【摘要】：主要組織相容性復(fù)合體(Major Histocompatibility Complex,MHC)作為選擇性分子標(biāo)記,可以體現(xiàn)物種在進(jìn)化過程中對環(huán)境的適應(yīng)。目前僅有大陸種群及島嶼種群33個(gè)紫貂(Martes zibellina)樣本MHC-DRB基因的初步研究,缺乏較為全面的紫貂亞種及石貂(Martes foina)、歐洲松貂(Martes martes)MHC基因的研究。我們以PCR結(jié)合克隆的方法檢測出8個(gè)亞種紫貂及歐洲松貂、石貂MHC-DRB等位基因并對其進(jìn)行多態(tài)性分析,結(jié)合已發(fā)表的鼬科其他動物MHC-DRB基因綜合分析適應(yīng)性遺傳變異。主要研究結(jié)果如下:(1)在104只紫貂樣本中得到35個(gè)(26個(gè)有效等位基因及9個(gè)缺失1bp的假基因序列)DRB 等位基因(241-242bp),分別命名為 Mazi-DRB*01～Mazi-DRB*35;在 17 只歐洲松貂樣本中得到14個(gè)(11個(gè)有效等位基因及3個(gè)缺失1bp的假基因序列)DRB等位基因(241-242bp),分別命名為Mama-DRB*01～Mama-DRB*14;在10只石貂樣本中得到6個(gè)(3個(gè)有效等位基因及3個(gè)缺失1bp的假基因序列)DRB等位基因(241-242bp),分別命名為 Mafo-DRB*01～Mafo-DRB*06。(2)4種獾屬動物中Meles meles的遺傳多樣性明顯高于其他3種獾屬動物;鼬屬動物中Mustela nivalis遺傳多樣性明顯高于其他3種鼬屬動物;海獺屬遺傳多樣性高于其他大部分貂屬、獾屬、鼬屬動物;貂熊屬動物遺傳多樣性低于其他貂屬、獾屬、鼬屬大部分動物;3種貂屬動物遺傳多樣性差異很小;8個(gè)亞種紫貂種群遺傳多樣性水平比較相近,日本島嶼種群紫貂比大陸種群遺傳多樣性高。(3)紫貂、歐洲松貂、石貂DRB基因抗原結(jié)合位點(diǎn)非同義突變率均大于同義突變率(dN/dS1),受到正向選擇,紫貂非抗原結(jié)合位點(diǎn)dN/dS1,歐洲松貂和石貂所有位點(diǎn)及非抗原結(jié)合位點(diǎn)的dN/dS1,進(jìn)化過程中正向選擇及凈化選擇共同維持3種貂屬動物MHC基因多態(tài)性。(4)3種貂屬動物之間、4種獾屬動物之間、4種鼬屬動物之間及鼬科動物之間DRB基因存在跨物種進(jìn)化現(xiàn)象。(5)以平衡選擇維持3種貂屬動物MHC-DRB基因多態(tài)性。
【圖文】：

逡逑檢測，判斷是否為單一片段且回收產(chǎn)物濃度能否達(dá)到后續(xù)克隆實(shí)驗(yàn)的要求，結(jié)果如圖３－逡逑３所示，，符合后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求。逡逑圖３－３邋ＰＣＲ產(chǎn)物回收電泳圖（ｌｋｂ邋ＤＮＡＭａｒｋｅｒ）逡逑Ｆｉｇ邋３－３邋ＰＣＲ邋ｒｅｃｙｃｌｉｎｇ邋ｐｒｏｄｕｃｔｓ邋ａｇａｒｏｓｅ邋ｇｅｌ邋ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ邋（ｌｋｂ邋ＤＮＡ邋Ｍａｒｋｅｒ）逡逑３．２＿３陽性克隆檢測逡逑對菌液利用ＰＣＲ法檢測陽性克隆，目的條帶不含雜帶且亮度很高，大小位于３００ｂｐ逡逑附近位置（圖３－４）。本次實(shí)驗(yàn)中，總計(jì)挑菌３５５４個(gè)，得到有效序列２４５９條。逡逑ｔ邋．邐Ｊｖ邋＜邐，邐二邋／．邋／ｆ邋｜邐煍逡逑：＞．；，ｖｊ：：＂；；？；；；：＇ｉ；邐＇Ｆ邐；ｌ，，．邋，３邋：逡逑圖邋３－４邋菌液邋ＰＣＲ邋電泳圖（ｌｋｂ邋ＤＮＡ邋Ｍａｒｋｅｒ）逡逑Ｆｉｇ邋３－４邋Ｂａｃｔｅｒｉａ邋ｓｏｌｕｔｉｏｎ邋ＰＣＲ邋ｐｒｏｄｕｃｔｓ邋ａｇａｒｏｓｅ邋ｇｅｌ邋ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ邋（ｌｋｂ邋ＤＮＡ邋Ｍａｒｋｅｒ）逡逑３．３貂屬動物ＭＨＣ－ＤＲＢ基因多態(tài)性分析逡逑３．３．１等位基因確定逡逑本研宄在１０４只紫貂樣本中共檢測到３５個(gè)ＭＨＣ－ＤＲＢ等位基因，長度為２４１－２４２逡逑ｂｐ邋

圖３－９由鼬科動物ＤＲＢ等位基因繪制的中接網(wǎng)絡(luò)圖（紅色為未檢測到的過渡等位基因）逡逑Ｆｉｇ邋３－９邋ｍｅｄｉａｎ－ｊｏｉｎｉｎｇ邋ｎｅｔｗｏｒｋ邋ｂａｓｅｄ邋ｏｎ邋ＤＲＢ邋ａｌｌｅｌｅｓ邋ｉｎ邋ｔｈｒｅｅ邋ｓｐｅｃｉｅｓ邋ｏｆ邋Ｍｕｓｔｅｌｉｄａｅ邋（Ｒｅｄ邋ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ邋ａｎ逡逑ｕｎｄｅｔｅｃｔｅｄ邋ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ邋ａｌｌｅｌｅ）逡逑
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：Q953

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 和占龍;禹文海;楊鳳梅;趙遠(yuǎn);魯帥堯;王俊斌;陳麗雄;乞素冬;李艷艷;劉龍丁;;中國云南地區(qū)恒河猴群MHC-DRB部分等位基因的調(diào)查[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2014年05期

2 虞健;梁文明;朱飛虎;徐思;吳海龍;;黃麂Mhc-DRB基因多態(tài)性及其維持機(jī)制[J];獸類學(xué)報(bào);2010年01期

3 侯東敏;王政昆;楊濤;朱萬龍;;基于MHC-DRB部分序列對不同地區(qū)中緬樹

本文編號：2631232