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新疆傳統(tǒng)酸奶乳酸菌分離鑒定及在驢乳酸奶研制中的應(yīng)用

發(fā)布時間:2022-02-13 21:13
  新疆傳統(tǒng)發(fā)酵酸奶中蘊含著豐富的、性能各異的微生物資源,是獲取具有優(yōu)良發(fā)酵性乳酸菌的主要來源,新疆驢存欄量多,驢乳資源豐富,近年來驢乳酸奶也成為開發(fā)和研究的熱點。本試驗從新疆喀什地區(qū)農(nóng)牧民自制的傳統(tǒng)酸奶中分離出92株乳酸菌為研究對象,通過16S rDNA進行分子鑒定、單菌株產(chǎn)酸能力評價、凝乳能力檢測,篩選出優(yōu)勢乳酸菌組合后應(yīng)用于發(fā)酵驢乳酸奶,通過單因素試驗、Plackett-Burman試驗、最陡爬坡試驗和響應(yīng)面優(yōu)化試驗確定驢乳酸奶的最佳發(fā)酵工藝條件,對發(fā)酵出的驢乳酸奶進行一系列理化檢測、微生物檢測、有機酸檢測以及揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)成分的檢測,最后結(jié)合中試試驗對驢乳酸奶的生產(chǎn)工藝條件進一步優(yōu)化,主要結(jié)果如下:(1)乳酸菌的分離鑒定。從喀什地區(qū)及周邊13個縣區(qū)采集了41份傳統(tǒng)酸奶樣品,從中分離純化出92株乳酸菌,通過16S rDNA擴增序列比對鑒定及構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹對75株乳酸菌進行歸類得到德氏乳桿菌(Lactobacillus delbrueckii)10株、發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillus fermentum)16株、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)7株、... 

【文章來源】:喀什大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:102 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

新疆傳統(tǒng)酸奶乳酸菌分離鑒定及在驢乳酸奶研制中的應(yīng)用


乳酸菌菌落涂布與鏡檢結(jié)果

乳酸菌,瓊脂糖,凝膠電泳


第三章結(jié)果與分析25解CaCO3的透明圈,菌落菌體較孝多為圓形白色、表面凸起或扁平、邊緣略透明,生長較為分散、少數(shù)有成片出現(xiàn);球狀菌生長在MC培養(yǎng)基上,菌落周圍形成溶解CaCO3的透明圈,菌落菌體較大,生長密集、多為乳白色或淺灰色、表面圓滑濕潤,成片或鏈狀生長。a-MRS培養(yǎng)基乳酸菌涂布分離b-MC培養(yǎng)基乳酸菌涂布分離c-油鏡鏡檢圖3-1乳酸菌菌落涂布與鏡檢結(jié)果Fig.3-1Applicationandmicroscopicexaminationoflacticacidbacteriacolonies3.2乳酸菌分子鑒定結(jié)果3.2.1乳酸菌DNA提取結(jié)果將提取的乳酸菌DNA的用瓊脂糖凝膠電泳檢測其純度,部分乳酸菌DNA的1.0%瓊脂糖凝膠電泳圖如圖3-2所示,可以發(fā)現(xiàn)以λDNA/HindⅢ作為參考,在23Kb處出現(xiàn)清晰明亮的條帶,條帶完整無拖尾流散現(xiàn)象,表明分離乳酸菌DNA可以進行后續(xù)16SrDNAPCR擴增試驗。注:M:λDNA/HindⅢ;1:WQ·3-2;2:MGT·3-3;3:SF·1-2;4:KS·1-2;5:MGT·3-1;6:TX·1-2;7:YPH·1-3;8:MGT·1-3;9:KS·3-1;10:SC·2-3;11:SF·2-1;12:TX·2-4;13:TX·2-2。圖3-2部分乳酸菌DNA瓊脂糖凝膠電泳圖Fig.3-2ImageofpartiallactobacillusDNAagarosegelelectrophoresis3.2.2乳酸菌16SrDNAPCR擴增及電泳檢測結(jié)果以提取的92株乳酸菌DNA為模板,采用引物27f和1492r進行16SrDNAPCR擴增,通過1.0%瓊脂糖凝膠電泳進行檢測,部分菌株檢測結(jié)果如圖3-3所

16SrDNA序列,乳酸菌,球菌,總數(shù)


第三章結(jié)果與分析27圖3-4部分乳酸菌16SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.3-4Phylogenetictreeof16SrDNAsequenceofpartiallacticacidbacteria從喀什地區(qū)分離的75株已命名的菌株得出:KS·3-1等10株菌為德氏乳桿菌(Lactobacillusdelbrueckii),占總數(shù)的13.33%;AKT·2-4等16株菌為發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillusfermentum)占總數(shù)的21.33%;WQ·1-3等7株菌為乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici),占總數(shù)的9.33%;TX·5-2等27株菌為屎腸球菌(Enterococcusfaecium),占總數(shù)的36%;ZP·3-1等14株菌為耐久腸球菌(Enterococcusdurans),占總數(shù)的18.67%;TX·1-3等1株菌為腸膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides),占總數(shù)的1.33%。通過乳酸菌分離株的分子鑒定可以看出,已命名的75株乳酸菌中有乳桿菌2種為德氏乳桿菌和發(fā)酵乳桿菌,共有26株,占總數(shù)的34.67%;球菌有4種,分別為乳酸片球菌、屎腸球菌、耐久腸球菌、腸膜明串珠菌,共有49株,占總數(shù)的65.33%。其中屎腸球菌數(shù)量最多,為27株,可判斷其為喀什地區(qū)傳統(tǒng)酸奶中的優(yōu)勢菌種。

【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
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[2]紫薯益生菌酸奶的研制[D]. 胡玢.河北工程大學(xué) 2017
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[5]賽里木酸奶生產(chǎn)技術(shù)研究[D]. 雷華威.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[6]我國傳統(tǒng)奶制品中乳酸菌多樣性研究[D]. 何蕾.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[7]對新疆少數(shù)民族自制酸奶樣品進行乳酸菌的分離、篩選及中試實驗研究[D]. 石月鋒.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[8]阿膠原料的主要蛋白組成及其生理活性的研究[D]. 張少權(quán).福州大學(xué) 2005



本文編號:3623926

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