果聚糖由多個(gè)β-D-呋喃果糖聚合而成,是一種水溶性膳食纖維,大致分為兩類(lèi):菊粉（Inulin）與左聚糖（Levan）。由于人體內(nèi)的消化酶無(wú)法分解果聚糖的糖苷鍵,因此果聚糖的消化過(guò)程和代謝途徑與其他碳水化合物有較大差異^[1]。不同聚合度的Levan果聚糖溶解度不同,隨著聚合度降低,溶解度逐漸增大。目前已研究的Levan果聚糖聚合度不高,因而呈現(xiàn)黏度小和假塑性流體的特點(diǎn)。本課題對(duì)來(lái)源于Erwinia amylovora ATCC49946的果聚糖蔗糖酶基因序列與質(zhì)粒進(jìn)行重組,并轉(zhuǎn)入大腸桿菌進(jìn)行表達(dá),獲得重組果聚糖蔗糖酶。重組果聚糖蔗糖酶以蔗糖為底物反應(yīng)得到Levan果聚糖。本課題主要從兩個(gè)方面對(duì)Levan果聚糖進(jìn)行研究,包括Levan果聚糖本身性質(zhì)與其他商業(yè)膠的對(duì)比以及Levan果聚糖在生物復(fù)合材料領(lǐng)域的應(yīng)用研究。酶學(xué)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)表明,重組果聚糖蔗糖酶的最適反應(yīng)條件為pH7.0、35°C和20%的底物濃度。在最優(yōu)條件下,重組果聚糖的催化反應(yīng)能從500 g/L蔗糖中提取出184±3g/L的Levan果聚糖。Levan果聚糖平均分子量約為2.017×10⁷

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 果聚糖概述
    1.2 Levan果聚糖概述
        1.2.1 Levan果聚糖的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)
        1.2.2 Levan果聚糖的功能與應(yīng)用
        1.2.3 Levan果聚糖的合成
        1.2.4 常見(jiàn)商業(yè)膠的性質(zhì)與應(yīng)用
    1.3 Levan的生物合成
        1.3.1 Levan果聚糖蔗糖酶的酶學(xué)性質(zhì)
        1.3.2 Levan果聚糖蔗糖酶的晶體結(jié)構(gòu)
        1.3.3 Levan果聚糖蔗糖酶的合成機(jī)制
    1.4 兩種納米材料的簡(jiǎn)介
        1.4.1 納米復(fù)合材料簡(jiǎn)介
        1.4.2 納米緩釋、控釋給藥載體材料簡(jiǎn)介
    1.5 蒙脫土與牛血清蛋白簡(jiǎn)介
        1.5.1 蒙脫土的性質(zhì)與應(yīng)用
        1.5.2 牛血清蛋白的性質(zhì)與應(yīng)用
    1.6 本課題的立題背景及意義
    1.7 研究思路與主要內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 各類(lèi)試劑的配制
        2.2.1 各類(lèi)培養(yǎng)基的配置
        2.2.2 純化酶蛋白相關(guān)試劑
        2.2.3 凝膠電泳
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.3.2 高效感受態(tài)細(xì)胞的制備
        2.3.3 E.coil重組工程菌的構(gòu)建以及重組酶的誘導(dǎo)表達(dá)
        2.3.4 重組質(zhì)粒的驗(yàn)證
        2.3.5 瓊脂糖凝膠電泳
        2.3.6 重組酶的分離純化
        2.3.7 SDS-PAGE凝膠電泳檢測(cè)
        2.3.8 重組酶的酶活測(cè)定
        2.3.9 酶學(xué)性質(zhì)
        2.3.10 產(chǎn)物制備與純化
        2.3.11 產(chǎn)物性質(zhì)鑒定
        2.3.12 兩種納米材料的制備
        2.3.13 微觀(guān)結(jié)構(gòu)分析
        2.3.14 熱力學(xué)行為分析
        2.3.15 流變學(xué)行為與結(jié)構(gòu)特性分析
        2.3.16 廣角X射線(xiàn)衍射
        2.3.17 圓二色譜分析
        2.3.18 納米顆粒粒徑與包封率測(cè)定
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 Eram-LS的生物信息分析
    3.2 Eram-LS的異源表達(dá)及分離純化
    3.3 Eram-LS酶學(xué)性質(zhì)研究
        3.3.1 p H與溫度對(duì)Eram-LS的酶活的影響
        3.3.2 Eram-LS重組酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究
        3.3.3 反應(yīng)產(chǎn)物鑒定
    3.4 Eram-Levan性質(zhì)鑒定
        3.4.1 Eram-Levan分子量的測(cè)定
        3.4.2 Eram-Levan微觀(guān)結(jié)構(gòu)分析
        3.4.3 Eram-Levan熱力學(xué)分析
        3.4.4 Eram-Levan流變學(xué)行為分析
        3.4.5 Eram-Levan結(jié)構(gòu)特性分析
    3.5 Levan果聚糖的復(fù)合材料
        3.5.1 Levan/MMT復(fù)合材料的微觀(guān)結(jié)構(gòu)分析
        3.5.2 Levan/MMT復(fù)合材料的X射線(xiàn)衍射分析
        3.5.3 Levan/MMT復(fù)合材料的熱力學(xué)分析
        3.5.4 Levan/MMT復(fù)合材料的流變學(xué)行為分析
        3.5.6 光譜分析
        3.5.7 納米顆粒的遞送分析
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄 :作者在攻讀碩士期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3050400