【摘要】：鄂爾多斯半日花(Helianthemum ordosicum Y.Z.Zhao,Z.Y.Zhu et R.Cao)為珍稀瀕危的第三紀(jì)古地中海植物區(qū)系殘遺種,種群分布面積狹小。本研究以鄂爾多斯半日花無菌苗和成體植株為實驗材料,在適宜培養(yǎng)環(huán)境中通過改變外源激素的濃度和配比控制外植體定向分化獲得試管苗,實驗了各生長階段的適宜培養(yǎng)基種類和激素組系,探討了光照、pH、外植體種類等因素對半日花組織培養(yǎng)的影響,成功構(gòu)建了多種外植體組織培養(yǎng)植株再生體系。這一研究對半日花物種保護(hù)和種質(zhì)資源保存有重要意義。主要結(jié)果與結(jié)論如下:1.半日花無菌苗子葉,真葉,莖尖,帶芽莖,無芽莖,成體植株葉片,莖尖,帶芽莖,幼嫩無芽莖可以通過組織培養(yǎng)獲得再生苗;無菌苗根,成體植株木質(zhì)化莖段和根不能通過組織培養(yǎng)獲得再生苗。2.半日花外植體誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)最適光照強(qiáng)度為43-58μmol·m~(-2)·s~(-1),分化培養(yǎng)最適光照強(qiáng)度為45-58μmol·m~(-2)·s~(-1),生根培養(yǎng)最適光照強(qiáng)度為55-70μmol·m~(-2)·s~(-1),加大紅光比例可抑制愈傷組織褐化;外植體誘導(dǎo)、增殖、分化、生根最適pH為5.8。3.依次使用75%酒精浸泡30 s,0.5%NaClO_4浸泡8 min,0.1%升汞浸泡8 min消毒處理的外植體愈傷組織誘導(dǎo)成活率最高。外植體消毒的難易程度受到材料幼嫩程度和季節(jié)因素影響,幼嫩外植體消毒效果優(yōu)于老化外植體,6-8月取材外植體消毒效果最好。4.以無菌苗子葉、真葉、無芽莖為外植體,愈傷組織誘導(dǎo)增殖最優(yōu)培養(yǎng)基為MS+8.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA,不定芽分化最優(yōu)培養(yǎng)基為MS+0.05 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA;生根最優(yōu)培養(yǎng)基為MS+0.20 mg/L IBA;以成體植株葉片和幼嫩無芽莖為外植體,愈傷組織誘導(dǎo)最優(yōu)的培養(yǎng)基為MS+2.0 mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA,不定芽分化最優(yōu)培養(yǎng)基為MS+0.05 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,生根最優(yōu)培養(yǎng)基為MS+0.2mg/L IBA;以無菌苗和成體植株帶芽莖和莖尖為外植體,芽分化最優(yōu)培養(yǎng)基為MS+0.05 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,生根最優(yōu)培養(yǎng)基為MS+0.2mg/L IBA。5.無菌苗和成體植株帶芽莖和莖尖外植體組織培養(yǎng)形態(tài)發(fā)生途徑為直接器官發(fā)生;無菌苗子葉,真葉,無芽莖組織培養(yǎng)形態(tài)發(fā)生途徑為胚狀體發(fā)生;成體植株幼嫩無芽莖組織培養(yǎng)形態(tài)發(fā)生途徑尚未明確。
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：Q943.1
【圖文】：

實驗主要技術(shù)路線

3.1 光照與 pH 對半日花組織培養(yǎng)的影響.1.1 不同光照條件下半日花組織培養(yǎng)效率.1.1.1 不同光照強(qiáng)度下半日花增殖，分化，生根效率在一定范圍內(nèi)，增加光照強(qiáng)度對愈傷組織增殖分化生根有促進(jìn)作用。不同光照強(qiáng)度下花愈傷組織質(zhì)量、不定芽平均高度和平均根長變化見圖 3.1，光照強(qiáng)度低于 24 μmol·m-2·，半日花外植體誘導(dǎo)率低，愈傷組織生長慢，分化率低，且苗木畸形。隨著光照強(qiáng)度增加日花愈傷組織質(zhì)量，分化苗高，平均根長均呈先升高后降低趨勢。

圖 3.2 光照強(qiáng)度對半日花愈傷組織褐化產(chǎn)生時間的影響Fig.3.2 Effect of illumination intensity on browning time of H.ordosicum callus不同字母代表各處理間差異顯著（P<0.05）Different letters represent significant differences between treatments (P<0.05)3.1.2 培養(yǎng)基不同 pH 對半日花組織培養(yǎng)影響培養(yǎng)基 pH 對半日花外植體增殖分化生根過程有影響。實驗初期對培養(yǎng) pH 初步計培養(yǎng)基 pH 在 5-7 之間愈傷組織質(zhì)量和分化苗高度見圖 3.3。培養(yǎng)基 pH 在 5-7 之間花愈傷組織質(zhì)量和分化苗高度隨著 pH 增大呈先升高后降低趨勢。不同 pH 值下愈傷組織質(zhì)量和增殖系數(shù)差異顯著（P<0.05）。半日花愈傷增長量高度均在培養(yǎng)基 pH 5.8-6.6 水平最高，且顯著高于其他水平。培養(yǎng)基 pH 5.4-5.8、6.2愈傷組織質(zhì)量和分化苗高度均顯著高于 5.0-5.4、6.6-7.0 水平，pH 6.2-6.6 和 5.4-5.8 著差異。愈傷組織質(zhì)量在 pH 6.6-7.0 顯著高于 5.0-5.4，分化苗高度在 pH 6.6-7.0 和

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本文編號：2783410