【摘要】：動物血液是畜禽屠宰加工過程中的主要副產品,含有豐富的蛋白質和其他營養(yǎng)素;由于駱駝生存在嚴酷的惡劣環(huán)境中,特殊的環(huán)境使其血液與其它動物的血液相比,具有更為特殊的生理、營養(yǎng)功能。然而,駝血利用率極低,造成了極大的浪費。本研究利用酶解法制備駝血多肽,探究不同蛋白酶的駝血酶解產物抗氧化及降糖活性強弱;在此基礎上利用超濾、層析等方法對抗氧化與降糖肽進行分離純化;最后對分離純化后的抗氧化與降糖肽進行氨基酸組成、分子量分布及氨基酸序列的測定分析。主要研究結果如下:(1)胃蛋白酶在最適pH和溫度條件下,酶解時間為3 h,酶濃度為5 mg/100mg,料液比為1:10時,駝血酶解產物有最高抗氧化活性;經進一步分離純化,該水解產物中組分Pep-1抗氧化活性最強,其DPPH·清除率為72.6%,鐵離子螯合能力為94.9%,總抗氧化能力(ABTS法)為1.433 mmol/g。利用全自動氨基酸分析儀對組分Pep-1進行氨基酸組成測定發(fā)現其氨基酸含量為73.763 mg/100mg。利用MALDI-TOF-TOF測定組分Pep-1的分子量和氨基酸序列發(fā)現其主要由分子量為5107.6484 Da的肽段組成,對該肽段進一步水解測定發(fā)現其主要由分子量為1223.6233 Da 的九肽組成,氨基酸序列為 Val-Val-Tyr-Pro-Trp-Thr-Arg-Arg-Phe,大部分由疏水性氨基酸組成。(2)風味蛋白酶在最適pH和溫度條件下,酶解時間為4 h,酶濃度為5 mg/100mg,料液比為1:6時,駝血酶解產物有最高α-淀粉酶抑制活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性;經進一步分離純化確定了組分Fla-a的a-淀粉酶抑制率(66.03%)最高,Fla-b的α-葡萄糖苷酶抑制率(90.86%)最高。利用全自動氨基酸分析儀對組分Fla-a和Fla-b進行氨基酸組成測定發(fā)現Fla-a氨基酸含量為81 630mg/100mg,組分Fla-b氨基酸含量為49.126 mg/100mg。利用MALDI-TOF-TOF測定組分Fla-a和Fla-b的分子量和氨基酸序列,發(fā)現組分Fla-a主要由分子量為722.3637 Da的六肽組成,氨基酸序列為Tyr-Pro-Gly-Glu-Thr-Arg;組分Fla-b主要由分子量為878.4473 Da的六肽組成,氨基酸序列為Tyr-Pro-Trp-Thr-Arg-Arg。結論:本研究分離純化得到分子量為1223.6233 Da的駝血抗氧化肽Val-Val-Tyr-Pro-Trp-Thr-Arg-Arg-Phe 以及分子量為 722.3637 Da、878.4473 Da的馬駝血降糖肽 Tyr-Pro-Gly-Glu-Thr-Arg、Tyr-Pro-Trp-Thr-Arg-Arg。
【學位授予單位】：內蒙古農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：TS201.2;TS251.93
【圖文】：

圖２技術路線圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅ．２邋Ｔｈｅ邋ｔｅｃｈｎｉｃａｌ邋ｒｏａｄｍａｐ邋ｉｎ邋ｔｈｅ邋ｐａｐｅｒ逡逑

濃度（ｍｇ／？ｄ）逡逑圖３蛋白標準曲線逡逑Ｆｉｇｕｒｅ．３邋Ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ逡逑稱為生命體的物質基礎，由２０多種l#基酸（ａｍｉｎｏ邋ａｃｉｄ因此種類很多，相應的性質及功能各不相同。本試驗為的分析與研究，對駝血進行了蛋白含量檢測，根據蛋白白含量為７８．０３％，因此可以確定駝血中發(fā)揮功能活性的白酶單因素試驗結果逡逑同酶解時間對駝血水解度的影響逡逑知，隨著酶解時間的延長，水解度整體呈現先上升后趨白酶在３邋ｈ時有最大水解度，之后隨反應時間的延長水酶則在４邋ｈ時有最大水解度，而后水解度的變化趨于平

Ｆｉｇｕｒｅ．７邋Ｃａｍｅｌ邋ｂｌｏｏｄ邋ａｎｄ邋ｉｔｓ邋ｅｎｚｙｍａｔｉｃ邋ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ邋ＳＤＳ－ＰＡＧＥ逡逑Ｍ：蛋閂標準；１．駝血；２．復合蛋白酶水解液；３．木瓜蛋白酶水解液；４．風味蛋白酶水解液；５．胃水解液逡逑

【參考文獻】

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本文編號：2800502