發(fā)布時(shí)間：2021-05-09 11:18

　　食源性疾病是世界性的公共衛(wèi)生問題,食源性致病菌是引發(fā)食源性疾病的最主要因素。沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和單增李斯特菌是常見的食源性致病菌,其導(dǎo)致的食源性疾病已引起廣泛重視。準(zhǔn)確快速檢測這些致病菌是預(yù)防和控制相關(guān)食源性疾病的關(guān)鍵。傳統(tǒng)檢測致病菌的方法時(shí)間長、操作復(fù)雜、工作量大,因此亟需建立一種快速、簡單易用的現(xiàn)代化檢測方法來檢測食源性致病菌。而目前檢測食源性致病菌都需要進(jìn)行前增菌過程,但每種致病菌都有各自的生長習(xí)性和營養(yǎng)要求,不同的致病菌需要用不同的增菌培養(yǎng)基,這在很大程度上限制在實(shí)際檢測中的應(yīng)用,因此亟需研制一種能使它們等速快速增殖的通用增菌培養(yǎng)基。本研究第一部分以沙門氏菌為目標(biāo)菌,建立了基于生物膜干涉（BLI）技術(shù)的快速檢測方法,實(shí)現(xiàn)了食品中沙門氏菌的快速、準(zhǔn)確檢測,為我國食源性致病菌的監(jiān)測體系提供了新的技術(shù)手段。第二部分研制了一種能使沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和單增李斯特菌等速快速增殖的通用增菌培養(yǎng)基,為后續(xù)利用多通道生物分子相互作用儀高通量檢測技術(shù)檢測上述三種致病菌打下了基礎(chǔ)。主要研究內(nèi)容如下:（1）建立了一種基于BLI技術(shù)的腸炎沙門氏菌實(shí)時(shí)無標(biāo)記快速檢測方法�？贵w固定化時(shí)醋酸-醋酸... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和單增李斯特菌的概述
        1.1.1 沙門氏菌
        1.1.2 金黃色葡萄球菌
        1.1.3 單增李斯特菌
    1.2 沙門氏菌國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.2.1 傳統(tǒng)培養(yǎng)法
        1.2.2 免疫學(xué)方法
        1.2.3 分子生物學(xué)方法
        1.2.4 生物傳感檢測方法
    1.3 生物膜干涉技術(shù)
    1.4 共增菌培養(yǎng)基國內(nèi)外研究進(jìn)展
    1.5 本課題研究內(nèi)容及重點(diǎn)解決的關(guān)鍵技術(shù)問題
        1.5.1 本課題主要研究內(nèi)容
        1.5.2 本課題要重點(diǎn)解決的關(guān)鍵技術(shù)問題
第二章 基于生物膜干涉技術(shù)快速檢測沙門氏菌方法的研究
    2.1 材料與設(shè)備
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        2.1.2 材料與試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)菌培養(yǎng)及樣品制備
        2.2.2 主要試劑的配制
        2.2.3 生物傳感器表面抗體固定化
        2.2.4 稀釋抗體用醋酸-醋酸鈉緩沖溶液最佳pH值的確定
        2.2.5 抗體固定化時(shí)最佳抗體濃度的確定
        2.2.6 靈敏度分析和檢出限的確定
        2.2.7 特異性分析
        2.2.8 實(shí)際食品樣品中沙門氏菌的檢測
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 生物傳感器表面抗體固定化相關(guān)條件的確定
        2.3.2 靈敏度和檢出限的確定
        2.3.3 特異性分析
        2.3.4 實(shí)際食品樣品中沙門氏菌的檢測
    2.4 本章小結(jié)
第三章 金黃色葡萄球菌、沙門氏菌及單增李斯特菌共增菌培養(yǎng)基的制備
    3.1 材料與設(shè)備
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        3.1.2 培養(yǎng)基與試劑
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 菌種活化與保藏以及菌懸液制備
        3.2.2 基礎(chǔ)培養(yǎng)基的選擇
        3.2.3 共增菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基中其他蛋白胨與營養(yǎng)成分的篩選
        3.2.4 共增菌培養(yǎng)基中抑制劑與促進(jìn)劑的篩選
        3.2.5 共增菌培養(yǎng)基的正交試驗(yàn)優(yōu)化
        3.2.6 共增菌培養(yǎng)基最適溫度、最佳p H的確定
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基中相關(guān)成分的單因素試驗(yàn)結(jié)果
        3.3.2 促進(jìn)劑對三種菌生長情況的影響
        3.3.3 抑制劑對三種菌生長情況的影響
    3.4 各添加成分對三種菌生長情況影響的正交試驗(yàn)
        3.4.1 添加劑單因素的篩選及正交試驗(yàn)結(jié)果
        3.4.2 正交試驗(yàn)中金黃色葡萄球菌生長情況的試驗(yàn)結(jié)果分析
        3.4.3 正交試驗(yàn)中沙門氏菌生長情況的試驗(yàn)結(jié)果分析
        3.4.4 正交試驗(yàn)中單增李斯特菌生長情況的試驗(yàn)結(jié)果分析
        3.4.5 基于三種目標(biāo)菌正交試驗(yàn)結(jié)果的設(shè)計(jì)優(yōu)化
    3.5 本章小結(jié)
第四章 金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、單增李斯特菌復(fù)合增菌培養(yǎng)基增菌效果分析
    4.1 材料與設(shè)備
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        4.1.2 培養(yǎng)基與試劑
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 目標(biāo)菌及非目標(biāo)菌的平板計(jì)數(shù)
        4.2.2 共增菌培養(yǎng)基的制備
        4.2.3 金黃色葡萄球菌在SSL和7.5%NaCl肉湯中的單增菌培養(yǎng)
        4.2.4 沙門氏菌在SSL和 RV沙門菌增菌肉湯中的單增菌培養(yǎng)
        4.2.5 單增李斯特菌在SSL和 LEB肉湯中的單增菌培養(yǎng)
        4.2.6 SSL的共增菌培養(yǎng)
        4.2.7 SSL對非目標(biāo)菌的抑制作用考察
        4.2.8 非目標(biāo)菌存在情況下目標(biāo)菌的生長情況考察
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 金黃色葡萄球菌在SSL和7.5%NaCl肉湯中的生長效果
        4.3.2 沙門氏菌在SSL和 RV沙門菌增菌肉湯中的生長效果
        4.3.3 單增李斯特菌在SSL和 LEB肉湯中的生長效果
        4.3.4 SSL的共增菌效果
        4.3.5 SSL對非目標(biāo)菌的抑制效果
        4.3.6 非目標(biāo)菌存在情況下目標(biāo)菌的生長效果
    4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡介
作者簡介及科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]沙門氏菌及副溶血性弧菌的共增菌培養(yǎng)基的研制[J]. 晨凡,秦鮮菊,徐思源,寧喜斌.  食品工業(yè)科技. 2018(19)
[2]SSEL結(jié)合多重PCR同時(shí)快速檢測生菜中4種食源性致病菌[J]. 瞿洋,索玉娟,徐斐,趙志勇,曹慧,晏紹慶,周昌艷.  上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2017(04)
[3]1種選擇性富集沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌和副溶血性弧菌共增菌培養(yǎng)基SSSV研究[J]. 翁思聰,朱軍莉,馮立芳,勵(lì)建榮.  中國食品學(xué)報(bào). 2013(01)
[4]沙門氏菌、志賀氏菌和金黃色葡萄球菌共增菌培養(yǎng)基的研制[J]. 王永志,余以剛,黃秀麗,肖性龍,吳暉.  食品科學(xué). 2013(17)
[5]選擇性富集沙門氏菌、副溶血弧菌和霍亂弧菌的共增菌培養(yǎng)基SVV[J]. 覃倚瑩,吳暉,肖性龍,余以剛,劉冬梅,李曉鳳,唐語謙.  生物工程學(xué)報(bào). 2009(10)



本文編號：3177211