發(fā)布時間：2022-09-29 14:48

　　乳腺癌是世界各地女性中最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率逐年增高。流行病學研究表明:日常飲食中多攝入蔬菜和水果可有效預防心血管疾病、高血糖及癌癥等慢性疾病的發(fā)生,飲食調(diào)控以其安全、有效、副作用小等特點,成為近期研究的熱點。沙棘（Hippopha?rhamnoides L.）是胡頹子科沙棘屬的灌木或小喬木,其果實作為藥食同源資源收載于歷版《藥典》中,為我國蒙醫(yī)、藏醫(yī)習用藥材。本文系統(tǒng)分析了沙棘漿果中酚類植物化學物的抗氧化、抗增殖活性,應用模擬消化和Caco-2吸收模型評價酚類物質(zhì)的體外吸收特性和生物利用度,借助癌細胞模型和腫瘤移植模型,探究酚類活性成分體內(nèi)外協(xié)同抑制乳腺癌細胞增殖的分子機制,以期為乳腺癌的預防提供理論基礎和新的思路,本研究對功能性食品開發(fā)和抗癌活性藥物的研制具有重要意義,具體結果如下:（1）不同亞種沙棘酚類物質(zhì)的測定:Sinensis、Yunnanensis、Mongolica和Turkestanica等4個亞種中的游離酚含量范圍為:27.23±1.89~38.44±1.35 mg GAE/g DW,游離態(tài)是沙棘多酚的主要存在形式,Sinensis中的含量顯著高于其他三個亞種... 

【文章頁數(shù)】：169 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 沙棘資源及其研究現(xiàn)況
    1.3 沙棘酚類物質(zhì)的生物活性
        1.3.1 沙棘酚類化合物的組成
        1.3.2 沙棘酚類物質(zhì)的生物活性
    1.4 沙棘酚類物質(zhì)生物利用率
        1.4.1 胃腸道屏障
        1.4.2 生物利用率評價模型
        1.4.3 生物利用率的促進方式
    1.5 乳腺癌的分型及實驗模型
        1.5.1 乳腺癌的分型
        1.5.2 實驗模型
    1.6 酚類抑制乳腺癌的相關機制
        1.6.1 酚類物質(zhì)輔助化學藥物或其他活性成分的協(xié)同抑癌作用
        1.6.2 乳腺癌相關信號轉(zhuǎn)導途徑
    1.7 本課題的研究意義和研究內(nèi)容
        1.7.1 研究意義
        1.7.2 研究內(nèi)容
第二章 不同亞種沙棘果實中酚類物質(zhì)組成、抗氧化及抗增殖活性的比較
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 儀器與設備
    2.3 試驗方法
        2.3.1 沙棘游離態(tài)植物化學物的提取
        2.3.2 沙棘結合態(tài)植物化學物的提取
        2.3.3 提取物中總酚含量的測定
        2.3.4 提取物中總黃酮含量的測定
        2.3.5 游離態(tài)植物化學物的組成分析
        2.3.6 沙棘植物化學物氧自由基吸收能力(ORAC)的測定
        2.3.7 沙棘植物化學物過氧自由基清除能力(PSC)的測定
        2.3.8 細胞的培養(yǎng)
        2.3.9 沙棘植物化學物細胞抗氧化活力(CAA)的測定
        2.3.10 沙棘植物化學物的抗增殖活性測定
        2.3.11 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析
    2.4 結果與討論
        2.4.1 不同亞種沙棘植物化學物中總酚和總黃酮含量
        2.4.2 沙棘植物化學物中主要活性成分
        2.4.3 沙棘植物化學物的抗氧化能力
        2.4.4 沙棘植物化學物的抗增殖活性
    2.5 本章小結
第三章 沙棘酚類物質(zhì)體外吸收特性和生物利用度促進方法的研究
    3.1 引言
    3.2 實驗材料與設備
        3.2.1 原材料
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要設備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 沙棘多酚的化學提取法
        3.3.2 沙棘果實體外模擬消化
        3.3.3 總酚含量的測定
        3.3.4 消化液中酚類成分的檢測
        3.3.5 消化液生物活性
        3.3.6 沙棘多酚體外吸收效率
        3.3.7 沙棘多酚生物可利用度及其SMEDDS制備
        3.3.8 數(shù)據(jù)處理和分析
    3.4 結果與討論
        3.4.1 沙棘消化后多酚含量及種類的變化
        3.4.2 沙棘消化過程中生物活性的變化
        3.4.3 沙棘酚類物質(zhì)體外吸收效率及其吸收機制
        3.4.4 TFH-SMEDDS納米體系的構建及其生物利用度
    3.5 本章小結
第四章 沙棘黃酮醇類聯(lián)合抑制肝癌及乳腺癌細胞增殖的作用及其相關機制
    4.1 引言
    4.2 實驗材料與設備
        4.2.1 實驗試劑
        4.2.2 實驗設備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 單體化合物IS、QE及KA的抗增殖活性及細胞毒性
        4.3.2 單體化合物聯(lián)合作用于癌細胞的交互作用及參數(shù)計算
        4.3.3 流式細胞儀檢測單體及協(xié)同作用時癌細胞凋亡率及細胞周期
        4.3.4 蛋白質(zhì)印跡法(WESTERN BLOT)分析
        4.3.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析
    4.4 結果與討論
        4.4.1 單體對乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231及肝癌細胞HEPG2活性的抑制作用
        4.4.2 IS、QE及KA聯(lián)合抑制癌細胞增殖的效果分析
        4.4.3 CI值分析
        4.4.4 交互作用的DRI值
        4.4.5 IS聯(lián)合QE對肝癌細胞HEPG2凋亡率和細胞周期的影響
        4.4.6 IS和KA對MDA-MB-231細胞周期相關蛋白表達的影響
        4.4.7 IS和KA通過線粒體調(diào)節(jié)內(nèi)在途徑促進MDA-MB-231細胞的凋亡..
        4.4.8 IS和KA通過調(diào)控PI3K/AKT及P38MAPK通路抑制MDA-MB-231細胞的增殖
    4.5 本章小結
第五章 沙棘黃酮醇對乳腺癌細胞MDA-MB-231裸鼠移植瘤的抑制作用及其機理研究
    5.1 引言
    5.2 實驗材料與設備
        5.2.1 實驗試劑
        5.2.2 實驗設備
    5.3 實驗方法
        5.3.1 MDA-MB-231裸鼠移植瘤模型的構建
        5.3.2 實驗動物分組給藥方案
        5.3.3 IS、KA、IS+KA及IS-SMEDDS對裸鼠乳腺癌移植瘤的抑制作用.
        5.3.4 免疫組化(IHC)法檢測腫瘤組織中腫瘤相關蛋白的表達
        5.3.5 RT-PCR檢測腫瘤組織中腫瘤相關基因的MRNA表達水平
        5.3.6 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析
    5.4 結果與討論
        5.4.1 IS、KA、IS+KA和IS-SMEDDS對裸鼠的急性毒性
        5.4.2 IS、KA、IS+KA和IS-SMEDDS對荷瘤裸鼠體重和器官狀態(tài)的影響
        5.4.3 IS、KA、IS+KA和IS-SMEDDS對移植瘤裸鼠腫瘤生長體積的影響
        5.4.4 IS、KA、IS+KA和IS-SMEDDS對移植瘤裸鼠實體瘤重的影響
        5.4.5 免疫組化檢測腫瘤組織中PCNA蛋白的表達水平
        5.4.6 免疫組化檢測腫瘤組織中BAX/BCL-2蛋白的表達水平
        5.4.7 免疫組化檢測腫瘤組織中P38、P53蛋白的表達水平
        5.4.8 免疫組化檢測腫瘤組織中AKT、P-AKT蛋白的表達水平
        5.4.9 RT-PCR分析腫瘤組織中相關基因PI3K、CASPASE-9、MMP-2、MMP-9的表達水平變化
    5.5 本章小結
結論與展望
    一、結論
    二、創(chuàng)新點
    三、展望
參考文獻
攻讀博士學位期間取得的研究成果
致謝
附件


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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[3]異鼠李素抗腫瘤作用及其機理的研究[D]. 楊春蕾.四川大學 2004



本文編號：3682787