富硒酵母的誘變篩選及其富硒條件的分析
發(fā)布時間:2021-03-19 18:36
富硒酵母是一種應(yīng)用廣泛的食品添加劑,是一種重要的人體有機(jī)硒補(bǔ)充劑,它來源于外源無機(jī)硒在生長過程中轉(zhuǎn)化有機(jī)硒的酵母菌體,篩選出高水平將無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒的酵母菌株對富硒酵母的生產(chǎn)和應(yīng)用具有重要意義。硒蛋白是富硒酵母中有機(jī)硒存在的一種主要形式,其含量不僅是衡量富硒酵母質(zhì)量的重要指標(biāo),并且反映了酵母可以將無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒的能力。研究表明,硒代磷酸是硒蛋白合成的活性硒供體,由硒磷酸合酶(SPS)催化生成,該酶是硒蛋白合成的限速酶。鑒于SPS活性對H2O2的不耐受性,本論文將以H2O2為選擇壓力進(jìn)行富硒酵母菌株的誘變篩選,并對誘變菌株的富硒培養(yǎng)條件進(jìn)行分析。取得的主要研究結(jié)果如下:(1)以釀酒酵母為起始菌株,疊氮化鈉為誘變劑,H2O2為選擇壓力,經(jīng)誘變、初篩、復(fù)篩,獲得兩株富硒水平高的菌株HXS-01和HXS-02。菌株HXS-01和HXS-02,經(jīng)過48 h搖瓶富硒培養(yǎng)后,它們的總硒和產(chǎn)率分別比出發(fā)菌株高3.4?3.7倍和2.9?3.2倍,有機(jī)硒含量及產(chǎn)率分別比...
【文章來源】:合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
硒元素的還原和甲基化反應(yīng)Figure1.1Reductionandmethylationofselenium
合肥工業(yè)大學(xué)學(xué)術(shù)碩士研究生學(xué)位論文20圖3.4平板培養(yǎng)基上的菌株篩選結(jié)果Fig3.4Resultofstraingrowthonplatemediumafterscreening圖3.5篩選的菌株對不同H2O2濃度的耐受(A)及對H2O2致死濃度耐受的穩(wěn)定性(B)Fig3.5ToleranceoftheobtainedstratinstodifferentH2O2concentrations(A)andtheirtolerancestabilitytolethalH2O2concentration3.2菌種的特性3.2.1菌株性質(zhì)為了鑒定篩選出的菌株是否具有高富硒能力,將出發(fā)菌株和HXS-01、HXS-02菌株分別進(jìn)行搖瓶富硒培養(yǎng),48h后收集菌體,測定菌體的生物量、總硒及有機(jī)硒含量與產(chǎn)率。由表3.1可見,與出發(fā)菌株相比,菌株HXS-01和HXS-02在含亞BAB0123450.00.71.42.12.8HXS-01HXS-02OD(560nm)H2O2濃度(%)OD(560nm)傳代次數(shù)S1S2S3S4S5S60.00.51.01.52.02.53.03.5HXS-01-H2O2HXS-01+H2O2HXS-02-H2O2HXS-02+H2O2
合肥工業(yè)大學(xué)學(xué)術(shù)碩士研究生學(xué)位論文24菌株在6~24h快速生長,24h時達(dá)到穩(wěn)定;菌體總硒含量和產(chǎn)率隨著生長的增加而快速增加,至24h達(dá)到最高,期間有機(jī)硒占總硒的百分比從12h的89%上升到97%,相應(yīng)的菌體有機(jī)硒含量及產(chǎn)率也在24h達(dá)到最高;24h后,菌體干重、總硒及有機(jī)硒含量與干重均呈下降趨勢。因此,HXS-02菌株最佳的富硒培養(yǎng)時間可以確定為24h.圖3.9HXS-02菌株的動態(tài)Fig3.9DynamicofHXS-02strain3.3.2硒添加時間對誘變菌株生長和富硒的影響確定HXS-02菌株生物量和有機(jī)硒產(chǎn)率的最佳培養(yǎng)時間后,HXS-02菌株進(jìn)行固體斜面活化24h后,挑取一環(huán),至50mL/250mL麥芽汁液體培養(yǎng)基的搖瓶中,振蕩培養(yǎng)24h,在28℃、180r/min條件下,作為活化的菌種。搖瓶培養(yǎng)時,以10%ABCDEF
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雜種優(yōu)勢的形成機(jī)制及其在動物遺傳育種中的應(yīng)用[J]. 張丹陽,張一鳴,李麗娟,宋德榮,賀花,劉燕蓉,楊鵬,師書玥,雷初朝,陳宏,黃永震. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020(01)
[2]硒,人類不可或缺的元素[J]. 邵黎雄,陸建梅,姜雪峰. 自然雜志. 2019(06)
[3]發(fā)酵環(huán)境變化對酵母生長和成品啤酒的影響[J]. 崔云前,吳梓萌,蘇文超,張海夢. 中國釀造. 2019(11)
[4]釀酒酵母發(fā)酵降解靈芝胞外多糖組分分析及活性研究[J]. 劉艷芳,高坤,馮杰,顏夢秋,張雪夢,唐慶九,周帥,楊焱,馮娜,王金艷,張勁松. 菌物學(xué)報. 2020(02)
[5]硒對自身免疫性甲狀腺病患者TPOAb水平的影響[J]. 張秀彬,閆吉,李丹丹,呂男男,辛月穎,曠勁松. 中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用. 2019(20)
[6]葉面噴硒對茶樹葉片硒及礦質(zhì)元素含量的影響[J]. 秦玉燕,王運(yùn)儒,時鵬濤,甘志勇,杜國冬,藍(lán)唯,李乾坤,吳鳳. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2019(03)
[7]微生物富硒菌肥在葉用萵苣生產(chǎn)上的應(yīng)用[J]. 王浩然,張旸一,劉超杰,韓瑩琰,范雙喜. 北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報. 2019(02)
[8]硒營養(yǎng)與老齡健康[J]. 張茹,許月鳳,李永華,李海蓉. 中國老年學(xué)雜志. 2019(05)
[9]紫外誘變選育高產(chǎn)酒精及酸的釀酒酵母[J]. 王犁燁,陳新軍,盧丕超,劉維兵,高飛,馬珊,張穎,武運(yùn). 中國釀造. 2019(01)
[10]酵母富硒培養(yǎng)條件研究進(jìn)展[J]. 周洋枝,蘇蒙蒙,路棟,時杰,高玉榮. 農(nóng)產(chǎn)品加工. 2019(01)
博士論文
[1]新型釀酒酵母表面展示系統(tǒng)的構(gòu)建及雞球蟲EtMic2活載體疫苗的免疫保護(hù)性研究[D]. 孫慧.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]含硒蛋白質(zhì)(多肽)的制備及其抗氧化效應(yīng)研究[D]. 王程.吉林大學(xué) 2014
[3]富硒益生菌在奶牛生產(chǎn)上的應(yīng)用效果及其作用機(jī)理研究[D]. 吳顯實(shí).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[4]益生菌制劑的研制及其對雛雞免疫學(xué)影響和機(jī)理的研究[D]. 馬春全.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[5]富鐵酵母工程菌的構(gòu)建及細(xì)胞中鐵的生物轉(zhuǎn)化、分布和結(jié)合狀態(tài)的研究[D]. 袁玉蘭.四川大學(xué) 2004
碩士論文
[1]低pH環(huán)境下釀酒酵母的生理差異性研究[D]. 尚磊.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[2]高富硒酵母的篩選與富硒過程強(qiáng)化研究[D]. 婁興丹.石河子大學(xué) 2018
[3]富硒酵母高值化利用的研究[D]. 王瑞.北京化工大學(xué) 2018
[4]食用菌液體發(fā)酵合成有機(jī)硒的研究[D]. 杜凱.山東大學(xué) 2018
[5]血清硒水平和尿碘水平對甲狀腺癌患病的影響研究[D]. 馬欣.新疆醫(yī)科大學(xué) 2018
[6]硒、鋅對老年性癡呆模型的保護(hù)作用研究[D]. 徐翠.延邊大學(xué) 2016
[7]優(yōu)良釀酒酵母菌株的篩選與培育[D]. 張仟偉.河南工業(yè)大學(xué) 2016
[8]基于弱酸脅迫的富硒產(chǎn)朊假絲酵母制備及其在雛雞飼養(yǎng)中的應(yīng)用[D]. 王冬華.蘇州大學(xué) 2016
[9]富硒酵母中硒蛋白制備及性質(zhì)研究[D]. 王菲.大連工業(yè)大學(xué) 2014
[10]硒酵母高產(chǎn)菌株的篩選及發(fā)酵條件的研究[D]. 李媛媛.山西大學(xué) 2013
本文編號:3090030
【文章來源】:合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
硒元素的還原和甲基化反應(yīng)Figure1.1Reductionandmethylationofselenium
合肥工業(yè)大學(xué)學(xué)術(shù)碩士研究生學(xué)位論文20圖3.4平板培養(yǎng)基上的菌株篩選結(jié)果Fig3.4Resultofstraingrowthonplatemediumafterscreening圖3.5篩選的菌株對不同H2O2濃度的耐受(A)及對H2O2致死濃度耐受的穩(wěn)定性(B)Fig3.5ToleranceoftheobtainedstratinstodifferentH2O2concentrations(A)andtheirtolerancestabilitytolethalH2O2concentration3.2菌種的特性3.2.1菌株性質(zhì)為了鑒定篩選出的菌株是否具有高富硒能力,將出發(fā)菌株和HXS-01、HXS-02菌株分別進(jìn)行搖瓶富硒培養(yǎng),48h后收集菌體,測定菌體的生物量、總硒及有機(jī)硒含量與產(chǎn)率。由表3.1可見,與出發(fā)菌株相比,菌株HXS-01和HXS-02在含亞BAB0123450.00.71.42.12.8HXS-01HXS-02OD(560nm)H2O2濃度(%)OD(560nm)傳代次數(shù)S1S2S3S4S5S60.00.51.01.52.02.53.03.5HXS-01-H2O2HXS-01+H2O2HXS-02-H2O2HXS-02+H2O2
合肥工業(yè)大學(xué)學(xué)術(shù)碩士研究生學(xué)位論文24菌株在6~24h快速生長,24h時達(dá)到穩(wěn)定;菌體總硒含量和產(chǎn)率隨著生長的增加而快速增加,至24h達(dá)到最高,期間有機(jī)硒占總硒的百分比從12h的89%上升到97%,相應(yīng)的菌體有機(jī)硒含量及產(chǎn)率也在24h達(dá)到最高;24h后,菌體干重、總硒及有機(jī)硒含量與干重均呈下降趨勢。因此,HXS-02菌株最佳的富硒培養(yǎng)時間可以確定為24h.圖3.9HXS-02菌株的動態(tài)Fig3.9DynamicofHXS-02strain3.3.2硒添加時間對誘變菌株生長和富硒的影響確定HXS-02菌株生物量和有機(jī)硒產(chǎn)率的最佳培養(yǎng)時間后,HXS-02菌株進(jìn)行固體斜面活化24h后,挑取一環(huán),至50mL/250mL麥芽汁液體培養(yǎng)基的搖瓶中,振蕩培養(yǎng)24h,在28℃、180r/min條件下,作為活化的菌種。搖瓶培養(yǎng)時,以10%ABCDEF
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雜種優(yōu)勢的形成機(jī)制及其在動物遺傳育種中的應(yīng)用[J]. 張丹陽,張一鳴,李麗娟,宋德榮,賀花,劉燕蓉,楊鵬,師書玥,雷初朝,陳宏,黃永震. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020(01)
[2]硒,人類不可或缺的元素[J]. 邵黎雄,陸建梅,姜雪峰. 自然雜志. 2019(06)
[3]發(fā)酵環(huán)境變化對酵母生長和成品啤酒的影響[J]. 崔云前,吳梓萌,蘇文超,張海夢. 中國釀造. 2019(11)
[4]釀酒酵母發(fā)酵降解靈芝胞外多糖組分分析及活性研究[J]. 劉艷芳,高坤,馮杰,顏夢秋,張雪夢,唐慶九,周帥,楊焱,馮娜,王金艷,張勁松. 菌物學(xué)報. 2020(02)
[5]硒對自身免疫性甲狀腺病患者TPOAb水平的影響[J]. 張秀彬,閆吉,李丹丹,呂男男,辛月穎,曠勁松. 中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用. 2019(20)
[6]葉面噴硒對茶樹葉片硒及礦質(zhì)元素含量的影響[J]. 秦玉燕,王運(yùn)儒,時鵬濤,甘志勇,杜國冬,藍(lán)唯,李乾坤,吳鳳. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2019(03)
[7]微生物富硒菌肥在葉用萵苣生產(chǎn)上的應(yīng)用[J]. 王浩然,張旸一,劉超杰,韓瑩琰,范雙喜. 北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報. 2019(02)
[8]硒營養(yǎng)與老齡健康[J]. 張茹,許月鳳,李永華,李海蓉. 中國老年學(xué)雜志. 2019(05)
[9]紫外誘變選育高產(chǎn)酒精及酸的釀酒酵母[J]. 王犁燁,陳新軍,盧丕超,劉維兵,高飛,馬珊,張穎,武運(yùn). 中國釀造. 2019(01)
[10]酵母富硒培養(yǎng)條件研究進(jìn)展[J]. 周洋枝,蘇蒙蒙,路棟,時杰,高玉榮. 農(nóng)產(chǎn)品加工. 2019(01)
博士論文
[1]新型釀酒酵母表面展示系統(tǒng)的構(gòu)建及雞球蟲EtMic2活載體疫苗的免疫保護(hù)性研究[D]. 孫慧.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]含硒蛋白質(zhì)(多肽)的制備及其抗氧化效應(yīng)研究[D]. 王程.吉林大學(xué) 2014
[3]富硒益生菌在奶牛生產(chǎn)上的應(yīng)用效果及其作用機(jī)理研究[D]. 吳顯實(shí).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[4]益生菌制劑的研制及其對雛雞免疫學(xué)影響和機(jī)理的研究[D]. 馬春全.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[5]富鐵酵母工程菌的構(gòu)建及細(xì)胞中鐵的生物轉(zhuǎn)化、分布和結(jié)合狀態(tài)的研究[D]. 袁玉蘭.四川大學(xué) 2004
碩士論文
[1]低pH環(huán)境下釀酒酵母的生理差異性研究[D]. 尚磊.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[2]高富硒酵母的篩選與富硒過程強(qiáng)化研究[D]. 婁興丹.石河子大學(xué) 2018
[3]富硒酵母高值化利用的研究[D]. 王瑞.北京化工大學(xué) 2018
[4]食用菌液體發(fā)酵合成有機(jī)硒的研究[D]. 杜凱.山東大學(xué) 2018
[5]血清硒水平和尿碘水平對甲狀腺癌患病的影響研究[D]. 馬欣.新疆醫(yī)科大學(xué) 2018
[6]硒、鋅對老年性癡呆模型的保護(hù)作用研究[D]. 徐翠.延邊大學(xué) 2016
[7]優(yōu)良釀酒酵母菌株的篩選與培育[D]. 張仟偉.河南工業(yè)大學(xué) 2016
[8]基于弱酸脅迫的富硒產(chǎn)朊假絲酵母制備及其在雛雞飼養(yǎng)中的應(yīng)用[D]. 王冬華.蘇州大學(xué) 2016
[9]富硒酵母中硒蛋白制備及性質(zhì)研究[D]. 王菲.大連工業(yè)大學(xué) 2014
[10]硒酵母高產(chǎn)菌株的篩選及發(fā)酵條件的研究[D]. 李媛媛.山西大學(xué) 2013
本文編號:3090030
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