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馬鈴薯脫毒種薯再生體系的建立以及StBAG3基因功能的初步研究

發(fā)布時間:2020-07-10 00:12
【摘要】:BAG(Bcl-2 associated athanogene)蛋白是一類生物界廣泛存在的多功能蛋白家族,具有調(diào)節(jié)細胞程序化死亡、腫瘤發(fā)生、神經(jīng)元分化以及多種生理過程的功能。同時,BAG家族的蛋白還能夠調(diào)控植物的抗逆和抗病性。基于BAG蛋白具有調(diào)控植物抗病性的功能,本研究以馬鈴薯為材料,首先建立了基于脫毒種薯的馬鈴薯的再生體系,然后對馬鈴薯中B4G基因(StBAG3)在馬鈴薯抗晚疫病過程中的功能進行了初步的研究,具體的研究結(jié)果如下:1.確定了脫毒馬鈴薯誘導生薯的最佳條件為每個組培瓶中放置4株組培苗,添加的6-BA濃度為3mg/L;在上述的最佳條件下的每個組培瓶中夏波蒂和克新1號的生薯的總數(shù)量分別為8個和8.25個,生薯總重量分別為6.62g和6.27g;夏波蒂和克新1號平均種薯數(shù)量分別為2個和2.06個,平均種薯重量分別為1.56g和1.66g。2.建立了基于脫毒種薯的馬鈴薯的再生體系,其中夏波蒂與費烏瑞它的最佳不定芽分化培養(yǎng)基組合為 MS+1 mg/L IAA+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA3+2 mg/L ZT;而克新1號的最佳分化培養(yǎng)基組合為MS+1 mg/L IAA+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L GA3+2 mg/L ZT。3.通過比較脫毒種薯與大田薯薯塊的不定芽分化率,發(fā)現(xiàn)夏波蒂、費烏瑞它和克新1號的脫毒種薯不定芽的分化率分別為62.5%、84.12%和66.67%,而上述品種相應的大田薯薯塊不定芽的分化率分別為26.16%、24.1%和37.5%,表明脫毒種薯的不定芽分化率顯著高于大田薯塊。4.利用農(nóng)桿菌介導的瞬時表達體系研究了 StBAG3基因在馬鈴薯抗晚疫病過程中的功能,結(jié)果表明,接種晚疫菌72h后,瞬時表達StBAG3基因的馬鈴薯葉片部位的病斑的相對面積為3.90%,而對照葉片病斑相對面積為28.29%,初步表明StBAG3正向調(diào)控馬鈴薯對晚疫病的抗性水平。5.利用農(nóng)桿菌介導的瞬時表達體系研究了接種部位壞死細胞數(shù)量,結(jié)果表明瞬時表達StBAG3基因部位的壞死細胞的數(shù)量要明顯少于對照葉片的病斑。6.通過定性和定量的研究方法測定接種部位的H202積累水平,結(jié)果表明瞬時表達StBAG3基因48h后的H202的積累量明顯高于對照葉片,而相同部位ROS清除酶活性(CAT、POD和SOD)也明顯高于對照的結(jié)果也間接的證實了 H202參與了StBA4G3基因介導的馬鈴薯對晚疫病的抗性建立。
【學位授予單位】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:S532;Q943.2
【圖文】:

侵染循環(huán),孢子囊,塊莖,游動孢子


并且形成吸器從寄主細胞中吸取營養(yǎng)。當發(fā)病葉片形成霉層后會再次產(chǎn)生孢子囊。逡逑孢子囊可以進行再侵染,或者孢子囊存于種薯上在下一個生長季節(jié)繼續(xù)進行侵染[54]逡逑(圖1)。致病疫霉在馬鈴薯葉片上形成的孢子囊以及游動孢子也利用雨水的沖刷作逡逑用,從土壤縫隙中滲透到寄主的塊莖上,病原菌通過塊莖上的皮孔侵染整個馬鈴薯逡逑塊莖,從而顯著的降低馬鈴薯的品質(zhì)和產(chǎn)量[55]。逡逑游動孢子逡逑侵入莖葉逡逑孢子囊邐f邐及塊莖逡逑^邐游動孢子逡逑生出病苗邐\邐孢子囊5逡逑1邋\逡逑I邐感病塊莖逡逑播種病薯邐|逡逑I邐活動期邐/逡逑V邐休眠期邐7逡逑V邋y逡逑菌絲在帶病的種薯中休眠逡逑圖1致病疫霉菌的侵染循環(huán)[56]逡逑Fig.l邋Phytophthora邋infestans邋infection邋cycle[56]逡逑

株數(shù),組培苗,種薯,情況


_I0邐馬鈴薯脫毒種薯再生體系的建立以及兌R%gj基因功能的初步研究邐逡逑種薯數(shù)量(個/株)=每瓶種通量逡逑每瓶馬鈴薯株數(shù)逡逑平均種薯重量(g/個)=每瓶種薯總重量逡逑每瓶種薯數(shù)量逡逑2.2結(jié)果與分析逡逑2.邋2.1脫毒組培苗的不同株數(shù)對生薯數(shù)量的影響逡逑

種薯,組培苗,株數(shù)


n邐馬鈴薯脫毒種薯再生體系的建立以及兌似似基因功能的初步研究入4株組培苗時能夠獲得一定的種薯數(shù)量和相對滿意的種薯的重量,因此,后續(xù)試驗中便在每個培養(yǎng)瓶中放入4株組培苗用于獲得脫毒種薯。逡逑

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本文編號:2748183

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