部分人群過量食用荔枝、辣椒和食品添加劑可以引起系統(tǒng)低度炎性“上火”,但機制尚不明確,且高效控制方法缺乏�，F(xiàn)有合成抗炎藥物具有明顯不良反應(yīng),而貽貝作為天然安全的海洋源抗炎活性物質(zhì),應(yīng)用于系統(tǒng)炎癥的控制潛力巨大,但其抗炎效果及其控制機制尚待探明。本研究通過構(gòu)建腸道菌群人源化小鼠模型,篩選出食物致炎人源化菌群小鼠模型并探討其機制;并以貽貝提取物對致炎模型小鼠進(jìn)行干預(yù)。通過生物化學(xué)、組織化學(xué)及生物信息學(xué)等手段測定小鼠血漿中LPS、炎性因子水平、腸道菌群譜和腸壁通透性水平,探究“上火”食物致炎及貽貝提取物抑炎作用及其機制。結(jié)果如下:1、構(gòu)建腸道菌群人源化小鼠(HFA)模型可一定程度模擬志愿者腸道菌群通過給小鼠灌胃志愿者糞便菌懸液,其腸道菌群在門水平上各組分豐度比例接近于志愿者;在屬水平上兩組在UPGMA聚類分析可聚為一類;在種水平上志愿者特有的21種菌可以在模型小鼠腸道內(nèi)定植成功,說明腸道菌群人源化小鼠在一定程度上模擬了志愿者腸道菌群,模型構(gòu)建成功。2、高劑量荔枝誘發(fā)菌群紊亂改變腸道屏障完整性導(dǎo)致人源化小鼠系統(tǒng)低度炎癥辣椒和雙乙酸鈉誘發(fā)小鼠機體產(chǎn)生低度系統(tǒng)炎癥反應(yīng)的程度都不如高劑量荔枝誘發(fā)的炎癥...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 系統(tǒng)低度炎癥概述
        1.1.1 系統(tǒng)低度炎癥的定義
        1.1.2 食物引起的系統(tǒng)低度炎癥研究進(jìn)展
        1.1.3 系統(tǒng)低度炎癥的干預(yù)手段研究進(jìn)展
    1.2 腸道菌群概述
        1.2.1 腸道菌群的功能
        1.2.2 腸道菌群與系統(tǒng)低度炎癥的關(guān)系
        1.2.3 腸道菌群的檢測方法
        1.2.4 研究腸道菌群的動物模型
    1.3 貽貝提取物概述
        1.3.1 貽貝提取物的成分
        1.3.2 貽貝提取物的抗炎功能
    1.4 立題背景及意義
    1.5 研究內(nèi)容及技術(shù)路線
        1.5.1 研究內(nèi)容
        1.5.2 技術(shù)路線
2 腸道菌群人源化小鼠模型的建立
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 志愿者選擇
        2.1.2 試劑
        2.1.3 糞便菌懸液
        2.1.4 儀器與設(shè)備
        2.1.5 實驗動物
    2.2 實驗方法
        2.2.1 偽無菌小鼠模型的構(gòu)建
        2.2.2 腸道菌群人源化小鼠模型的建立
        2.2.3 糞便菌群總DNA的提取及測定
        2.2.4 小鼠糞便DNA的16S rDNA擴增子焦磷酸測序
            2.2.4.1 DNA樣品的16S rDNA擴增
            2.2.4.2 序列處理
        2.2.5 物種分類及豐富度分析
        2.2.6 樣本復(fù)雜度分析和多樣品比較分析
        2.2.7 不同樣本的物種組成聚類分析
        2.2.8 腸道菌群人源化小鼠模型評價
        2.2.9 統(tǒng)計學(xué)分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 腸道菌群人源化對小鼠腸道菌群多樣性的影響
        2.3.2 人源化菌群小鼠模型與志愿者腸道菌群在門水平上的相似性
        2.3.3 人源化菌群小鼠模型與志愿者腸道菌群菌屬水平上相似性分析
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
3 食物誘導(dǎo)的小鼠系統(tǒng)低度炎癥模型及其致炎機制研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 原料
        3.1.2 試劑
        3.1.3 儀器與設(shè)備
        3.1.4 實驗動物
    3.2 實驗方法
        3.2.1 食物誘導(dǎo)的小鼠系統(tǒng)低度炎癥模型的建立
        3.2.2 小鼠血清中炎癥水平的測定
        3.2.3 小鼠血清中炎性因子含量的ELISA法檢測
        3.2.4 小鼠腸道屏障結(jié)構(gòu)的觀測(HE染色切片)
        3.2.5 腸道菌群測序
        3.2.6 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 荔枝、辣椒素和雙乙酸鈉誘導(dǎo)小鼠系統(tǒng)低度炎癥效果比較
        3.3.2 荔枝提取物灌胃對小鼠血液中幾種炎性因子含量的影響
        3.3.3 荔枝提取物灌胃對小鼠腸道菌群多樣性的影響
        3.3.4 荔枝灌胃對小鼠腸道菌群菌門屬水平的影響
        3.3.5 荔枝灌胃對小鼠腸道菌群功能預(yù)測分析的影響
        3.3.6 荔枝灌胃對小鼠腸道通透性的影響
        3.3.7 荔枝提取物對小鼠血液中致炎因子LPS含量的影響
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
4.貽貝提取物對荔枝誘導(dǎo)的系統(tǒng)低度炎癥的干預(yù)作用
    4.1 材料與方法
        4.1.1 原料
        4.1.2 試劑
        4.1.3 儀器與設(shè)備
        4.1.4 實驗動物
    4.2 實驗方法
        4.2.1 小鼠血清中致炎因子LPS水平的測定
        4.2.2 ELISA法檢測小鼠血清中炎性因子含量
        4.2.3 小鼠腸道屏障結(jié)構(gòu)的觀測(HE染色切片)
        4.2.4 腸道菌群測序
        4.2.5 統(tǒng)計學(xué)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 貽貝提取物灌胃對小鼠血液中炎性因子含量的影響
        4.3.2 貽貝灌胃對小鼠腸道菌群多樣性的影響
        4.3.3 貽貝灌胃對小鼠腸道菌群菌門屬水平的影響
        4.3.4 貽貝灌胃對小鼠腸道菌群功能預(yù)測分析的影響
        4.3.5 荔枝灌胃對小鼠腸道通透性的影響
        4.3.6 貽貝提取物對小鼠血液中炎癥水平的影響
        4.3.7 貽貝灌胃對小鼠腸道中革蘭氏陰性菌數(shù)量的影響
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新及意義
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
導(dǎo)師簡介



本文編號：3738106