【摘要】：在哺乳動(dòng)物早期肝臟和胰腺的形成過(guò)程中,兩者由同一內(nèi)胚層的前體細(xì)胞發(fā)育而來(lái),且在一定的條件刺激下可以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)分化。在肝臟損傷中有檢測(cè)到膽管周?chē)募?xì)胞表達(dá)lgr5,lgr5陽(yáng)性的細(xì)胞會(huì)大量增殖分化為肝細(xì)胞和膽管細(xì)胞來(lái)補(bǔ)充受損傷的肝臟細(xì)胞,起到修復(fù)損傷的作用,而在成體肝臟中未檢測(cè)出lgr5的表達(dá),胰腺亦如此。同時(shí)決定胰腺發(fā)育的pdxl基因和胰島素基因Insulin在成體的表達(dá)也局限于胰島細(xì)胞,其他胰腺細(xì)胞均未見(jiàn)有表達(dá)。lgr5、pdx1Insulin三種基因在成體肝臟和胰腺中的表達(dá)研究已經(jīng)有許多報(bào)道,但是關(guān)于這三種基因在肝臟和胰腺的世系表達(dá)特征還未見(jiàn)研究報(bào)道。因此本試驗(yàn)利用cre-loxp系統(tǒng)和轉(zhuǎn)基因小鼠,通過(guò)特異性啟動(dòng)子lgr5、pdx1和Insulin啟動(dòng)的cre重組酶體系,經(jīng)藥物誘導(dǎo)、冰凍切片及免疫染色探討lgr5、pdx1及Insulin在肝膽胰的世系特征。研究結(jié)果顯示,Insulin基因在成體小鼠胰腺的胰島細(xì)胞中有表達(dá),胰腺的腺泡細(xì)胞和胰腺導(dǎo)管細(xì)胞中未檢測(cè)到表達(dá),在肝臟中的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞、肝導(dǎo)管細(xì)胞和膽導(dǎo)管細(xì)胞也未檢測(cè)到表達(dá);pdx1基因在成體小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞、肝導(dǎo)管細(xì)胞和膽管細(xì)胞中都有表達(dá),在胰腺的腺泡細(xì)胞、胰島細(xì)胞和導(dǎo)管細(xì)胞也檢測(cè)到有表達(dá);lgr基因在成體小鼠肝臟的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞、肝導(dǎo)管細(xì)胞和膽導(dǎo)管細(xì)胞未檢測(cè)到表達(dá),在胰腺中的腺泡細(xì)胞、胰島細(xì)胞和導(dǎo)管細(xì)胞也未檢測(cè)到有表達(dá),不具有世系特征。上述研究結(jié)果闡明了lgr5、pdx1和Insulin基因在肝臟和胰腺發(fā)育中的世系表達(dá)特征,為肝臟和胰腺發(fā)育中相關(guān)功能基因的研究奠定了基礎(chǔ)。
【圖文】：

圖２－１邋ＰＣＲ結(jié)果逡逑

Ｆｉｇｕｒｅ邋２－３邋ｅｒｅ邋ｃｏｄｉｎｇ邋ａｒｅａ邋ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ邋ｒｅｓｕｌｔｓ逡逑２．３．２小鼠肝臟和胰腺實(shí)質(zhì)以及導(dǎo)管免疫染色結(jié)果逡逑２．３．２．１小鼠肝、胰腺實(shí)質(zhì)細(xì)胞免疫染色結(jié)果逡逑利用／ｒａｗ／／＞？－ｃｒｅ－ＯＴ７／ｗ？Ｇ小鼠鑒定肝膽胰世系特征，表達(dá)或表達(dá)過(guò)／ｍｗ／／／？基因的細(xì)逡逑胞呈現(xiàn)ＧＦＰ陽(yáng)性。小鼠胰腺胰島細(xì)胞免疫染色結(jié)果顯示，胰島細(xì)胞特異性胰島素基因逡逑（／ｍ７／／ｚ＿／７）表達(dá)于胰腺胰島細(xì)胞中，／ｍｗ／ｈ陽(yáng)性胰島細(xì)胞有ＧＴ７／＊表達(dá)，／ｔｗｗ／／＞？蛋白和逡逑ＧＦ／＾蛋白共定位于胰腺胰島細(xì)胞中，即胰腺胰島細(xì)胞表達(dá)／ｒａｗ／／＞？（圖２－４，１１－４）；肝實(shí)逡逑質(zhì)細(xì)胞免疫染色結(jié)果顯示，肝細(xì)胞特異性表達(dá)白蛋白基因（ａ／Ｚｍｗｂ，邋ＪＺ５）廣泛表達(dá)逡逑于肝細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，陽(yáng)性肝細(xì)胞未檢測(cè)到ＧＦ７５的表達(dá)，陽(yáng)性肝細(xì)胞和ＧＦＰ逡逑陽(yáng)性細(xì)胞不存在共染的情況，，即肝細(xì)胞中不表達(dá)／ｍｗ／ｈ邋（圖２－４，邋Ｌ１－４）；胰腺組織免疫逡逑染色結(jié)果顯示，腺泡細(xì)胞淀粉酶基因（Ａｗ＿ｙ／ｍｅ）特異性表達(dá)于腺泡細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，逡逑ｊｗｊ／ｏａ陽(yáng)性細(xì)胞不表達(dá)ＧＦＰ，ｄｗｙｏｓｅ陽(yáng)性腺泡細(xì)胞和ＧＦＰ陽(yáng)性細(xì)胞不存在共染的情逡逑況，即腺泡細(xì)胞中不表達(dá)／似ｗ／／？邋（圖２－４，Ａ１邋－４邋）。逡逑
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：Q344

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本文編號(hào)：2638541