硫酸化修飾對(duì)涼粉草多糖免疫活性的影響及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-04-01 01:41
涼粉草多糖(MP)作為涼粉草的主要活性物質(zhì)之一,是一種具有抗糖尿病,抗氧化和抗癌作用等多種生物活性的藥食兩用資源。由于多糖結(jié)構(gòu)差異可能限制其生物活性,因此通過化學(xué)修飾引入特定的化學(xué)基團(tuán),在一定程度上可以特異性的影響多糖的生物活性。本文從涼粉草中提取并精制涼粉草多糖,用氯磺酸吡啶(CAP)法對(duì)MP進(jìn)行硫酸化修飾獲得一種硫酸化衍生物,命名為SMP。通過測定多糖的糖含量、糖醛酸含量、蛋白質(zhì)含量、單糖組成、分子量、取代度、表面形態(tài)等對(duì)其主要理化性質(zhì)進(jìn)行分析。通過建立體外清除自由基模型和H2O2誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞氧化損傷模型,評(píng)價(jià)MP和SMP體外抗氧化活性。同時(shí),探究了 MP和SMP對(duì)體外脾淋巴細(xì)胞和RAW264.7細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用。此外,建立了環(huán)磷酰胺(Cy)誘導(dǎo)的小鼠免疫抑制模型,探究MP和SMP對(duì)免疫抑制小鼠的免疫功能的增強(qiáng)作用。主要結(jié)果如下:1.硫酸化修飾改變了 MP的糖含量,單糖組成,分子量和表觀結(jié)構(gòu)。紅外光譜結(jié)果顯示硫酸基團(tuán)被成功的結(jié)合到MP的結(jié)構(gòu)中,且SMP的取代度為0.52。MP是一種含有39.01±0.25%的中性糖,29.30±1.68%的糖醛酸和27.52±0.61...
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.1技術(shù)路線示意圖??Fig.?1.1?Schematic?diagram?of?technology?routes??
?第2章涼粉草多糖的硫酸化修飾及理化特性分析???是多糖的特征吸收峰。1610?cm-1處的吸收峰是由于C==0的不對(duì)稱伸縮振動(dòng)產(chǎn)生??的[67]。除了上述特征吸收峰外,硫酸化涼粉草多糖的紅外光譜中出現(xiàn)了硫酸酯基??團(tuán)特征吸收峰,例如1260?cm-1和814?cnr1處的吸收峰分別被認(rèn)為是由S-0不對(duì)??稱伸縮振動(dòng)和C-0-S對(duì)稱伸縮振動(dòng)產(chǎn)生的[68]。??180-1??150-?smp?^?J??1?9〇--?V1?J11??£?-C??30-?|??3500?3000?2500?2000?1500?1000?500??Wavenumbers?(cm"')??圖2.6?MP和SMP的紅外光譜圖??Fig.?2.6?The?FT-IR?spectrogram?of?MP?and?SMP??2.5.6表觀結(jié)構(gòu)??SEM可以提供樣品的表面形貌和外觀信息,因此通過SEM掃描硫酸化修飾??前后涼粉草多糖的特征。圖2.7顯示了放大500倍和5000倍的涼粉草多糖和硫??酸化涼粉草多糖的SEM圖像。發(fā)現(xiàn)涼粉草多糖呈片狀并具有光滑的表面??(5000><),而硫酸化涼粉草多糖的表面具有許多孔狀結(jié)構(gòu)。對(duì)于500倍的放大??倍數(shù),發(fā)現(xiàn)涼粉草多糖的總體形態(tài)在硫酸化后變得更加分散,并且發(fā)現(xiàn)了一些卷??曲形式。多糖表面形態(tài)的差異表明硫酸化改性改變了涼粉草多糖的表面形態(tài),這??可能增加涼粉草多糖的水溶性以影響其生物活性。??15??
?第3章硫酸化修飾對(duì)涼粉草多糖體外抗氧化活性的影響???125-1?[g^MP??訪?國,??CD?1^3?Control??100-?::?圖?H:0:??J?;:??1?25 ̄?1?I?l.l?1111.11.8??0?H2〇2?20?40?60?80?100??Concentration?(|ig/mL)??圖3.4?MP和SMP對(duì)于H202誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中MDA含量的影響??Fig.3.4?Effects?of?MP?and?SMP?on?the?content?of?MDA?in?RAW264.7?cells?induced?by?H:〇2??3.5.5?DPPH自由基清除活性??體外自由基清除活性是天然活性多糖的重要抗氧化能力。DPPH方法是經(jīng)典??的通過吸光度值的降低程度來評(píng)估多糖抗氧化活性的實(shí)驗(yàn)方法t85#l。如圖3.5所??示,涼粉草多糖和硫酸化涼粉草多糖劑量依賴性的清除DPPH自由基。涼粉草多??糖和硫酸化涼粉草多糖濃度為1000?pg/mL清除活性達(dá)到最大值,分別為??75.11±0.31?%和86.95±0.61?%。這些結(jié)果表明涼粉草多糖和硫酸化涼粉草多糖均??可以有效清除DPPH自由基,硫酸基團(tuán)的引入增強(qiáng)了涼粉草多糖對(duì)DPPH自由??基的清除能力。??100-1??A-??A???A???—A?A??呈?f?r—一—*??^?80-?l?/??^?^????:E??g?60-?//??1?40-?/?一-??-2〇j/???0?200?400?600?800?1000??Concentration?((ig/m
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Renal Protective Activity of Hsian-tsao Extracts in Diabetic Rats[J]. MIN YANG, ZHENG-PING XU, CAI-JU XU, JIA MENG, GANG-QIANG DING, XIAO-MING ZHANG, AND YAN WENG2 Zhejiang University, School of Medicine, Hangzhou 310058, Zhejiang, China; Zhejiang Provincial Center for Disease Control and Prevention, Hangzhou 310009, Zhejiang, China. Biomedical and Environmental Sciences. 2008(03)
[2]淫羊藿多糖的硫酸化修飾及其對(duì)IBDV感染細(xì)胞的影響[J]. 盧宇,胡元亮,黃小燕,王德云,王君敏,徐玉鳳,趙曉娜. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(02)
[3]香菇多糖的分子結(jié)構(gòu)及其硫酸化改性的研究[J]. 顏邦干,李衛(wèi)旗,吳學(xué)謙. 中國食品學(xué)報(bào). 2006(05)
[4]多糖的化學(xué)修飾研究進(jìn)展[J]. 劉占峰,孫漢文. 河北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(01)
[5]川牛膝多糖硫酸酯的體外抗單純皰疹病毒2型活性[J]. 劉穎華,何開澤,楊敏,蒲薔,張軍峰. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2004(01)
碩士論文
[1]硫酸化修飾對(duì)青錢柳多糖抗氧化和抗炎活性的影響[D]. 王之珺.南昌大學(xué) 2017
本文編號(hào):3112451
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.1技術(shù)路線示意圖??Fig.?1.1?Schematic?diagram?of?technology?routes??
?第2章涼粉草多糖的硫酸化修飾及理化特性分析???是多糖的特征吸收峰。1610?cm-1處的吸收峰是由于C==0的不對(duì)稱伸縮振動(dòng)產(chǎn)生??的[67]。除了上述特征吸收峰外,硫酸化涼粉草多糖的紅外光譜中出現(xiàn)了硫酸酯基??團(tuán)特征吸收峰,例如1260?cm-1和814?cnr1處的吸收峰分別被認(rèn)為是由S-0不對(duì)??稱伸縮振動(dòng)和C-0-S對(duì)稱伸縮振動(dòng)產(chǎn)生的[68]。??180-1??150-?smp?^?J??1?9〇--?V1?J11??£?-C??30-?|??3500?3000?2500?2000?1500?1000?500??Wavenumbers?(cm"')??圖2.6?MP和SMP的紅外光譜圖??Fig.?2.6?The?FT-IR?spectrogram?of?MP?and?SMP??2.5.6表觀結(jié)構(gòu)??SEM可以提供樣品的表面形貌和外觀信息,因此通過SEM掃描硫酸化修飾??前后涼粉草多糖的特征。圖2.7顯示了放大500倍和5000倍的涼粉草多糖和硫??酸化涼粉草多糖的SEM圖像。發(fā)現(xiàn)涼粉草多糖呈片狀并具有光滑的表面??(5000><),而硫酸化涼粉草多糖的表面具有許多孔狀結(jié)構(gòu)。對(duì)于500倍的放大??倍數(shù),發(fā)現(xiàn)涼粉草多糖的總體形態(tài)在硫酸化后變得更加分散,并且發(fā)現(xiàn)了一些卷??曲形式。多糖表面形態(tài)的差異表明硫酸化改性改變了涼粉草多糖的表面形態(tài),這??可能增加涼粉草多糖的水溶性以影響其生物活性。??15??
?第3章硫酸化修飾對(duì)涼粉草多糖體外抗氧化活性的影響???125-1?[g^MP??訪?國,??CD?1^3?Control??100-?::?圖?H:0:??J?;:??1?25 ̄?1?I?l.l?1111.11.8??0?H2〇2?20?40?60?80?100??Concentration?(|ig/mL)??圖3.4?MP和SMP對(duì)于H202誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中MDA含量的影響??Fig.3.4?Effects?of?MP?and?SMP?on?the?content?of?MDA?in?RAW264.7?cells?induced?by?H:〇2??3.5.5?DPPH自由基清除活性??體外自由基清除活性是天然活性多糖的重要抗氧化能力。DPPH方法是經(jīng)典??的通過吸光度值的降低程度來評(píng)估多糖抗氧化活性的實(shí)驗(yàn)方法t85#l。如圖3.5所??示,涼粉草多糖和硫酸化涼粉草多糖劑量依賴性的清除DPPH自由基。涼粉草多??糖和硫酸化涼粉草多糖濃度為1000?pg/mL清除活性達(dá)到最大值,分別為??75.11±0.31?%和86.95±0.61?%。這些結(jié)果表明涼粉草多糖和硫酸化涼粉草多糖均??可以有效清除DPPH自由基,硫酸基團(tuán)的引入增強(qiáng)了涼粉草多糖對(duì)DPPH自由??基的清除能力。??100-1??A-??A???A???—A?A??呈?f?r—一—*??^?80-?l?/??^?^????:E??g?60-?//??1?40-?/?一-??-2〇j/???0?200?400?600?800?1000??Concentration?((ig/m
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Renal Protective Activity of Hsian-tsao Extracts in Diabetic Rats[J]. MIN YANG, ZHENG-PING XU, CAI-JU XU, JIA MENG, GANG-QIANG DING, XIAO-MING ZHANG, AND YAN WENG2 Zhejiang University, School of Medicine, Hangzhou 310058, Zhejiang, China; Zhejiang Provincial Center for Disease Control and Prevention, Hangzhou 310009, Zhejiang, China. Biomedical and Environmental Sciences. 2008(03)
[2]淫羊藿多糖的硫酸化修飾及其對(duì)IBDV感染細(xì)胞的影響[J]. 盧宇,胡元亮,黃小燕,王德云,王君敏,徐玉鳳,趙曉娜. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(02)
[3]香菇多糖的分子結(jié)構(gòu)及其硫酸化改性的研究[J]. 顏邦干,李衛(wèi)旗,吳學(xué)謙. 中國食品學(xué)報(bào). 2006(05)
[4]多糖的化學(xué)修飾研究進(jìn)展[J]. 劉占峰,孫漢文. 河北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(01)
[5]川牛膝多糖硫酸酯的體外抗單純皰疹病毒2型活性[J]. 劉穎華,何開澤,楊敏,蒲薔,張軍峰. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2004(01)
碩士論文
[1]硫酸化修飾對(duì)青錢柳多糖抗氧化和抗炎活性的影響[D]. 王之珺.南昌大學(xué) 2017
本文編號(hào):3112451
本文鏈接:http://sikaile.net/projectlw/qgylw/3112451.html
最近更新
教材專著