沙門氏菌是一類重要的人畜共患致病菌,可以直接或間接污染食品,引起食物中毒,對食品安全造成了極大的危害。近年來大量使用抗生素,導致環(huán)境中沙門氏菌產(chǎn)生了耐藥和交叉耐藥菌株,對該菌感染后的臨床治療提出了極大挑戰(zhàn)。本論文研究了餐飲食品中沙門氏菌的污染狀況,耐藥性以及應用噬菌體對沙門氏菌進行生態(tài)控制策略的可行性,為餐飲食品中沙門氏菌的風險評估及科學防控提供實驗依據(jù)。1.以沙門氏菌invA基因作為檢測靶基因,建立了聚合酶鏈式反應（PCR）檢測方法,對采集自揚州市場的餐飲食品及原料樣品中沙門氏菌的污染狀況進行了調(diào)查。PCR檢測結(jié)果顯示,設計的引物及反應體系能夠特異性擴增出284 bp大小DNA片段,沙門氏菌模板DNA最低檢測限達到4 ng/L。應用PCR法與常規(guī)法分別對23份食材樣品中沙門氏菌污染情況進行檢測,結(jié)果常規(guī)法檢測出其中的14個樣品為沙門氏菌陽性,用PCR技術檢測出其中的12個樣品為沙門氏菌陽性,結(jié)果表明揚州市場所售食材中沙門氏菌污染率較高,存在直接或間接感染人群,導致食物中毒的風險,要引起消費者重視。2.對45株沙門氏菌可疑菌株進一步經(jīng)過細菌生化試驗鑒定和血清分型,共獲得21株沙門氏菌,... 

【文章來源】：揚州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２靶基因的ＰＣＲ擴增結(jié)果??

２．２．２樣品增菌液模板ＤＮＡ的提取結(jié)果??將樣品增菌液中細菌提取基因組ＤＮＡ，ＤＮＡ的ＯＤ２６０／ＯＤ２８０在１．８￣２．０范圍內(nèi)，符??合模板ＤＮＡ的純度要求，將基因組ＤＮＡ提取物進行瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果如圖２－１所示，??結(jié)果顯示基因組ＤＮＡ條帶均一，ＤＮＡ模板提取完整。??４??圖２－１模板ＤＮＡ的電泳檢測結(jié)果??Ｍ：ＤＮＡｍａｒｋｅｒ；?１：標準腸炎沙門氏菌Ｐ２２基因組ＤＮＡ；?２－２４：樣品增菌液中細菌基因組ＤＮＡ??提取物??Ｆｉｇ．?２－１?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｅｍｐｌａｔｅ?ＤＮＡ??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?１：?Ｇｅｎｏｍｅ?ＤＮＡ?ｏｆ?ｓｔａｎｄａｒｄ?Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ?ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ＼２－２Ａ：?Ｇｅｎｏｍｅ?ＤＮＡ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?ｏｆ??２３?ｓａｍｐｌｅｓ??２．２．３靶基因的ＰＣＲ擴增結(jié)果??以標準腸炎沙門氏菌菌株的基因組ＤＮＡ按所建立的程序進行ＰＣＲ擴增，結(jié)果如圖２－２??所示。只有沙門氏菌ＤＮＡ擴增產(chǎn)物電泳在預期大小位置（２８４?ｂｐ）出現(xiàn)特異性條帶，而對??照酵母ＤＮＡ和大腸桿菌ＤＮＡ都未出現(xiàn)擴增產(chǎn)物，表明了所選引物對沙門氏菌的特異性，??ＰＣＲ技術檢測時，基本不會出現(xiàn)其他微生物核ＤＮＡ的干擾而影響檢測結(jié)果。??圖２－２靶基因的ＰＣＲ擴增結(jié)果??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?１：酵母ＤＮＡ為模板；２：大腸桿菌ＤＮＡ為模板；３：腸炎沙門氏菌的基因??

ｎｇ／ｎＬ；?８：?２５６?ｎｇ／ｐＬ；?９：?５００?ｎｇ／＾Ｌ??２．２．５食材樣品的ＰＣＲ檢測結(jié)果??對２３份食材樣品增菌液ＤＮＡ提取物進行ＰＣＲ擴增，電泳結(jié)果如圖２－４所示，??結(jié)果表明樣品?Ｓ－ｌ、Ｓ－２、Ｓ－３、Ｓ－４、Ｓ－５、Ｓ－６、Ｓ－８、Ｈ－１０、Ｈ－ｌｌ、Ｈ－１２、Ｘ－１７、??Ｘ－１８?１２份樣品增菌液能夠擴出目標條帶，表明樣品含有沙門氏菌；而樣品ｓ＿７、??Ｈ－９、Ｈ－１３、Ｈ－１４、Ｈ－１５、Ｘ－１６、Ｘ－１９、Ｘ－２０、Ｘ－２１、Ｘ－２２、Ｘ－２３?１１?份樣品呈?ＰＣＲ??

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：2978443