單增李斯特菌（L.monocytogenes）是一種常見的食源性致病菌,對人類構(gòu)成重大威脅。L.monocytogenes感染可導(dǎo)致敗血癥、腦膜炎、腸膜炎和流產(chǎn)等癥狀。L.monocytogenes存在于土壤、水、植物、人或動物的糞便中,并且在冷藏溫度下仍然能夠維持其生命活力,這將對食物儲藏構(gòu)成巨大的威脅。因此,建立快速且靈敏的檢測方法對預(yù)防和控制由L.monocytogenes引起的食物中毒事件極其重要。滾環(huán)擴增（Rolling circle amplification,RCA）是一種恒溫的DNA擴增技術(shù),通過引入一條引發(fā)鏈和環(huán)狀DNA模板,在DNA聚合酶的作用下,可在短時間內(nèi)產(chǎn)生大量的DNA。該技術(shù)操作簡便,設(shè)計靈活,與染色或探針聯(lián)用可實現(xiàn)檢測信號的放大,在生物檢測中得到了廣泛的應(yīng)用。本研究基于RCA技術(shù),分別結(jié)合了不對稱聚合酶鏈式反應(yīng)（Asymmetric polymerase chain reaction,aPCR）和適配體技術(shù)用于生菜中L.monocytogenes的檢測。各章內(nèi)容分述如下:第一章綜述了滾環(huán)擴增信號放大技術(shù)在生物檢測中應(yīng)用的研究進展。第二章建立了aPCR-RC... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

RCA構(gòu)建成環(huán)分類：(A)鎖式DNA成環(huán)；(B)啞鈴DNA成環(huán)；(C)平末端成環(huán)Figure1.1.TheclassificationofRCAloop:(A)PadlockDNAloop;(B)DumbbellDNAloop;(C)

圖 1.2 RCA 分類：（A）單引物 RCA；（B）雙引物 RCA；（C）多引物 RCAFigure 1.2. The classification of RCA: (A) single primer RCA; (B) hyper branched RCA; (C)multiple primer RCA.1.5滾環(huán)擴增技術(shù)的應(yīng)用RCA 具有高擴增效率并且能在恒溫條件下進行擴增，研究者們基于此建立了一系列生物檢測方法，表 1.1 概括了近年來 RCA 技術(shù)在生物檢測中的應(yīng)用。

第一章 引言擺脫了反應(yīng)時間的限制。同時，也可以在 RCA 過程中加入蛋白質(zhì)（圖 1.3 C），從而將蛋白質(zhì)固定在 DNA 納米花中用于后續(xù)的檢測[75, 76]。作為一種快速且恒溫的 DNA 擴增技術(shù)，RCA 擴增得到的大量 ssDNA 可用于搭載一系列的信號分子實現(xiàn)檢測信號的放大，在微生物檢測、疾病預(yù)防和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域都得到了廣泛應(yīng)用。相信隨著技術(shù)水平的不斷提高，RCA 定會得到更廣泛和實際的應(yīng)用。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3006806