發(fā)布時(shí)間：2022-01-12 20:32

　　高血壓是腦中風(fēng)、冠心病、心肌梗塞和糖尿病等心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)因子,該疾病已經(jīng)成為最常見的危險(xiǎn)性疾病之一。目前,臨床上常用的一些降血壓藥物雖然具有很強(qiáng)的降血壓作用,但同時(shí)也會(huì)產(chǎn)生一定的副作用,比如過敏、皮疹、咳嗽、味覺異常、白細(xì)胞減少以及具有藥物依賴性等。然而,食源性ACEI肽是一種極具開發(fā)潛力的多肽類物質(zhì),它不僅具有降血壓活性,而且安全性高、無其他毒副作用,已經(jīng)成為生物活性肽領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。羅非魚皮明膠經(jīng)蛋白酶水解后即可獲得安全性高、低毒副作用的具有降低血壓的小分子多肽。本文以羅非魚的副產(chǎn)物羅非魚皮為研究對(duì)象,利用蛋白酶水解魚皮明膠制備ACEI肽,并對(duì)明膠水解產(chǎn)物進(jìn)行了初步分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定,獲得了ACEI活性較高的小分子多肽。主要研究結(jié)果如下:1.以羅非魚皮為原料,利用兩種蛋白酶對(duì)其進(jìn)行水解,將水解得到的明膠水解產(chǎn)物再經(jīng)過連續(xù)模擬胃腸消化,并測(cè)定各個(gè)消化階段產(chǎn)物的水解度及ACEI活性。同時(shí),考慮體外腸吸收的影響,采用Caco-2細(xì)胞單層模型制備得到ACEI肽。再通過Sephadex G-25凝膠過濾柱、反向高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行分離純化,經(jīng)過高分辨質(zhì)譜鑒定得到VGLPNSR和QAGL... 

【文章來源】：昆明理工大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

ACE在血壓調(diào)節(jié)中的作用機(jī)制Fig1-1MechanismofactionofACEinbloodpressureregulation

昆明理工大學(xué)碩士學(xué)位論文242.3數(shù)據(jù)處理與分析每個(gè)實(shí)驗(yàn)至少做三個(gè)平行，采用MicrosoftOfficeExcel2010進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差；使用SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著，p<0.05。2.4結(jié)果與討論2.4.1ACE酶活力的測(cè)定以馬尿酸的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)，以其在228nm處的特征吸收峰的吸光度值為縱坐標(biāo)繪制得到馬尿酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖2.1所示。經(jīng)過測(cè)定，本實(shí)驗(yàn)所用ACE酶的活為1U/mg。圖2.1馬尿酸標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig2.1Thestandardcurveofhippuricacid2.4.2TSG水解產(chǎn)物水解度（DH）的變化在本研究中，通過連續(xù)模擬GI消化制備TSG水解產(chǎn)物，測(cè)定了不同階段水解產(chǎn)物的DH值，包括：SG-1，SGI-1，SG-2、SGI-2。如圖2.2所示，經(jīng)過第一次模擬胃消化后得到SG-1的DH值為5.23％；而第一次模擬腸消化的過程中，SG-1經(jīng)過胰酶的進(jìn)一步消化得到的SGI-1，其DH

昆明理工大學(xué)碩士學(xué)位論文26胞單層膜吸收之前就已經(jīng)被裂解成其他的小分子肽段[83]。由前面的研究結(jié)果可知小分子肽的DH值較高，因此，SGI-2BL的DH值高于SGI-2。還有研究發(fā)現(xiàn)，ACEI肽的疏水性可以增強(qiáng)其在Caco-2細(xì)胞中的轉(zhuǎn)運(yùn)，同時(shí)，肽的疏水性也可以增加其ACEI活性[82]。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也符合這一特點(diǎn)。圖2.2魚皮明膠不同消化階段的水解度和ACEI活性變化Fig2.2Fig.1ThehydrolysisdegreeandACEinhibitoryactivitychangesofdifferentstagesofdigestionfromskincollagen注：圖中小寫字母表示差異顯著性，相同字母表示差異不顯著（p>0.05），不同字母表示差異顯著(p<0.05)。SG-1：第一次模擬胃消化；SGI-1：第一次模擬腸道消化；SG-2：第二次模擬胃消化；SGI-2：第二次模擬腸道消化。d

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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