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pH、氯化鈉對小麥面筋蛋白與羧甲基纖維素相互作用的影響

發(fā)布時間:2020-05-26 17:42
【摘要】:近年來,生產(chǎn)上常將親水膠體加入面團(tuán)中以提高面制品的感官品質(zhì)與質(zhì)地,親水膠體對面制品的影響已成為食品學(xué)界的研究熱點。羧甲基纖維素(CMC)是一種成本低廉且安全的陰離子多糖,廣泛應(yīng)用于如餅干、面條、面包等面制品中。CMC的添加,不僅滿足大眾對膳食纖維的需求,同時也通過與面筋蛋白作用而改善產(chǎn)品的感官與質(zhì)地。然而實際生產(chǎn)加工過程中,一系列因素會影響CMC與面筋蛋白的相互作用(如蛋白質(zhì)本身的性質(zhì)、加工溫度、鹽濃度、pH等)。目前的研究大多數(shù)集中于探究加熱和冷藏條件對兩者相互作用的影響,氯化鈉和pH兩種因素的相關(guān)研究相對缺乏。此外,親水膠體對面筋蛋白的兩種組分(谷蛋白和醇溶蛋白)的影響也少有報道。因此,本文以小麥面筋蛋白為原料,模擬了兩種生產(chǎn)加工條件(不同pH、不同氯化鈉含量),探究羧甲基纖維素(CMC)與小麥面筋蛋白及其兩個組分的作用情況,為拓展其品質(zhì)改良提供一定的基礎(chǔ),同時對新產(chǎn)品開發(fā)及產(chǎn)品的實際應(yīng)用具有重要的現(xiàn)實意義。主要研究內(nèi)容與結(jié)果如下:(1)在不同pH和不同氯化鈉含量條件下,研究CMC對面筋蛋白流變與質(zhì)構(gòu)特性的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):CMC使面筋蛋白的彈性模量G′和粘性模量G″降低,更容易發(fā)生形變,硬度、咀嚼性也明顯降低,CMC弱化了面筋蛋白的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。CMC-面筋蛋白體系在中性和堿性條件下的粘彈性、硬度、咀嚼性均高于酸性條件,酸性條件不利于CMC-面筋蛋白彈性的維持。添加氯化鈉,CMC-面筋蛋白體系的粘、彈性模量均降低。(2)對不同pH下的三種復(fù)合物(CMC-面筋蛋白、CMC-谷蛋白、CMC-醇溶蛋白)的溶解性、表面疏水性等進(jìn)行測量,并利用SDS-PAGE、FTIR技術(shù)探究其分子量分布及二級結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果表明:CMC能增加面筋蛋白和谷蛋白溶解性,而降低醇溶蛋白的溶解性,CMC能結(jié)合面筋蛋白和谷蛋白的疏水位點。CMC-面筋蛋白、CMC-麥谷蛋白的溶解性均有pH依賴性,隨著pH的增加而增加,谷蛋白對CMC-面筋蛋白的溶解性貢獻(xiàn)較大。CMC-面筋蛋白的電泳條帶強(qiáng)度明顯降低,CMC可能會破壞面筋蛋白的二硫鍵,促進(jìn)非共價鍵的形成。歸屬于低分子量谷蛋白的電泳條帶強(qiáng)度明顯降低,CMC更容易與低分子量谷蛋白亞基作用而形成聚集體。三種蛋白的主要二級結(jié)構(gòu)均為β-折疊,中性條件下,CMC使面筋蛋白的β-折疊向α-螺旋轉(zhuǎn)化。(3)利用Raman、DSC、SEM技術(shù)對不同pH下的三種復(fù)合物進(jìn)行分析,結(jié)果表明:pH影響面筋蛋白的氨基酸殘基微環(huán)境,pH6~8時,CMC使面筋蛋白的酪氨酸殘基趨于埋藏,使色氨酸趨于暴露。三種蛋白的主要二硫鍵構(gòu)型均為g-g-g構(gòu)型,pH7時,CMC使面筋蛋白的g-g-g構(gòu)型含量降低,可破壞面筋蛋白的分子間作用。在中性和堿性條件下,CMC使面筋蛋白、谷蛋白與醇溶蛋白的變性溫度均增加。中性條件下,CMC的添加使面筋蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)更為松散,使谷蛋白能夠形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),賦予醇溶蛋白成膜感。(4)對不同氯化鈉含量條件下的三種復(fù)合物(CMC-面筋蛋白、CMC-谷蛋白、CMC-醇溶蛋白)的溶解性、表面疏水性、游離巰基含量進(jìn)行測量,并利用SDS-PAGE、FTIR技術(shù)探究其分子量分布及二級結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果表明:隨著氯化鈉含量的增加,CMC-面筋蛋白、CMC-谷蛋白的溶解性先降低后增加,CMC-醇溶蛋白的溶解性降低,CMC-面筋蛋白的表面疏水性逐漸增加,而CMC-谷蛋白、CMC-醇溶蛋白的表面疏水性逐漸降低。2%NaCl時,CMC-面筋蛋白的游離巰基含量最低,蛋白聚集程度較大。氯化鈉使面筋蛋白電泳條帶強(qiáng)度增加,更多的二硫鍵形成。隨著氯化鈉含量的增加,面筋蛋白、谷蛋白的α-螺旋轉(zhuǎn)變成β-折疊,氯化鈉可誘導(dǎo)面筋蛋白、谷蛋白形成氫鍵。CMC能破壞氯化鈉誘導(dǎo)蛋白形成的氫鍵,維持蛋白原有的二級結(jié)構(gòu)。NaCl使CMC-醇溶蛋白無序結(jié)構(gòu)增加。(5)利用Raman、DSC、SEM技術(shù)對不同氯化鈉含量條件下的三種復(fù)合物進(jìn)行分析,結(jié)果表明:在不同氯化鈉含量條件下,CMC會使面筋蛋白的色氨酸和酪氨酸殘基趨于埋藏,而使谷蛋白、醇溶蛋白的色氨酸和酪氨酸殘基趨于暴露,埋藏/暴露程度因氯化鈉含量而不同。隨著氯化鈉含量的增加,三種蛋白的g-g-g構(gòu)型含量降低,氯化鈉可破壞面筋蛋白分子間二硫鍵,CMC能一定程度抑制氯化鈉對蛋白二硫鍵穩(wěn)定性的降低。2%NaCl條件下,三種蛋白復(fù)合物體系的熱穩(wěn)定性較強(qiáng)。從微觀結(jié)構(gòu)上發(fā)現(xiàn),在低含量氯化鈉條件下,CMC-面筋蛋白形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),而高含量氯化鈉使CMC-面筋蛋白結(jié)構(gòu)塌陷。在不同氯化鈉含量條件下,CMC對谷蛋白、醇溶蛋白主要起到填充作用。
【圖文】:

面筋蛋白,結(jié)構(gòu)模型


粘彈性[1]。面筋蛋白作為小麥粉的成分,通常用于制作面筋蛋白能賦予面團(tuán)吸水能力及粘彈性,決定最終產(chǎn)品的對面包的制作很重要,面包制作性能與其蛋白質(zhì)含量呈之間存在著不同的線性關(guān)系[2,3]。天然面筋蛋白的分子量 之間不等。根據(jù)其在醇或水溶液中的溶解性,面筋蛋白可溶性醇溶蛋白(gliadin)(50~60%)和不溶性高分子谷蛋白(4]。面筋蛋白獨特的粘彈性特性主要歸因于粘性的醇溶蛋。這兩種蛋白質(zhì)從結(jié)構(gòu)和功能上差別很大。在面筋蛋白中基酸(脯氨酸、甘氨酸)含量較高,側(cè)鏈離子化的氨基酸含蛋白表現(xiàn)出高聚合行為,導(dǎo)致溶解度低,結(jié)晶度差,這是要障礙。Belton[5]提出了一個簡化模型來解釋面筋蛋白的模型中(圖 1-1),,僅有兩類蛋白質(zhì):線性蛋白代表高分子,球狀蛋白包括了低分子量谷蛋白亞基(LMS)和單體二硫鍵和非共價鍵(如范德華力)與球狀蛋白質(zhì)作用,線性-球狀蛋白質(zhì)相互作用的數(shù)量取決于線性蛋白質(zhì)的有效

醇溶蛋白,結(jié)構(gòu)示意圖,重復(fù)結(jié)構(gòu)


西南大學(xué)碩士學(xué)位論文.2 醇溶蛋白根據(jù)其生化和遺傳數(shù)據(jù),醇溶蛋白(gliadin)可分為 /β-、ω-、γ-三種ω 型為貧硫亞基, /β-和 γ 型則為富硫亞基。 /β-和 γ-gliadin 中的半胱氨較為保守,全部參與鏈內(nèi) SS 鍵,阻止 gliadin 參與 glutenin 的四級結(jié)構(gòu),巰基-二硫鍵(SH-SS)交換反應(yīng)。而 ω-gliadin 缺乏半胱氨酸殘基。gliadi要結(jié)構(gòu)由幾個不同大小的區(qū)域組成(圖 1-2)。N 端較短,包含 5~14 個氨基;中心重復(fù)結(jié)構(gòu)域多達(dá) 100 個殘基,主要由谷氨酰胺、苯丙氨酸、脯氨氨酸等組成的單元重復(fù)結(jié)構(gòu)組成。C 末端非重復(fù)結(jié)構(gòu)域是一系列的多聚谷、賴氨酸、精氨酸(包括所有含硫氨基酸)組成[7]。二級結(jié)構(gòu)中, -和 γ-gl復(fù)域主要為 β-轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu),非重復(fù)域則為 -螺旋結(jié)構(gòu),ω-gliadin 含有較多的旋結(jié)構(gòu), -gliadin 呈現(xiàn)的球狀結(jié)構(gòu)緊密連接,而 γ-醇溶蛋白呈現(xiàn)延伸螺旋構(gòu),ω-醇溶蛋白整體呈剛性線圈結(jié)構(gòu)[8]。
【學(xué)位授予單位】:西南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:TS213.2

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