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ARL2在哺乳動物感光細(xì)胞中的功能研究

發(fā)布時間:2020-05-31 08:29
【摘要】:眼睛作為視覺形成的基礎(chǔ),其內(nèi)部最為關(guān)鍵的結(jié)構(gòu)組織是視網(wǎng)膜。視網(wǎng)膜承擔(dān)著將光信號轉(zhuǎn)導(dǎo)為視覺神經(jīng)電信號的作用,而這一系列的光生化轉(zhuǎn)變都依托于視網(wǎng)膜感光細(xì)胞層的存在。感光細(xì)胞層包含視桿和視錐兩種感光細(xì)胞,分別主司暗視覺和明視覺,其外節(jié)段與內(nèi)節(jié)段間由連接纖毛相連。視桿細(xì)胞外節(jié)膜盤內(nèi)含視紫紅質(zhì),其合成于感光細(xì)胞內(nèi)節(jié)段,被運(yùn)輸?shù)酵夤?jié)段,其運(yùn)輸過程受多種蛋白因子所調(diào)節(jié),而ARL2(ADP ribosylation factor-like protein 2)蛋白可能是這些調(diào)節(jié)因子中的一員。ARL2蛋白做為RAS超家族下ARF亞家族中ARL家族的一員,由Arl2基因編碼,分子量約為20 KDa,能結(jié)合GTP且具有GTPase活性。已有學(xué)科研究報告中提示,ARL2參與到微管蛋白亞基的折疊,以及異二聚體蛋白的組裝與去組裝中,對微管的完整性也起到調(diào)節(jié)作用。ARL2在視網(wǎng)膜中定位感光細(xì)胞內(nèi)節(jié)段,但目前為止對其具體作用及功能還不甚明確。本文通過培養(yǎng)細(xì)胞的過表達(dá)實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)Arl2基因及其相關(guān)突變位點(diǎn)載體過表達(dá)會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染細(xì)胞微管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)崩壞,纖毛形成受阻。同時,我們構(gòu)建了Arl2基因視網(wǎng)膜特異性敲除的小鼠模型并對對該基因敲除小鼠表型進(jìn)行系統(tǒng)研究,結(jié)果表明,ARL2蛋白缺失引發(fā)微管蛋白α/β-tubulin異二聚體產(chǎn)生減少,解聚增加,使得微管形成發(fā)生障礙,感光細(xì)胞纖毛段發(fā)育受阻,形態(tài)結(jié)構(gòu)異常,直接影響其對光信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白到外節(jié)段的運(yùn)輸,從而使感光細(xì)胞功能喪失,最終導(dǎo)致感光細(xì)胞凋亡,視網(wǎng)膜變性發(fā)生。由此可見,ARL2蛋白通過維護(hù)微管蛋白合成穩(wěn)定和微管動力學(xué)動態(tài)平衡來實(shí)現(xiàn)對感光細(xì)胞微管網(wǎng)絡(luò)和纖毛段的形態(tài)結(jié)構(gòu)功能的維持,并直接或間接地影響到視網(wǎng)膜形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能。通過ARL2蛋白在視網(wǎng)膜中的研究為探索視網(wǎng)膜色素變性找到新的研究方向和思路。
【圖文】:

條紋,眼球結(jié)構(gòu)


傳輸系統(tǒng)是由眼球、視神經(jīng)和大腦內(nèi)視覺響應(yīng)區(qū)組成。眼球負(fù)責(zé)將外界環(huán)境光號轉(zhuǎn)導(dǎo)為電信號;視神經(jīng)介導(dǎo)將電信號快速傳遞入大腦;大腦內(nèi)視覺響應(yīng)區(qū)最將獲得的信號進(jìn)行處理整合,,并對下屬效應(yīng)器作出指揮。眼睛作為一個光學(xué)傳導(dǎo)系統(tǒng),其生理結(jié)構(gòu)極其精密復(fù)雜,從外到內(nèi)分別由鞏、角膜、虹膜、睫狀體、脈絡(luò)膜、視網(wǎng)膜、房水、晶狀體、玻璃體等組成,如 1-1 所示。鞏膜附著于眼球外壁,由強(qiáng)韌的纖維結(jié)締組織構(gòu)成,對眼球具有支持保護(hù)作用;脈絡(luò)膜位于視網(wǎng)膜和鞏膜之間,內(nèi)含豐富血管網(wǎng),對視網(wǎng)膜具有營作用;角膜不僅透明透光,還可保護(hù)眼睛免受創(chuàng)傷和感染;虹膜富含色素,其有斑點(diǎn)、條紋等,可作為生物識別技術(shù)靶向位點(diǎn),此外,虹膜具有收縮性且中開孔,對射入眼球內(nèi)部的光強(qiáng)度具有調(diào)節(jié)作用;晶狀體是特化細(xì)胞所組成的具高度組織特異性的透明膠質(zhì)纖維結(jié)構(gòu),其受睫狀體牽拉,可改變自身屈度,對來環(huán)境光光路具有調(diào)節(jié)作用;房水和玻璃體共同組建成眼球的液體屈光環(huán)境,眼內(nèi)壓的穩(wěn)定和眼球形態(tài)的支持都有積極作用。角膜、房水、虹膜、晶狀體、狀體、玻璃體作為一個完整的屈光結(jié)構(gòu)單元,對外界環(huán)境射入眼球的光進(jìn)行精調(diào)控折射,使外環(huán)境圖像反射出的光能準(zhǔn)確投射到視網(wǎng)膜上[1]。

生理結(jié)構(gòu),視網(wǎng)膜,視錐細(xì)胞,視桿細(xì)胞


圖 1-2 視網(wǎng)膜生理結(jié)構(gòu)圖 Edited by www.retinareference.com1.3 感光細(xì)胞結(jié)構(gòu)與原始視覺信號形成人類能擁有如此精妙的視覺,歸功于其擁有高度極化的視網(wǎng)膜感光細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞種屬劃分,感光細(xì)胞可分為:視桿細(xì)胞和視錐細(xì)胞。在數(shù)量方面,視桿細(xì)胞約占感光細(xì)胞總數(shù)的 95%。視桿細(xì)胞主要分布于視網(wǎng)膜周邊;而視錐細(xì)胞則主要分布于視網(wǎng)膜黃斑區(qū),且在視網(wǎng)膜中央凹處只分布有視錐細(xì)胞。視桿細(xì)胞與視錐細(xì)胞皆由外節(jié)段、內(nèi)節(jié)段、胞體和突觸末端四部分組成。視桿細(xì)胞外節(jié)段呈細(xì)桿狀,內(nèi)部層疊千個膜盤樣結(jié)構(gòu),并且被細(xì)胞質(zhì)膜包裹成囊狀[5]視桿細(xì)胞所含感光物質(zhì)為視紫紅質(zhì)(rhodopsin),視紫紅質(zhì)被包裹于膜盤中,參與視覺形成初期光化學(xué)級聯(lián)反應(yīng)[6]。視錐細(xì)胞外節(jié)段相較于視桿細(xì)胞外節(jié)段短小且呈圓錐狀,其層疊膜盤未被細(xì)胞質(zhì)膜包裹成囊狀,而是直接與感光細(xì)胞所處外環(huán)境空間自由聯(lián)通。視錐細(xì)胞所含色覺感光物質(zhì)有三種,分別為:藍(lán)敏色素(cyanolabe)、綠敏色素(chlorolabe)、紅敏色素(erythrolabe),感光物質(zhì)被包裹于膜
【學(xué)位授予單位】:電子科技大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:Q436

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本文編號:2689580

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