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榛子果仁中酚類物質(zhì)的制備及其抗氧化、抗菌活性的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-03 21:08
【摘要】:榛子是我們身邊常見的一種堅(jiān)果,食用方式多為炒食,經(jīng)烘焙過(guò)的榛子仁,果仁清香四溢、味道醇厚。榛仁含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分,如油脂、蛋白質(zhì)、糖、淀粉、維生素及礦物質(zhì)等。除此以外其還具有多種功能成分,多酚就是其中一種,研究表明多酚類物質(zhì)具有抗氧化、抑菌、抗腫瘤等活性,而國(guó)內(nèi)對(duì)于榛仁功能成分的相關(guān)研究卻較少。我國(guó)對(duì)榛仁的深加工還處于起步階段,利用程度低,發(fā)掘度淺,本研究主要針對(duì)我國(guó)野生平榛榛仁多酚的制備工藝、多酚種類及含量、抗氧化及抑菌活性進(jìn)行探究,以期為榛子功能性食品開發(fā)及藥用價(jià)值的提升提供理論依據(jù)。本研究以采自遼寧省鐵嶺市的平榛為實(shí)驗(yàn)材料,利用超聲輔助提取法探究了超聲功率、乙醇濃度、料液比和提取時(shí)間對(duì)榛仁多酚提取量的影響。在單因素的基礎(chǔ)上通過(guò)四因素三水平實(shí)驗(yàn),得到榛仁多酚的最佳提取工藝條件為:超聲功率240 W,乙醇濃度為65%,料液比1:60,超聲時(shí)間100 min,可得最高多酚提取量為0.42 mg/g,經(jīng)過(guò)重復(fù)性實(shí)驗(yàn),實(shí)際測(cè)得多酚提取量為0.43 mg/g。采用UPLC-MS/MS對(duì)2種榛子(平榛、平歐雜交榛)不同形態(tài)的酚酸(包括游離型、游離酯型和結(jié)合型)進(jìn)行成分測(cè)定,共鑒定出13種酚酸,分別是3,4-二羥基苯甲酸、4-羥基苯甲酸、沒(méi)食子酸、丁香酸、新綠原酸、兒茶素、表兒茶素、香草酸、對(duì)香豆酸、芥子酸、阿魏酸、異阿魏酸、水楊酸。平榛和平歐雜交榛中總酚酸含量最高的物質(zhì)都是香草酸,其它組分的含量存在明顯差異。平榛中酚酸的總量為33.50g/kg,而平歐雜交榛的總量為21.53 g/kg,前者明顯高于后者。通過(guò)堿水解將平榛榛仁多酚分離為結(jié)合酚和游離酚,通過(guò)對(duì)ic50(半數(shù)抑制濃度)值的計(jì)算和比較,評(píng)價(jià)游離酚和結(jié)合酚的抗氧化能力。在DPPH的清除實(shí)驗(yàn)中,測(cè)得游離酚的ic50值為2.09,結(jié)合酚的ic50值4.89,比較發(fā)現(xiàn)游離酚在DPPH的清除效率要強(qiáng)于結(jié)合酚;在ABTS的清除實(shí)驗(yàn)中,游離酚的ic50為值5.76,結(jié)合酚對(duì)ABTS清除能力不明顯,ic50值無(wú)法計(jì)算。ABTS的清除效率上游離酚要強(qiáng)于結(jié)合酚;在總還原力方面,游離酚在樣品濃度為6.00 mg/mL測(cè)得吸光值為1.53,而結(jié)合酚在樣品濃度為6.00 mg/mL測(cè)得吸光值為0.93,比較發(fā)現(xiàn)游離酚在總還原力能力上要強(qiáng)于結(jié)合酚。通過(guò)對(duì)比DPPH清除效率、ABTS清除效率、總還原能力這三項(xiàng)指標(biāo),游離酚在抗氧化能力上要比結(jié)合酚表現(xiàn)出色。最后,以游離酚、結(jié)合酚為樣品,通過(guò)濾紙片法測(cè)定兩種樣品對(duì)四種細(xì)菌和一種真菌抑菌作用。結(jié)果表明,兩種酚類對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌四種細(xì)菌均有抑制效果,游離酚對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效果明顯,結(jié)合酚對(duì)銅綠假單胞菌抑制效果較好;而兩種酚類對(duì)白色念珠菌抑制效果均不明顯。由于榛仁游離酚對(duì)白色念珠菌無(wú)抑菌能力,所以用榛仁游離酚處理四種細(xì)菌,發(fā)現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)速度有一定程度的減緩,其中金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)速度減緩最明顯,進(jìn)一步證明其抑菌效果。綜上所述,我們通過(guò)對(duì)榛仁酚類物質(zhì)提取工藝的優(yōu)化、酚酸種類及含量測(cè)定及其抗氧化和抑菌活性的研究,其研究結(jié)果為我國(guó)榛子資源的綜合利用及其食用藥用價(jià)值的開發(fā)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)與技術(shù)參考。
【學(xué)位授予單位】:長(zhǎng)春理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:TS255.6
【圖文】:

多酚物質(zhì),多酚類化合物,多酚類物質(zhì),分離鑒定


大多呈游離狀態(tài),部分與其他物質(zhì)結(jié)合而存在。植物多酚多為米黃棕色或紅褐色的粉末,少數(shù)為晶體,是一種次生代謝產(chǎn)物。植物多酚來(lái)源豐富,據(jù)自然界含多酚較多的植物超過(guò) 600 種,例如我們食用的水果、蔬菜、谷類、豆類、果還有飲用的茶類、咖啡和葡萄酒等,都含有豐富的酚類[13]。我們生活中常見的維素 C、維生素 E 和類胡蘿卜素,具有顯著的抗氧化能力[14],而我們每日膳食攝入總的量約為 1g,要比維生素 C 高出 10 倍,比維生素 E 和類胡蘿卜素高 100 倍[13]。1.2.2 植物多酚分類植物多酚廣泛分布于植物中,在高等植物中已鑒定出幾千個(gè)具有多酚結(jié)構(gòu)的子,在食用植物中也發(fā)現(xiàn)了數(shù)百個(gè)。它們由多種化合物組成,其特征結(jié)構(gòu)是至少含個(gè)或多個(gè)羥基的芳香環(huán),根據(jù)它們所包含的苯酚環(huán)的數(shù)目和它們相互連接的結(jié)構(gòu)元將植物多酚分為:黃酮、酚酸、芪類和木質(zhì)素類[15],結(jié)構(gòu)如圖 1-1 所示。其中黃酮化合物是植物多酚化合物中最大的一類。

色譜圖,平榛,色譜圖,酚酸


3.2.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制分別準(zhǔn)確稱取 16 種酚酸標(biāo)準(zhǔn)品各 10 mg,用甲醇溶解并定容至 10 mL,配制成 1mg/mL 的各酚酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,在-20 ℃保存。酚酸混合標(biāo)準(zhǔn)工作液采用梯度稀釋法現(xiàn)用現(xiàn)配。3.3 結(jié)果與分析平榛、平歐雜交榛的 UPLC-MS/MS 色譜分析如圖 3-1、圖 3-2 所示。

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