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擬黑蟲草形態(tài)學(xué)、遺傳分化及區(qū)系真菌多樣性研究

發(fā)布時間:2020-07-04 17:45
【摘要】:山西獨(dú)特的地理位置孕育著豐富的蟲草資源,目前已知的蟲草只有山西蟲草和香棒蟲草。本研究首先對采自山西晉南地區(qū)的蟲草樣品進(jìn)行鑒定,然后對優(yōu)勢的擬黑蟲草開展了遺傳多樣性及其區(qū)系真菌多樣性的研究。通過提取DNA和擴(kuò)增典型核基因片段(ITS、rpb1、rpb2、SSU、LSU、TEF),發(fā)現(xiàn)晉南地區(qū)的蟲草主要分為三類,包括擬黑蟲草、山西蟲草和疑似蟲草新種。擬黑蟲草作為中國的新記錄種,是擬黑蟲草菌(Ophiocordyceps nigrella)寄生于金龜子幼蟲(又稱蠐螬)后形成的菌蟲復(fù)合體;谧钚碌姆诸愊到y(tǒng),擬黑蟲草屬于真核生物(Eukaryotes)、雙核亞界(Dikarya)、子囊菌門(Ascomycota)、糞殼菌綱(Sordariomycetes)、肉座菌目(Hypocreales)、線蟲草科(Ophiocordycipitaceae)。根據(jù)鑒定結(jié)果,做了三種蟲草的形態(tài)研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)蟲草1(Ophiocordyceps nigrella)寄主體表黃褐色,子座從寄主頭部發(fā)出,單生;柄褐色,子囊殼表生,倒梨形,成熟時孔口外漏,子囊長柱型,子囊孢子斷裂,單個細(xì)胞長26.9-30μm,寬2.93μm。蟲草2(疑似新種)寄主體表黃褐色。子座從寄主頭部發(fā)出,單生。柄褐色?稍胁炕液稚,柱狀。子囊殼埋生,狹長卵形;蟲草3(山西蟲草)寄主體表黃褐色。子座從寄主頭部發(fā)出,單生。柄褐色。可孕部灰褐色,柱狀。子囊殼埋生,卵形,成熟時孔口外漏。本實(shí)驗(yàn)初步研究了四個采集地?cái)M黑蟲草的遺傳多樣性,選擇13個擬黑蟲草擴(kuò)增MAT121、DNA lyase基因。結(jié)果顯示擬黑蟲草的ITS(528 bp)、rpb1(694bp)、MAT121(812 bp)基因片段堿基差異度較少,都是只有一個堿基的差異,而DNA lyase(1215 bp)基因序列變異較大,一共發(fā)現(xiàn)了十個位置的差異。可能由于這四個地方距離較近,所以擬黑蟲草還未產(chǎn)生遺傳分化。為了進(jìn)一步研究擬黑蟲草的微生物多樣性,在采集擬黑蟲草過程中還采集了5份距擬黑蟲草0 cm(分別命名為T1、T2、T3)或20 cm(T4和T5)的土壤,基于DNA高通量測序做了真菌多樣性分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在擬黑蟲草子實(shí)體和蟲體中的優(yōu)勢菌都為Ophiocordyceps nigrella,土壤樣品中的優(yōu)勢菌為子囊菌門(Ascomycota)、被孢霉屬(Mortierella)、Tetracladium、Oidiodendron、Ganoderma、Ophiocordyceps nigrella,T1土壤樣品中Nectriaceae豐富度也比較高,T2土壤樣品與其余四種土樣的差異在于Ciboria_-betulae的豐富度較高,Tetracladium、Mortierella豐度較低。在分析過程中發(fā)現(xiàn)土壤樣品中包含許多未分類真菌,且這些真菌含量很高,屬于優(yōu)勢菌,它們可能對擬黑蟲草的生長有促進(jìn)作用,這些真菌的研究可能有助于擬黑蟲草的人工培育。擬黑蟲草作為全國新記錄種,它的生物學(xué)研究和藥理學(xué)研究都進(jìn)行的較少,這對它的開發(fā)利用是不利的,也不能發(fā)揮它真正的價值,這是一種資源的極大浪費(fèi),所以擬黑蟲草的后續(xù)分析至關(guān)重要。
【學(xué)位授予單位】:山西大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:Q949.3
【圖文】:

路線圖,實(shí)驗(yàn)技術(shù),路線,蟲草


圖 1.2 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線Figure 1.2 Experimental technical route研究的目的、意義和主要內(nèi)容我國對蟲草的研究可以追溯到 2000 年前,《神農(nóng)本草經(jīng)》中對蟲草已經(jīng)有

蟲草,位置圖,山西省


擬黑蟲草的形態(tài)學(xué)、遺傳多樣性及區(qū)系真菌多樣性研究8圖2.1 蟲草采集位置圖Figure 2.1 Cordyceps position map圖2.2 樣品采集圖片F(xiàn)igure 2.2 Sample collection pictures表2.1 實(shí)驗(yàn)樣品Table 2.1 Experimental Samples編號 采集地 海拔(m) 經(jīng)度(o) 緯度(o)SX16-1F~SX16-5F;SX17-1F~SX17-3F山西省晉城沁水縣中村鎮(zhèn)下川村東龍王背— 112.02 35.44SX17-29F~SX17-30F;SX17-32FW~SX17-33FW;SX17-40F~SX17-41F;SX17-60FW~SX17-61FW山西省絳縣磨里鎮(zhèn) 1888-1920 111.88 35.51SX17-44F~SX17-47F山西省翼城縣西閆鎮(zhèn)元窯河村— 111.92 35.54SX17-73F~SX17-75F山西省垣曲縣歷山鎮(zhèn)舜王坪2140-2160 111.97 35.42SX17-81FW~SX17-83FW 山西省夏縣 — 111.22 35.12注:“—”表示未記錄。

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