膠體金是具有一定尺寸大小,并且可以保持穩(wěn)定膠體狀態(tài)的貴金屬納米粒子。由于顏色醒目,所以膠體金作為示蹤物廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)檢測(cè)。同時(shí),膠體金具有較高的摩爾消光系數(shù)和可調(diào)的可見(jiàn)光吸收峰,因此也可以作為淬滅劑應(yīng)用于檢測(cè)。黃曲霉毒素M1（Aflatoxin,AFM1）是黃曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）的次級(jí)代謝產(chǎn)物。在潮濕的環(huán)境下,AFB1會(huì)污染谷物,奶牛吃了AFB1污染的谷物后會(huì)產(chǎn)生含AFM1的牛奶,因此AFM1也被稱為“牛奶毒素”。大腸桿菌O157:H7對(duì)于人類(lèi)健康而言是一種嚴(yán)重的威脅,因此,有必要設(shè)計(jì)一種快速且靈敏的方法來(lái)檢測(cè)它們。本論文利用膠體金的顯色作用和淬滅作用實(shí)現(xiàn)對(duì)AFM1和大腸桿菌O157:H7的檢測(cè)。真菌毒素和致病菌可能存在于同一食品樣本中,因此有必要在樣本中將其同時(shí)檢出。本文第二章以膠體金為顯色標(biāo)記物將競(jìng)爭(zhēng)法和雙抗夾心法集成在同一個(gè)試紙條上,從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)小分子物質(zhì)（AFM1）和大分子物質(zhì)（大腸桿菌O157:H7）的同時(shí)檢測(cè)。結(jié)果表明,AFM1檢測(cè)時(shí),線性范圍為100 pg/mL-1000 pg/mL,在牛奶中的檢測(cè)靈敏度為50 pg/mL。大腸桿菌O157... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

黃曲霉毒素結(jié)構(gòu)通式

2.3.5 T 線位置的探究如圖2.1所示，將T1線檢測(cè)AFM1，T2線檢測(cè)大腸桿菌O157:H7這種模式命名為L(zhǎng)FI set-up I；將T1線檢測(cè)大腸桿菌O157:H7，T2線檢測(cè)AFM1這種模式命名為L(zhǎng)FI set-up II。在LFI set-up I和LFI set-up II這兩種模式中，當(dāng)AFM1濃度為0 pg/mL時(shí)，每隔一分鐘對(duì)檢測(cè)大腸桿菌O157:H7（3.3×105CFU/mL）的T線信號(hào)值進(jìn)行讀取，直到35 min。比較這兩種模式下檢測(cè)大腸桿菌O157:H7（3.3×105CFU/mL）的T線信號(hào)值。當(dāng)AFM1濃度為500 pg/mL時(shí)，每隔一分鐘對(duì)檢測(cè)大腸桿菌O157:H7（3.3×105CFU/mL）的T線信號(hào)值進(jìn)行讀取，直到35 min。比較這兩種模式下檢測(cè)大腸桿菌O157:H7（3.3×105CFU/mL）的T線信號(hào)值。當(dāng)大腸桿菌濃度為0CFU/mL時(shí)，每隔一分鐘對(duì)檢測(cè)AFM1（0和500 pg/mL）的T線信號(hào)值進(jìn)行讀取，直到35 min。比較兩種模式下檢測(cè)AFM1（0和500 pg/mL）的T線信號(hào)值。當(dāng)大腸桿菌為3.3×105CFU/mL時(shí)，每隔一分鐘對(duì)檢測(cè)AFM1（0和500 pg/mL）的T線信號(hào)值進(jìn)行讀取，直到35 min。比較兩種模式下檢測(cè)AFM1（0和500 pg/mL）的T線信號(hào)值。綜合以上數(shù)據(jù)探究檢測(cè)線的位置對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法和雙抗夾心法的影響

第二章 集成雙路膠體金免疫層析法同時(shí)檢測(cè)黃曲霉毒素 M1 和大腸桿菌 O157:H7并與上述方法對(duì)比。2.4 結(jié)果與討論2.4.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理檢測(cè)原理如圖 2.2 所示，若樣本存在一定濃度的大腸桿菌 O157:H7，則 anti-Ecoli O157:H7 mAb-GNP 與大腸桿菌 O157:H7 形成復(fù)合物，接著復(fù)合物被 T1 線上的 anti-E. coli O157:H7 pAb 捕獲，最終在 T1 線上顯色，T1 線的檢測(cè)信號(hào)值與大腸桿菌 O157:H7 的量成正比。若樣本存在一定濃度的 AFM1，anti-AFM1 mAb-GNP 與 AFM1 結(jié)合形成復(fù)合物，則 T2 線上的 AFM1-BSA 不能或少量被 anti-AFM1 mAb-GNP 捕獲，T線不顯色或顯色很淺。T2 線的檢測(cè)信號(hào)值與 AFM1 的濃度成反比。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
[1]DNA探針在檢測(cè)生物分子與離子方面的應(yīng)用[D]. 龐淑.吉林大學(xué) 2015

碩士論文
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[2]基于HCR及生物素—鏈霉親和素信號(hào)放大系統(tǒng)檢測(cè)大腸桿菌O157:H7的研究[D]. 郭琦.南昌大學(xué) 2017
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