二十二碳六烯酸（DHA）是n-3系列不飽和脂肪酸,具有良好的抗氧化性、降脂功能和抗癌效果。然而,DHA在加工和貯藏過程中易被氧化分解,在光照和高溫下極易失活,如何保持DHA活性成為了亟待解決的技術難題。本研究分別選取卵清蛋白膠束、肌球蛋白膠束、大豆球蛋白膠束和β-乳球蛋白酶解制備蛋白膠束用于封裝DHA,四種蛋白經過胰凝乳蛋白酶部分酶解形成兩親性肽,將DHA包埋在膠束內部,通過探究膠束結構特性和對DHA生物活性的影響,對四種載DHA蛋白膠束進行比較分析。結果表明:通過熒光光譜和圓二色譜測定四種蛋白酶解后蛋白的二級結構和熒光猝滅情況,證明四種蛋白均能自組裝成載DHA蛋白膠束。載DHAβ-乳球蛋白膠束電動電勢為-24.3mV,結構體系最為穩(wěn)定;載DHA大豆球蛋白膠束α-螺旋減少2.6%,DHA包封率和包埋量最大,分別為91.53%和196;載DHA肌球蛋白粒徑最小,為23 nm;卵清蛋白膠束電動電勢-18.3,平均粒徑38 nm,包埋量185。進一步對遞送體系的穩(wěn)定性和體外抗氧化性進行測定,載DHAβ-乳球蛋白膠束水溶性最好,穩(wěn)定性較好,高溫下留存率34.83%,紫外照射下留存率36.42%... 

【文章來源】：沈陽農業(yè)大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白封裝DHA膠束的形態(tài)（80K）

油紅O染色結果圖（40×）

4蛋白自組裝DHA膠束的降脂活性的研究34酸水平升高，導致通風、心血管疾病的發(fā)生（KayserB，VergesS，2013）。由圖4-10可知，棕櫚酸刺激下，細胞內UA水平明顯升高，對照組與模型組有顯著性差異（P<0.05），四組蛋白膠束的UA含量與模型組均無顯著性差異，四組載DHA蛋白膠束與DHA組均有顯著性差異，表明DHA進入細胞后，UA含量顯著性下降，載DHA肌球蛋白膠束組的UA含量最低，抑制尿酸過剩的效果最好。4.3.11細胞自噬體形成結果細胞自噬體形成結果圖4-11所示。圖4-11細胞自噬結果圖（400×）Fig.4-11Resultsofautophagy（400×）（A：對照組；B：模型組；C：DHA；D：卵清蛋白膠束；E：載DHA卵清蛋白膠束；F：肌球蛋白膠束；G：載DHA肌球蛋白膠束；H：大豆球蛋白膠束；I：載DHA大豆球蛋白膠束；J：β-乳球蛋白膠束；K：載DHA乳球蛋白膠束）細胞內的脂滴也被認為是自噬的底物，細胞自噬是通過作用脂滴達到避免細胞內脂質超載的目的。MDC是一種特異性熒光胺基探針，能直接抑制囊泡轉運，標記自噬體。由圖4-11可知，對比空白組，模型組的藍色熒光明顯減少，在添加DHA和載DHA蛋白膠束后藍色熒光有所增多，說明細胞自噬受到了棕櫚酸的抑制，自噬體減少。四組蛋白膠束的熒光信號強度與模型組幾乎無差別，四組載DHA蛋白膠束的信號強度得到增強，說明蛋白膠束本身不具有促進細胞自噬的能力，通過運轉DHA，使DHA發(fā)揮作用，使自噬體增多，其中載DHA肌球蛋白膠束的熒光信號最強。4.3.12細胞免疫熒光染色檢測HepG2細胞內LC3-Ⅱ表達水平細胞LC3-Ⅱ表達水平圖4-12所示。

【參考文獻】：
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本文編號：3295420