【摘要】：太平洋牡蠣(Crassostrea gigas)是一種海洋無(wú)脊椎動(dòng)物,是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖貝類之一,其所含有的牡蠣多糖具有豐富生物活性。本文將牡蠣多糖(C.gigas polysaccharides,CGP)用于研發(fā)牡蠣多糖葡萄酒及牡蠣多糖酵素飲料,并研究了二者的生物活性,為牡蠣多糖的應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。泥鰍(Misgurnus anguillicaudatus)屬脊索動(dòng)物門鰍科泥鰍屬,其體表粘液中含有具有抗菌免疫功能的凝集素。本文提取泥鰍凝集素(M.anguillicaudatus lectin,MAL),研究其理化性質(zhì)及生物活性,為泥鰍凝集素的深入研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。所取得的主要結(jié)果如下:1.將CGP與釀酒酵母共同發(fā)酵,發(fā)現(xiàn)CGP具有促進(jìn)酵母增殖的作用。通過(guò)紫外-可見(jiàn)光譜及傅里葉紅外光譜(FTIS)分析,發(fā)現(xiàn)CGP與紅酒多酚具有相互作用,其強(qiáng)度隨著添加紅酒多酚濃度的增大而上升,紅酒多酚的加入通過(guò)改變C-N的伸縮振動(dòng)而改變了CGP中蛋白質(zhì)的構(gòu)象。將CGP加入到赤霞珠葡萄中,與葡萄酒酵母共同發(fā)酵、陳釀,獲得牡蠣多糖葡萄酒。通過(guò)氣質(zhì)聯(lián)用儀分析了牡蠣多糖葡萄酒的香氣成分,發(fā)現(xiàn)酒中產(chǎn)生了含量較高的硅烷二醇、2-辛烯-1-醇、1-脫氧-d-甘露醇并產(chǎn)生了更復(fù)雜的酯類香氣。2.將牡蠣多糖與多種果蔬共同發(fā)酵,制備出牡蠣多糖酵素飲料�？寡趸瘜�(shí)驗(yàn)表明,牡蠣多糖酵素飲料較無(wú)牡蠣多糖的酵素飲料有更好的抗氧化活性。牡蠣多糖酵素飲料對(duì)四氧嘧啶致糖尿病ICR小鼠降血糖實(shí)驗(yàn)表明,其能夠降低糖尿病小鼠的血糖值,且與高血糖組相比,牡蠣多糖酵素飲料組(200、400 mg/kg/day)的小鼠體內(nèi)TG含量顯著下降(P0.05),TC及GSP含量極顯著下降(P0.01)。此外,牡蠣多糖酵素飲料組(400、800 mg/kg/day)小鼠的尿肌酐和尿素氮含量下降極顯著(P0.01)。3.泥鰍皮經(jīng)勻漿、硫酸銨分級(jí)沉淀、DEAE-52和TSK G4000_(PWXL)凝膠色譜,分離純化出具有半乳糖特異性的凝集素MAL。同時(shí),其血凝活性被N-乙酰-D-半乳糖胺、豬胃黏蛋白和牛甲狀腺球蛋白抑制。SDS-PAGE表明,MAL相對(duì)分子質(zhì)量為60 kDa。不同理化條件影響MAL的血凝活性,溫度對(duì)MAL血凝活性影響明顯。MAL長(zhǎng)時(shí)間置于高溫條件下,其血凝活性顯著降低直至失去血凝活性。MAL的最適pH值為7-8。氨基酸組成研究分析表明,MAL含有11.48%的丙氨酸,11.20%的天冬氨酸,10.33%的賴氨酸和9.09%的甘氨酸�？寡趸Y(jié)果表明,MAL有清除DPPH·、ABTS~+·和·OH的作用。
【學(xué)位授予單位】：大連海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TS218
【圖文】：

圖 2- 1 添加不同濃度 CGP 發(fā)酵液中酵母生長(zhǎng)情況 Yeast growth in fermentation broth with different concentrations of測(cè)定添加不同濃度 CGP 發(fā)酵液的 pH 值，所得的 pH 變化如圖加 CGP 的發(fā)酵液 pH 值下降快于未加 CGP 發(fā)酵液的 pH，添的 pH 值無(wú)明顯差距。發(fā)酵 24 h 后，各錐形瓶中發(fā)酵液的 pH8 降至 pH 3.2。3.03.54.04.55.00 6 12 18 24HpTime（h）

多糖和多酚可以通過(guò)相互作用而釋放出香氣，改善紅酒風(fēng)味及改善口感。2.2.3 牡蠣多糖葡萄酒香氣成分測(cè)定采用氣質(zhì)聯(lián)用儀測(cè)定牡蠣多糖葡萄酒與未添加 CGP 葡萄酒的香氣成分，所獲得的牡蠣多糖葡萄酒及未添加 CGP 葡萄酒香氣成分的質(zhì)譜圖見(jiàn)圖 2- 7a 及 2- 7b，檢測(cè)出二者的香氣成分如表 2- 1 所示。從表 2-1 中可以看出，牡蠣多糖葡萄酒較未添加 CGP 葡萄酒產(chǎn)生了較高含量的硅烷二醇、2-辛烯-1-醇、1-脫氧-d-甘露醇及更復(fù)雜的酯類香氣。同時(shí)，CGP 增強(qiáng)了釀酒酵母合成對(duì)-甲基異丙基苯-7-醇、辛酸乙酯、十四酸乙酯及 2-乙基-己酸乙酯的能力。多糖的添加為葡萄酒增加了更多的香氣成分，使消費(fèi)者在獲得更多營(yíng)養(yǎng)成分的同時(shí)享受到風(fēng)味更廣品質(zhì)更高的葡萄酒。釀酒過(guò)程中人為添加多糖多見(jiàn)于啤酒的報(bào)道，而鮮少見(jiàn)于葡萄酒制備，如添加茶多糖的啤酒有更清亮透明的顏色，泡沫更潔白等[106]。通過(guò)對(duì)比添加 CGP 的葡萄酒與未添加 CGP葡萄酒的香氣成分，更有助于直觀看出二者之間的差距，為制備出風(fēng)味物質(zhì)含量更多，醇度更高，更受消費(fèi)者喜愛(ài)的葡萄酒提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。a) b)

注：1 標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)樣品；2 純化后的 MAL圖 4- 3 MAL 的 SDS-PAGE 電泳圖Fig.4- 3 The result of SDS-PAGE of MAL集素的凝集活性及糖結(jié)合特性中凝集素對(duì)血細(xì)胞的凝集效果不同，主要是由于各種凝集素小、與糖結(jié)合位點(diǎn)的數(shù)量、位置的差異。此外，還可能與差異等有關(guān)[114]。從泥鰍體表粘液中提取的 MAL 對(duì)綿羊血凝集效價(jià)為 32（圖 4- 4）。經(jīng)純化后的 MAL 對(duì)綿羊血的血下降，這可能是提取過(guò)程中金屬離子的損失造成的。63kDa48kDa

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本文編號(hào)：2781514