外界環(huán)境中的各種輻射、空氣污染、重金屬超標以及有機藥劑等都會使機體產(chǎn)生過量的自由基導(dǎo)致生物大分子的氧化損傷,這種氧化損傷的積累最終導(dǎo)致機體生理功能的衰退。因此在日常生活中合理攝取外源性抗氧化劑十分必要。燕麥是一種藥食兼用作物,在我國產(chǎn)量高,價格相對低廉,容易獲得。燕麥多肽具有抗氧化、延緩衰老的作用,但燕麥多肽在體內(nèi)對氧化損傷的防護作用及其機制還不清楚。本研究采用酶解法,以還原力和多肽得率為指標優(yōu)化制備燕麥多肽的工藝條件。在此基礎(chǔ)上,建立D-半乳糖氧化損傷大鼠模型,研究燕麥多肽的體內(nèi)抗氧化效果,并運用RNA-Seq技術(shù)探究其抗氧化的分子機制。主要研究結(jié)果如下:(1)根據(jù)單因素和響應(yīng)面優(yōu)化試驗,確定制備燕麥多肽的最佳工藝條件為:堿性蛋白酶Alcalase 2.4L FG用量為1.68 mL/L,底物濃度為10%,pH為9.84,溫度55℃,酶解時間為94 min。在此條件下制備的燕麥多肽還原力達到1.10,多肽得率為17.02%。(2)通過建立D-半乳糖氧化損傷大鼠模型,研究燕麥多肽的體內(nèi)抗氧化功能。結(jié)果顯示:與對照組(NG)相比,模型組(MG)的丙二醛(MDA)含量、羰基含量、谷胱甘肽(...

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮寫詞對照表
第一章 緒論
    1.1 研究背景及意義
        1.1.1 研究背景
        1.1.2 研究目的和意義
    1.2 氧化損傷與防護的研究進展
        1.2.1 氧化損傷的機制
            1.2.1.1 DNA的損傷
            1.2.1.2 蛋白質(zhì)的損傷
            1.2.1.3 脂質(zhì)的損傷
        1.2.2 氧化損傷防護的研究進展
            1.2.2.1 抗氧化酶研究進展
            1.2.2.2 抗氧化物研究進展
        1.2.3 氧化損傷的動物模型
    1.3 多肽的研究進展
        1.3.1 多肽的來源
        1.3.2 常見多肽制備方法及特點
        1.3.3 多肽的研究現(xiàn)狀
            1.3.3.1 多肽的功能
            1.3.3.2 多肽的應(yīng)用
        1.3.4 抗氧化肽的研究進展
            1.3.4.1 抗氧化肽的制備及來源
            1.3.4.2 燕麥抗氧化肽
            1.3.4.3 抗氧化肽的活性評價
    1.4 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)
        1.4.1 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)概況
        1.4.2 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)的應(yīng)用
第二章 燕麥多肽的制備及其工藝優(yōu)化
    2.1 前言
    2.2 材料與設(shè)備
        2.2.1 試驗材料
        2.2.2 試驗設(shè)備
    2.3 試驗方法
        2.3.1 燕麥蛋白的提取
        2.3.2 堿性蛋白酶水解燕麥蛋白工藝的優(yōu)化
            2.3.2.1 堿性蛋白酶水解燕麥蛋白單因素優(yōu)化試驗
            2.3.2.2 堿性蛋白酶水解燕麥蛋白的響應(yīng)面工藝優(yōu)化
        2.3.3 還原力的測定方法
        2.3.4 多肽得率的測定方法
    2.4 結(jié)果分析與討論
        2.4.1 燕麥蛋白的常規(guī)成分測定
        2.4.2 燕麥多肽制備的單因素結(jié)果分析
            2.4.2.1 加酶量對酶解效果的影響
            2.4.2.2 溫度對酶解效果的影響
            2.4.2.3 底物濃度對酶解效果的影響
            2.4.2.4 pH對酶解效果的影響
            2.4.2.5 酶解時間對酶解效果的影響
        2.4.3 響應(yīng)面試驗結(jié)果及方差分析
            2.4.3.1 響應(yīng)面法優(yōu)化
            2.4.3.2 響應(yīng)面分析與最佳工藝條件的確定
            2.4.3.3 最優(yōu)條件驗證
    2.5 本章小結(jié)
第三章 燕麥多肽的抗氧化功能研究
    3.1 前言
    3.2 材料與設(shè)備
        3.2.1 試驗材料
        3.2.2 試驗設(shè)備
    3.3 試驗方法
        3.3.1 燕麥多肽的制備
        3.3.2 試驗動物及分組
        3.3.3 曠場實驗
        3.3.4 血清、臟器的采集
        3.3.5 血清、臟器樣品的預(yù)處理
        3.3.6 指標測定
            3.3.6.1 肝臟組織勻漿中蛋白質(zhì)含量測定
            3.3.6.2 抗氧化指標的測定
            3.3.6.3 組織病理學(xué)觀察
        3.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
    3.4 結(jié)果分析與討論
        3.4.1 體重變化分析
        3.4.2 MDA含量變化分析
        3.4.3 羰基含量變化分析
        3.4.4 GSH含量變化分析
        3.4.5 抗氧化酶活性分析
            3.4.5.1 血清抗氧化酶活性分析
            3.4.5.2 肝臟抗氧化酶活性分析
        3.4.6 組織病理學(xué)結(jié)果分析
        3.4.7 曠場實驗
    3.5 本章小結(jié)
第四章 燕麥多肽抗氧化效果的轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析
    4.1 前言
    4.2 材料與設(shè)備
        4.2.1 試驗材料
        4.2.2 試驗設(shè)備
    4.3 試驗方法
        4.3.1 總RNA提取
        4.3.2 轉(zhuǎn)錄組文庫制備
        4.3.3 差異表達基因的篩選
        4.3.4 差異基因表達模式聚類分析
        4.3.5 表達譜數(shù)據(jù)的定量PCR驗證
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 總RNA質(zhì)量的檢測結(jié)果
        4.4.2 過濾后的Reads質(zhì)量統(tǒng)計
        4.4.3 測序飽和度分析
        4.4.4 差異表達基因的篩選
        4.4.5 GO功能富集分析
        4.4.6 Pathway顯著性富集分析
        4.4.7 差異基因的功能分析
        4.4.8 表達譜數(shù)據(jù)的定量PCR驗證
    4.5 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間科研成果



本文編號：3767341