發(fā)布時(shí)間：2021-06-24 05:13

　　甾醇是煙氣中多環(huán)芳烴及苯并（a）芘的主要前體化合物之一,對(duì)煙草感官品質(zhì)和安全性起到負(fù)面影響。為降解煙草中的甾醇含量,提高卷煙安全性,本研究從煙草表面篩選可降解甾醇類(lèi)化合物的微生物,以豆甾醇為降解模式反應(yīng),優(yōu)化微生物的降解條件,通過(guò)再造煙葉浸提液、煙絲發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行應(yīng)用驗(yàn)證,實(shí)現(xiàn)煙草中植物甾醇的生物降解,從而達(dá)到降低煙氣中的稠環(huán)芳烴。為此,主要開(kāi)展了如下幾方面的研究:（1）以豆甾醇為唯一碳源,從煙葉表面分離出了2株微生物,經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定,為類(lèi)芽孢桿菌和甲基桿菌。對(duì)其中一株微生物類(lèi)芽孢桿菌進(jìn)行了生長(zhǎng)及甾醇降解特性進(jìn)行了研究,通過(guò)中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)（CCD）,得出了最佳降解工藝組合溫度40℃,pH值為6.53,豆甾醇濃度為2.15g/L,葡萄糖濃度6g/L,酵母粉濃度1g/L。獲得了一株可高效降解甾醇的微生物。（2）將類(lèi)芽孢桿菌靜息細(xì)胞應(yīng)用于再造煙葉浸提液發(fā)酵發(fā)現(xiàn):在37℃,pH 7.0條件下采用對(duì)數(shù)期的細(xì)胞,浸提液中甾醇降解率為39.5%,再造煙葉中甾醇的降解率為36.5%,煙氣中苯并芘降低了31.7%。同時(shí)發(fā)現(xiàn),經(jīng)類(lèi)芽孢桿菌的發(fā)酵后制備的再造煙葉的內(nèi)在品質(zhì)及感官質(zhì)量均有所提升。證明... 

【文章來(lái)源】：鄭州輕工業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：100 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

甾醇的結(jié)構(gòu)

研究的主要技術(shù)路線

第二章甾醇類(lèi)降解菌株的篩選132.3.2菌株形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果將獲得的2種菌株進(jìn)一步接種到種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)后涂布于固體平板上，白色菌株在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)2d后，菌落光滑、飽滿、圓頂狀。菌落直徑1mm左右，菌落邊緣光滑，呈現(xiàn)白色，平板菌落如圖2-1（A）所示。紅色菌株培養(yǎng)3天后可以長(zhǎng)出較為明顯的圓形菌落，菌落較為飽滿，略粗糙，菌落直徑為0.5mm左右，呈紅色，平板菌落如圖2-1（B）。利用甾醇作為唯一碳源，在固體平板培養(yǎng)基上對(duì)富集獲得的微生物進(jìn)行篩選分離。因此，能夠在平板上存活的微生物可基本確定能利用甾醇作為碳源來(lái)維持細(xì)胞生長(zhǎng)，作為備選的甾醇降解微生物。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)，在平板上分離到2種形狀的微生物單菌落，且相對(duì)均勻，無(wú)其他雜菌。這一結(jié)果說(shuō)明煙草表面此類(lèi)降解甾醇的微生物較少，同時(shí)這也是首次報(bào)道從煙草表面獲得甾醇降解菌。因此，挑選這兩種菌株的1-2個(gè)單菌落進(jìn)行活化，并進(jìn)一步在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，用于后期的形態(tài)和分子鑒定。圖2-1微生物平板培養(yǎng)圖通過(guò)革蘭氏染色觀察細(xì)菌形狀，白色菌落微生物呈現(xiàn)桿狀，粉紅色菌落微生物也呈現(xiàn)桿狀，白色菌株為革蘭氏陽(yáng)性菌，粉紅色菌株為革蘭氏陰性菌，大小在1-4μm間。結(jié)晶紫染色活體細(xì)胞，并于顯微鏡下觀察，結(jié)果如圖2-2。圖2-2兩種菌株鏡檢結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3246441