奶粉是嬰幼兒的主要食物,其營養(yǎng)直接關(guān)系到嬰幼兒的健康。奶粉的重要原料之一是油脂。因此,油脂的營養(yǎng)至關(guān)重要。目前,配方奶粉使用的乳脂替代品（HMFS）主要由酶法生產(chǎn)。酶法生產(chǎn)存在�；灰�,導致同分異構(gòu)體的產(chǎn)生。因此,需要尋找無酰基位移的新方法。微生物合成油脂不存在酰基位移的問題。渾濁紅球菌是一種能夠積累甘油三酯的放線菌。本課題主要圍繞渾濁紅球菌發(fā)酵制備HMFS展開。研究的內(nèi)容有:碳源鏈長對菌油脂肪酸組成的影響;碳源調(diào)控渾濁紅球菌生產(chǎn)OPO和OPL;碳源調(diào)控渾濁紅球菌生產(chǎn)乳脂替代品;渾濁紅球菌合成油脂的關(guān)鍵途徑和酶;發(fā)酵工藝優(yōu)化;得到的主要結(jié)論為:1. 渾濁紅球菌長約4μm、棒狀。以葡萄糖為碳源時,菌油的脂肪酸以棕櫚酸（31.25%）和油酸（16.67%）為主。以烷烴、脂肪酸酯為碳源時,當碳源的鏈長小于12時,菌油的脂肪酸組成與以葡萄糖為碳源時的脂肪酸組成相似。當碳源鏈長大于等于12時,碳源的鏈長決定了脂肪酸的鏈長。2. 碳源調(diào)控可以使渾濁紅球菌合成OPO和OPL。合成OPO的碳源為CIE（HOSFO:HPO 1.73:1 w/w）或EO:EP=2:1（w/w）。菌油的全樣脂肪酸中油酸和棕... 

【文章來源】：華南理工大學廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

渾濁紅球菌的生物量和含油量

甘油三酯的熱性質(zhì)在應(yīng)用中至關(guān)重要[157-158]。DSC是表征甘油三酯吸熱和放熱特性的重要工具,本節(jié)中使用DSC對乳脂替代品的熱性質(zhì)進行了測定,結(jié)果見圖4-4和表4-12。結(jié)晶曲線中HMFSⅤ呈現(xiàn)出2個峰,而HMFSⅥ呈現(xiàn)出3個峰,說明HMFSⅤ和Ⅵ存在細微的差異。結(jié)合表4-9可知,HMFSⅤ的SSS組分為0.78%,高于HMFSⅥ中的0.56%,這部分高熔點甘三酯在結(jié)晶時首先結(jié)晶析出,在結(jié)晶曲線上表現(xiàn)為峰1。由于HMFSⅤ中SSS組分較多,峰1強度較大,且峰值溫度偏高(0.24℃vs-1.56℃)。這部分率先析出的油脂晶體會作為晶種帶動SSU組分結(jié)晶,因此HMFSⅤ中峰1緩慢向低溫區(qū)延續(xù)。而HMFSⅥ中由于沒有足夠的晶種,SSS和SSU獨立結(jié)晶,表現(xiàn)為兩個獨立的峰(峰1和峰2)。HMFSⅥ中峰1和峰2的焓變之和小于HMFSⅤ中峰1的焓變,這與HMFSⅤ中含有較高的SSS和SSU組分有關(guān)。峰3為組分SUU和UUU的結(jié)晶峰。HMFSⅥ的峰顯著高于HMFSⅤ,這是因為HMFSⅥ中含有更多的SUU和UUU。焓變上HMFSⅥ的為76.75 J/g,顯著高于HMFSⅤ中的26.38 J/g。

取菌體生長旺盛的對數(shù)期(36 h)和對數(shù)末期(48 h)的菌體提取m RNA。取平行樣,樣品編號分別為C1_36 h、C1_48 h、C2_36 h、C2_48 h(表5-2)。由表5-2可以看出,抽提出的RNA濃度均大于300 ng/μL,滿足原核轉(zhuǎn)錄組文庫構(gòu)建的濃度要求(≥100 ng/μL)�？俁NA的量達到了13μg以上,也滿足5μg的樣品總量需要。OD260/280均達到了2.0,滿足≥1.9的要求,說明蛋白污染很小,RNA純度很高。OD260/230達到了2.0,說明樣品中多糖等小分子污染物較少,RNA純度較高。RIN表示RNA樣本品的完整度,一般數(shù)值在1-10之間,數(shù)值越大RNA完整度越高。本次樣品RNA的RIN的值為10,大于標準要求的8,說明RNA降解很少,完整度很高,可以用于建庫。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]酶法合成sn-2棕櫚酸甘油酯的研究進展[J]. 韋偉,孫聰,王小三,金青哲,Xuebing Xu,Casimir C.Akoh,王興國.  Engineering. 2020(04)

博士論文
[1]羰基還原酶AcCR的酶學性質(zhì)、分子改造及其催化手性醇不對稱合成的研究[D]. 魏萍.華南理工大學 2018

碩士論文
[1]硫酯酶對渾濁紅球菌PD630脂肪酸合成的影響[D]. 黃露玄.江南大學 2016
[2]渾濁紅球菌脂質(zhì)合成底物的代謝調(diào)控機理[D]. 柏大林.江南大學 2014
[3]渾濁紅球菌脂質(zhì)積累機制的初步探討[D]. 李金花.中南大學 2012



本文編號：3058799