發(fā)布時間：2024-12-01 05:50

　　抗生素耐藥性問題目前已經(jīng)成為困擾全人類的世界性難題,而食品中抗生素殘留不僅會加劇耐藥性問題,而且會直接對人體健康造成極大危害。所以對食品中抗生素殘留的快速、便捷、廉價和靈敏檢測對抗生素耐藥性問題的解決具有重要意義。適配體是一類具有特異性親和能力的DNA或RNA短核酸鏈,已廣泛應(yīng)用于食品安全、環(huán)境監(jiān)測、臨床診斷和治療等領(lǐng)域。相比較于傳統(tǒng)蛋白質(zhì)抗體,適配體作為特異性識別元件,具有靶標(biāo)范圍廣、易化學(xué)合成、化學(xué)穩(wěn)定性好、易修飾等特點,以其為基礎(chǔ)的生物傳感器已用于檢測細菌、蛋白質(zhì)、病毒、藥物、毒素和食品添加劑等。本研究為實現(xiàn)食品中氯霉素和卡那霉素的共檢測提供了一種新的思路。首先,搭建由兩條適配體核酸鏈和一條輔助核酸鏈組成的適配體檢測體系,當(dāng)氯霉素或卡那霉素存在時,由于適配體與靶物抗生素之間的特異性親和作用,對應(yīng)適配體會被競爭洗脫下來。其次,借助實時熒光定量PCR,根據(jù)實驗組與對照組達到熒光閾值循環(huán)數(shù)即Ct值的差異,對適配體核酸鏈進行定量分析,從而實現(xiàn)對抗生素的定量檢測。本研究中建立的抗生素共檢測器可以實現(xiàn)氯霉素的檢測限(LOD)為6.13 ng/mL以及卡那霉素的LOD為19.17 ng/mL。此...

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 適配體簡介
        1.1.1 適配體篩選方法
        1.1.2 適配體篩選存在的問題及發(fā)展
    1.2 抗生素的檢測方法
        1.2.1 抗生素檢測的必要性
        1.2.2 常規(guī)方法
        1.2.3 生物檢測器檢測抗生素
    1.3 適配體應(yīng)用簡介
        1.3.1 適配體在醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)研究領(lǐng)域的應(yīng)用
            1.3.1.1 適配體在醫(yī)學(xué)診斷、藥物遞送等方面的應(yīng)用
            1.3.1.2 適配體在藥物治療方面的應(yīng)用
            1.3.1.3 適配體在基礎(chǔ)研究領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.3.2 核酸適配體在生物檢測器領(lǐng)域的應(yīng)用
            1.3.2.1 適配體生物檢測器
            1.3.2.2 檢測抗生素的適配體檢測器
第二章 基于適配體的抗生素單檢測體系的建立和優(yōu)化
    2.1 引言
    2.2 實驗儀器及試劑
    2.3 實驗方法
        2.3.1 氯霉素單檢測體系的檢測限測定
        2.3.2 卡那霉素單檢測體系的檢測限測定
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 氯霉素單檢測體系的檢測限
        2.4.2 卡那霉素單檢測體系的檢測限
    2.5 小結(jié)
第三章 靶向抗生素的適配體雙檢測體系的建立和優(yōu)化
    3.1 引言
    3.2 實驗儀器及試劑
    3.3 實驗方法
        3.3.1 雙檢測器的建立基礎(chǔ)及可行性驗證實驗
        3.3.2 磁性納米顆粒性能測定
        3.3.3 體系條件優(yōu)化
        3.3.4 檢測器線性范圍測定
        3.3.5 檢測器特異性
        3.3.6 檢測限測定
        3.3.7 檢測器魯棒性測定
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 實驗理論基礎(chǔ)及驗證結(jié)果
        3.4.2 磁性納米顆粒與輔助鏈的結(jié)合效率
        3.4.3 體系條件優(yōu)化
        3.4.4 檢測器線性范圍測定
        3.4.5 檢測體系的特異性檢測
        3.4.6 檢測限的測定
        3.4.7 檢測體系的魯棒性測定
    3.5 小結(jié)
第四章 單檢測與雙檢測體系的比較
    4.1 引言
    4.2 實驗儀器及試劑
    4.3 實驗方法
    4.4 實驗結(jié)果
    4.5 小結(jié)
第五章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果及發(fā)表文章
作者和導(dǎo)師簡介
碩士研究生學(xué)位論文答辯委員會決議書



本文編號：4013635