學習和記憶障礙被廣泛認為是許多神經退行性疾病的主要臨床綜合癥。失眠是導致現代社會部分與記憶缺陷相關的神經退行性疾病的主要原因之一。因此,開發(fā)功能性食品以減輕由失眠所導致的記憶缺陷顯得尤為重要。研究報道核桃肽在多種動物記憶損傷模型中顯示出明顯的神經保護作用,然而未見關于核桃肽對睡眠剝奪（SD）誘導的大鼠學習和記憶障礙具有改善作用的研究報道。此外,大量研究主要集中在核桃蛋白水解物（WPH）的神經保護作用方面。較少涉及核桃蛋白水解物（WPH）中神經保護肽的結構特征。因此,本論文以核桃肽為研究對象,探明核桃肽對大鼠SD誘導的記憶缺陷具有改善作用的基礎之上,進一步鑒定和表征核桃肽中的神經保護肽,并系統(tǒng)研究其對谷氨酸損傷PC12細胞的保護作用,揭示核桃神經保護肽的作用機制。本論文研究了核桃肽對睡眠剝奪導致的大鼠記憶障礙的改善作用:結果顯示,核桃蛋白酶解物低分子肽段（WPHL,MW<3 kDa）較核桃蛋白酶解物（WPH）在定位航行和空間探索行為學試驗中對模型大鼠具有更好的改善效果。使用WPH和WPHL干預可使得SD大鼠腦中抗氧化防御酶（CAT,GSH-px和SOD）活性和GSH/GSSG比例降... 

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SephadexG-15分離核桃蛋白肽的色譜圖

第三章 核桃蛋白改善記憶肽的分離鑒定及活性驗證.4.2 核桃肽的序列鑒定質譜法是近年來興起的用于蛋白質測序的最重要的手段之一，可作為將不同源的蛋白質與特定的蛋白序列數據庫串聯(lián)起來的樞紐，也成為多肽序列鑒定的高效方法[14]。在質譜中，物質起初是根據其離子化后質荷比（m/z）大小的不被分開的，進而通過計算各離子譜峰的強度來進行測定[15]。在MS/MS模式下，一級飛行時間質量分析器的母離子先進入高能碰撞池中進行撞擊碰碎，然后進第二級 TOF 中被加速和分析。一級質譜可用來確定物質的分子量，出現的是些分子和離子峰，不包括碎片峰。二級質譜用來進一步分析由一級質譜母離子律性破碎產生的碎片來獲得分子組成及序列[16]。

一級飛行時間質量分析器的母離子先進入高能碰撞池中進行撞擊碰碎，然后進第二級 TOF 中被加速和分析。一級質譜可用來確定物質的分子量，出現的是些分子和離子峰，不包括碎片峰。二級質譜用來進一步分析由一級質譜母離子律性破碎產生的碎片來獲得分子組成及序列[16]。圖 3-3 (A) 組分 G4 的 BPC 圖Figure 3-3 (A) Base Peak Chromatogram (BPC) of fraction G4

【參考文獻】：
期刊論文
[1]核桃多肽的制備及其體外抗氧化性研究[J]. 顏小捷,蔣周田,楊子明,鄭立浪,李典鵬.  食品研究與開發(fā). 2016(02)
[2]Neuroprotective Effect of Peptides Extracted from Walnut（Juglans Sigilata Dode） Proteins on Aβ25-35-induced Memory Impairment in Mice[J]. 鄒娟,蔡培珊,熊朝梅,阮金蘭.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2016(01)
[3]核桃蛋白酶解物體外抗氧化活性及初步分離的研究[J]. 周鴻翔,田婭玲,柳蔭,王曉丹,邱樹毅.  食品科技. 2015(12)
[4]吉林人參低聚肽抗疲勞作用[J]. 鮑雷,王軍波,蔡夏夏,張遠,孫彬,張召鋒,李勇.  科技導報. 2015(13)
[5]酶解核桃蛋白制備ACE抑制肽及其功能特性研究[J]. 姜莉,徐懷德,李艷伏.  中國食品學報. 2015(02)
[6]虎杖苷的降尿酸作用及其機制研究[J]. 吳杲,吳漢斌,蔣紅.  藥學學報. 2014(12)
[7]黃酮類化合物改善記憶的機制研究[J]. 李冬生,陳朝銀,趙聲蘭,劉迪秋,葛峰.  食品工業(yè)科技. 2014(10)
[8]吃核桃能補腦嗎[J]. 唐大寒.  醫(yī)藥與保健. 2013(08)
[9]長壽之果話核桃[J]. 楊覓.  生態(tài)文化. 2013(02)
[10]微生物發(fā)酵法制備大豆ACE抑制肽菌種的篩選[J]. 李響,劉暢,吳非.  食品科學. 2013(01)

博士論文
[1]抗氧化肽的構效關系及定向制備的研究[D]. 鄭淋.華南理工大學 2015
[2]四逆散加味對睡眠剝奪大鼠學習記憶影響的分子生物學機制研究[D]. 馮婷.北京中醫(yī)藥大學 2012

碩士論文
[1]鱸魚魚肉抗氧化肽的分離鑒定及其對HepG2細胞氧化損傷的保護作用研究[D]. 趙翊君.華南理工大學 2018
[2]長白山核桃蛋白肽的制備及功能活性研究[D]. 崔玲玉.吉林農業(yè)大學 2016
[3]溫185-核桃蛋白酶解物的制備及其活性研究[D]. 賈靖霖.塔里木大學 2015
[4]核桃粕蛋白抗氧化肽的分離純化、結構鑒定及其改善記憶的研究[D]. 陳卉平.華南理工大學 2015
[5]酪蛋白ACE抑制肽的制備分離及改性[D]. 洪旭.江南大學 2014
[6]核桃多肽的制備條件優(yōu)化及其抗氧化活性研究[D]. 郝常艷.山西大學 2014
[7]固態(tài)發(fā)酵核桃粕制備抗氧化活性肽的研究[D]. 武萬興.昆明理工大學 2014
[8]酶解馬氏珍珠貝蛋白制備ACE抑制肽的研究[D]. 賴晨戎.華南理工大學 2014
[9]蛋清蛋白肽對小鼠記憶和神經興奮性影響的研究[D]. 許海麗.吉林大學 2011



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