【摘要】：十字花科蔬菜是我國重要經(jīng)濟作物。隨著全球氣候變化和集約化生產(chǎn),病毒病已成為危害我國蔬菜生產(chǎn)的主要病害,其中蕪菁花葉病毒(TuMV)是侵染十字花科蔬菜的主要病毒之一,嚴重制約了我國十字花科蔬菜產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。實驗室前期已定位克隆到了真核生物翻譯起始因子eIF2Bβ基因是芥菜中抗TuMV的隱性抗病基因,本研究在此基礎上以感病材料縮頭種(STZ)為研究材料,探究了eIF2Bβ及基因?qū)囟群虯BA響應關(guān)系以及對病毒病發(fā)生的影響。同時,以K407為材料,通過CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù),研究了eIF2β基因調(diào)控植株生長的分子機制。本研究主要成果如下:1.環(huán)境對蕪菁花葉病毒病發(fā)生的影響:研究表明蕪菁花葉病毒病的發(fā)生受溫度影響,依賴于eIF2Bβ基因的表達量。在28℃下,植株出現(xiàn)葉片畸形、褪綠壞死的典型癥狀,且eIF2Bβ基因的相對表達量和TuMVV的積累量達到了最高。此外,發(fā)現(xiàn)外源ABA能誘導eIF2Bβ基因的相對表達,預示ABA對TuMV發(fā)生具有一定的調(diào)控作用。2.eIF2Bβ 基因敲除突變體構(gòu)建:利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)對甘藍型油菜中的eIF2Bβ基因進行了敲除,經(jīng)PCR鑒定和測序分析,成功獲得了 eIF2Bβ(GSBRNA2T00057478001)基因敲除植株。將野生型和突變體置于相同的生長環(huán)境下培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)突變體均比野生型生長地更快,且不經(jīng)過春化即可進入抽薹開花的階段,表明eIF2Bβ調(diào)控植株的開花和生長過程。3.eIF2β基因調(diào)控油菜生長發(fā)育的機制:通過RNA-seq鑒定到多個野生型和突變體在生長發(fā)育過程中差異表達的基因,這些基因主要富集在光合作用、碳水化合物代謝和氨基酸的生物合成等過程,為解析eIF2Bβ基因調(diào)控植物生長發(fā)育的分子機制提供了重要依據(jù)。
【圖文】：

圖１－１邋ＴｕＭＶ基因組結(jié)構(gòu)示意圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１－１邋Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ邋ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ＴｕＭＶ邋ｇｅｎｏｍｅ逡逑１．１．２病毒的侵染循環(huán)和病毒病的癥狀逡逑１．１．２．１侵染循環(huán)逡逑十字花科蔬菜病毒主要靠汁液接觸來傳播，除了通過祧蚜、甘藍蚜等昆蟲媒介取食逡逑汁液傳毒，還可以通過人、畜、農(nóng)業(yè)機械工具等接觸病株汁液后傳播到健康植株上從而逡逑染病。其中ＣＭＶ還可通過種子帶毒來傳播病害。逡逑高溫干燥的氣候有利于蚜蟲的繁殖從而易誘發(fā)十字花科蔬菜病毒病的大面積蔓延。逡逑另外，像黃瓜花葉病毒、蕪菁花葉病毒等這類寄主范圍很廣的病毒能在許多寄主植物上逡逑越冬，次年春季再侵染。在有些農(nóng)業(yè)措施條件較好的溫室，，病毒可以不越冬而持續(xù)侵染逡逑

召真故生物翻譯翅始過粗
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S432.41

【參考文獻】

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本文編號：2646708