【摘要】：乳酸菌胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)是一些乳酸菌在生長階段分泌出的次生代謝產物,具有抗氧化、抗腫瘤、清除膽固醇、提高免疫力、調節(jié)腸道菌群等眾多益生功能。乳酸菌胞外多糖理化性質穩(wěn)定、無毒無害,故可作為天然食品添加劑改善乳制品的流變性、乳化性、黏著性和質構,還能改善焙烤類食品的保水性。本研究在實驗室前期研究的基礎上,對鼠李糖乳桿菌BMBL0606胞外多糖提取工藝進行優(yōu)化,并對其進行提取率測定、成分分析和抗氧化能力測定;對提取得到的粗EPS進行分離純化得到單一組分,并進行光譜分析、抗氧化活性測定;最后利用鼠李糖乳桿菌胞外多糖作為有效活性成分制備抗氧化滴丸,對其制備過程中的基質配比和滴制溫度進行優(yōu)化,分析其多糖含量、溶出速度和抗氧化活性。結果如下:1.胞外多糖提取工藝優(yōu)化:1)除蛋白工藝中,聚酰胺法要優(yōu)于三氯乙酸法,最佳的聚酰胺添加量為120 g/L,最佳的除蛋白時間為4 h;2)在醇沉工藝中,最佳的濃縮倍數(shù)為濃縮至原體積的20%,最佳的初始pH為7,最佳的乙醇添加量為4倍體積95%乙醇,最佳的醇沉時間為12 h;3)在最佳條件下,EPS提取率可達15.5 g/L發(fā)酵液,其中總糖占74.07%、蛋白質占1.19%、脂肪占0.76%、總酚占0.12%;4)20 mg/mL EPS總抗氧化能力相當于0.57 mM Trolox,Abts.~+清除率為69.46%。2.胞外多糖的分離純化:粗EPS經過DEAE-52纖維素離子交換柱后被分離成三個組分,分別命名為EPS-1、EPS-2、EPS-3。EPS-1在體外有較強的清除DPPH、OH、Abts.~+自由基能力,而EPS-2的抗氧化能力較弱。3.抗氧化滴丸的開發(fā):1)EPS滴丸的最優(yōu)基質配比為PEG 2000:6000=1:1,最優(yōu)滴制溫度為75℃,此條件下滴丸成型率達到98.1%,平均丸重為0.022 g,丸重差異和溶散時限均在《中國藥典》規(guī)定范圍之內;2)在最佳條件下制得的滴丸總糖含量為17.17 mg/g;3)DPPH自由基半數(shù)清除濃度(IC_(50))為227.32 mg/mL,OH自由基IC_(50)為43.15 mg/mL。綜上所述,本研究通過對鼠李糖乳桿菌胞外多糖的提取工藝進行優(yōu)化,提高了成品的品質和得率;對最優(yōu)提取工藝下得到的胞外多糖進行分離純化,分析單一組分的結構和抗氧化活性,為日后鼠李糖乳桿菌胞外多糖在食品、醫(yī)藥行業(yè)中的應用提供依據(jù);優(yōu)化了胞外多糖滴丸的制備工藝,對其物理性質和抗氧化活性進行分析,為未來工業(yè)化大規(guī)模生產抗氧化滴丸提供參考。
【學位授予單位】：遼寧大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：TS201.3
【圖文】：

PS 濃度的提高，DPPH 自由基清除能力逐漸提高，PA 法 DPPH 自由基活性始終高于 TCA 法除蛋白。這是由于蛋白質變性、凝聚成沉淀的過程中，也會打破 EPS 的原性，還會降低 EPS 提取率。PA 法是利用吸附作用去除蛋構、活性影響較小。圖 1-1 兩種除蛋白方法對 EPS 清除 DPPH 自由基能力的影響

著 EPS 濃度的提高，DPPH 自由基清除能力逐漸提高，PA 法除蛋S 清除 DPPH 自由基活性始終高于 TCA 法除蛋白。這是由于 TCA在使蛋白質變性、凝聚成沉淀的過程中，也會打破 EPS 的原有結其活性，還會降低 EPS 提取率。PA 法是利用吸附作用去除蛋白質糖結構、活性影響較小。圖 1-1 兩種除蛋白方法對 EPS 清除 DPPH 自由基能力的影響

清除率隨 PA 添加量的提高而升高（見圖 1-3），PA 添加量率的增長顯而易見，大于 120 g/ L 時增長速度漸緩。故加量，此時發(fā)酵液中剩余蛋白質濃度為 47.38 μg/ mL理時間對除蛋白效果的影響圖 1-3 聚酰胺添加量對除蛋白效果的影響

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 閆瑛楠;劉長虹;李志建;屈凌波;;添加乳酸菌胞外多糖對面團流變特性的影響[J];糧油食品科技;2015年01期

2 吳曉敏;韓利文;王希敏;陳維云;楊官娥;劉可春;;不同產地新鮮紫色馬鈴薯中花色苷及總酚的含量測定[J];中國食物與營養(yǎng);2014年05期

3 李超;王春鳳;楊桂連;;乳酸菌胞外多糖腸道黏附及免疫調節(jié)作用研究進展[J];食品科學;2014年11期

4 劉曉連;李亞蕾;羅瑞明;盧君逸;;靈武長棗水提多糖結構特征及理化性質[J];食品科學;2013年15期

5 王玉華;高晶;張靜;胡耀輝;;鼠李糖乳桿菌B10通過抗氧化途徑改善酒精性肝損傷的研究[J];食品科學;2012年23期

6 馮美琴;邱遠;張琦;瑪依諾·木圖拉;陳曉紅;董明盛;;響應曲面法優(yōu)化植物乳桿菌胞外多糖的醇沉工藝[J];食品科學;2011年19期

7 王周;黃生權;寧正祥;;靈芝水溶性粗多糖脫蛋白方法研究[J];食品科技;2010年08期

8 孟利;張?zhí)m威;;聚酰胺柱層析法去除西藏靈菇胞外多糖發(fā)酵液中蛋白質的研究[J];食品工業(yè)科技;2007年10期

9 劉麗波,劉寧,孟祥晨;影響乳酸菌胞外多糖合成的因素[J];中國乳品工業(yè);2004年02期

10 郭立安,閻哲,張曉楠,武麗華;三氯乙酸對蛋白質結構穩(wěn)定性的影響[J];第四軍醫(yī)大學學報;2001年22期

相關博士學位論文 前2條

1 白麗娟;馬奶酒中產胞外多糖瑞士乳桿菌的篩選及多糖的結構和抗氧化活性研究[D];沈陽農業(yè)大學;2017年

2 王坤;植物乳桿菌胞外多糖結構鑒定、化學修飾及生物活性研究[D];南京農業(yè)大學;2015年

相關碩士學位論文 前3條

1 張建麗;產EPS乳酸菌發(fā)酵特性及對發(fā)酵乳流變特性的影響[D];內蒙古農業(yè)大學;2017年

2 周海璐;益生菌細胞壁多糖提取與生物學活性研究[D];遼寧大學;2017年

3 崔學敏;益生菌胞外多糖分離與生物學活性研究[D];遼寧大學;2016年

本文編號：2791327