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產(chǎn)丁醇脫氫酶微生物的篩選及其酶學(xué)性質(zhì)的研究

發(fā)布時(shí)間:2024-04-01 23:49
  高級(jí)醇作為酒精飲料中醇甜和助香劑的主要物質(zhì),當(dāng)其含量及比例協(xié)調(diào)時(shí),氣味芳香,而當(dāng)含量過(guò)高時(shí),不僅會(huì)導(dǎo)致辛辣苦澀,還會(huì)造成飲用后頭痛等健康風(fēng)險(xiǎn)。目前,有關(guān)酒精飲料中高級(jí)醇含量調(diào)控研究及實(shí)踐主要集中在生產(chǎn)過(guò)程中,在后處理過(guò)程的研究少見(jiàn)報(bào)道。本研究以高級(jí)醇中的常見(jiàn)的丁醇為研究對(duì)象,通過(guò)分離純化得到一株產(chǎn)丁醇脫氫酶的微生物,并對(duì)該微生物的生長(zhǎng)特性、產(chǎn)生的醇脫氫酶的性質(zhì)及初步應(yīng)用開(kāi)展了研究結(jié)果如下:(1)從白酒酒曲及酒醅中共分離得到200株可培養(yǎng)微生物,分別采用酶標(biāo)儀法和頂空氣相色譜法進(jìn)行初篩和復(fù)篩,獲得一株產(chǎn)耐乙醇-丁醇脫氫酶微生物DQ-54。經(jīng)分子生物學(xué)鑒定DQ-54為生癌腸桿菌(Enterobacter cancerogenus)。進(jìn)一步研究DQ-54生長(zhǎng)規(guī)律發(fā)現(xiàn),當(dāng)接種量為2%、培養(yǎng)時(shí)間為12h、轉(zhuǎn)速為130 r/min、溫度為25℃、pH為7時(shí)DQ-54具最佳的生長(zhǎng),其對(duì)數(shù)期在培養(yǎng)的2~8h。經(jīng)乙醇耐受實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該菌株能夠耐受6%乙醇(2)進(jìn)一步研究DQ-54所產(chǎn)丁醇脫氫酶(Ec-54ADH)的酶學(xué)性質(zhì)后發(fā)現(xiàn),Ec-54ADH能夠在最高含有5%乙醇溶液中轉(zhuǎn)化正丁醇,且隨著乙醇濃度的增加(...

【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1產(chǎn)正丁醇脫氫酶微生物的初篩??Fig.?1?Preliminary?screening?of?n-butanol?dehydrogenase?producing?microorganism??

圖1產(chǎn)正丁醇脫氫酶微生物的初篩??Fig.?1?Preliminary?screening?of?n-butanol?dehydrogenase?producing?microorganism??

\6?產(chǎn)丁醇脫氫酶微生物的篩選及其酶學(xué)性質(zhì)的研究???3?結(jié)果與討論??3.1產(chǎn)耐乙醇-丁醇脫氫酶微生物的篩癬鑒定及生長(zhǎng)特性研究??3.1.1?產(chǎn)耐乙醇-丁醇脫氫酶微生物的初篩??1.產(chǎn)丁醇脫氫酶微生物的初篩??從酒曲及酒醅中共分離出200株微生物,通過(guò)粗酶提取和酶活檢測(cè)后,??....


圖2?產(chǎn)正丁醇脫氫酶微生物的復(fù)篩??Fig.2?Screening?of?n-butanol?dehydrogenase?producing?microorganism??

圖2?產(chǎn)正丁醇脫氫酶微生物的復(fù)篩??Fig.2?Screening?of?n-butanol?dehydrogenase?producing?microorganism??

17_??述結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證。結(jié)果顯示,菌株DQ-54的粗酶液能夠在乙醇存在的條??件下(乙醇含量為1%)催化體系中的正丁醇(濃度為0.3%)。另外,從??實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,該酶能夠顯著的降低乙醇和正丁醇的含量(P<〇.05),并??將其轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的乙醛和丁醛(如圖2a所示)。菌株PP....


圖3?菌株DQ-54的系統(tǒng)發(fā)育樹??Fig.3?Phylogenetic?tree?of?DQ-54??

圖3?菌株DQ-54的系統(tǒng)發(fā)育樹??Fig.3?Phylogenetic?tree?of?DQ-54??

_18?產(chǎn)丁醇脫氫酶微生物的篩選及其酶學(xué)性質(zhì)的研究???是必須基因,在不同菌株間可能存在較大的差異。??p?Enterobacter?sp.?2011SOCNI48?KF582906??Enterobactei?sp.?TSB7JX291546??(\—?Enterobacter....


圖4?菌株DQ-54的生長(zhǎng)曲線??

圖4?菌株DQ-54的生長(zhǎng)曲線??

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本文編號(hào):3945492

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