱形圖Figure 3-3 Column diagram of interspecific and intraspecific genetic distance frequencydistribution of COI and CytB genes

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本文編號：2809260