玫瑰功能性成分分析及毛狀根誘導(dǎo)研究
發(fā)布時(shí)間:2020-05-03 19:38
【摘要】:玫瑰(Rosarugosa Thunb.)不僅是觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值俱佳的園林植物,也是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食同源植物,其花朵可提取玫瑰精油、制作玫瑰花茶,其根可入藥,藥用和保健價(jià)值高,且產(chǎn)品越來(lái)越多樣化,深受消費(fèi)者的喜愛(ài)。然而,不同玫瑰制品的選材及加工方式不同,導(dǎo)致其功能性成分也存在很大的差異。本文以我國(guó)傳統(tǒng)玫瑰為試材,檢測(cè)比較了不同開(kāi)放程度、不同干燥方式下制作的玫瑰花茶水提取液中功能性成分及其抗氧化能力的差異。建立了玫瑰根中具有艾滋病毒抗性的功能性成分-野薔薇苷的提取與檢測(cè)技術(shù)體系,并比較了其在不同種質(zhì)資源中的含量差異,并初步建立了玫瑰毛狀根誘導(dǎo)的技術(shù)體系,可作為野薔薇苷等代謝產(chǎn)物的擴(kuò)大反應(yīng)容器,為玫瑰功能性成分的生物合成奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.采用以水為溶劑的熱回流方法提取了不同開(kāi)放程度和不同烘干工藝制備的玫瑰花茶的水提取液,檢測(cè)了提取液的抗氧化能力和活性成分。結(jié)果顯示,在負(fù)離子模式下檢測(cè)并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品確證,分離鑒定了9種成分,分別是多酚類(lèi)物質(zhì)為丹皮酚和沒(méi)食子酸,黃酮類(lèi)物質(zhì)為原花青素B3、表兒茶素、二氫槲皮素、蘆丁、槲皮素-3-0-葡萄糖苷、番石榴苷和槲皮苷。玫瑰花的抗氧化能力可能與這些活性成分及其含量有關(guān)。試驗(yàn)結(jié)果表明,原花青素B3和表兒茶素在半開(kāi)期含量最高,二氫槲皮素、沒(méi)食子酸和丹皮酚在花蕾期含量最高,槲皮素-3-O-葡萄糖苷、番石榴苷、蘆丁和槲皮素盛開(kāi)期含量最高;真空凍干干燥制備的玫瑰花茶水提取液中沒(méi)食子酸、蘆丁、原花青素B3、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、表兒茶素、番石榴苷、槲皮苷的含量均高于低溫烘干制備的玫瑰花茶水提取液,而二氫槲皮素與丹皮酚剛好相反;總抗氧化能力、抗超氧陰離子自由基能力和抑制羥自由基能力在花蕾期較強(qiáng);低溫烘干工藝制備的玫瑰花茶水提液在的總抗氧化能力、抗超氧陰離子能力、抑制羥自由基能力均顯著低于真空凍干干燥工藝下的水提取液。為進(jìn)一步研究玫瑰花的不同藥理作用提供了理論基礎(chǔ)。2.建立了玫瑰根中野薔薇苷提取與含量檢測(cè)技術(shù)體系,并比較了 11種薔薇屬植物根中野薔薇苷含量的差異,結(jié)果表明,山刺玫根中野薔薇苷含量最高,為20.233 μg/mL,狗薔薇、傘房薔薇中的含量也較高。琿春野生玫瑰根中野薔薇苷含量明顯高于威海野生玫瑰,說(shuō)明野薔薇苷的含量在不同薔薇屬植物根中存在明顯差異。山刺玫作為我國(guó)常見(jiàn)的薔薇屬植物,其根系富含野薔薇苷,具有較大的開(kāi)發(fā)應(yīng)用潛力。3.對(duì)無(wú)菌苗葉片采取毛狀根誘導(dǎo)處理,通過(guò)對(duì)毛狀根誘導(dǎo)存在影響的相關(guān)因素和條件(包括外植體、共培養(yǎng)時(shí)間、菌液濃度、浸潤(rùn)時(shí)間、培養(yǎng)基等)進(jìn)行優(yōu)化,可實(shí)現(xiàn)高于32%的毛狀根誘導(dǎo)率。建立了系統(tǒng)的玫瑰毛狀根誘導(dǎo)技術(shù)體系如下:以紫枝玫瑰無(wú)菌苗葉片為外植體,培養(yǎng)基為1/2B5,預(yù)培養(yǎng)2d,采用ATCC15834發(fā)根農(nóng)桿菌侵染,選擇菌液OD600值0.6,侵染時(shí)間15 min,共培養(yǎng)時(shí)間3d,最高誘導(dǎo)率可達(dá)到32.86%。侵染時(shí)間與共培養(yǎng)時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則傷口處的菌株富集,菌株生長(zhǎng)難以被抗生素控制,過(guò)度繁殖以至于將外植體吞沒(méi)。毛狀根PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,Ri質(zhì)粒的T-DNA已經(jīng)整合到玫瑰毛狀根基因組中,表明獲得了玫瑰毛狀根。毛狀根作為次生代謝產(chǎn)物的反應(yīng)容器,可為后續(xù)玫瑰產(chǎn)品開(kāi)發(fā)提供工廠化生產(chǎn)基礎(chǔ)。
【圖文】:
20邐揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文邐逡逑2.1.2試驗(yàn)方法逡逑2.1.2.1樣品制備逡逑取干燥的玫瑰花朵粉碎,稱(chēng)。担缰脠A底燒瓶中,加50mL水,99°C±1°C恒溫加熱,逡逑提。常板澹恚椋睿脽徇^(guò)濾得上清液,,冷卻后轉(zhuǎn)移至50邋mL的容量瓶中,檢測(cè)前過(guò)0.22邐濾逡逑膜,分別進(jìn)行液質(zhì)分析和抗氧化能力測(cè)定試驗(yàn)。逡逑
邐方學(xué)敏玫瑰功能性成分分析及毛狀根誘導(dǎo)研宄邐25逡逑圖2-2不同開(kāi)放程度的玫瑰花水提取液的總離子流圖逡逑A.花蕾期;B.初開(kāi)期;C.半開(kāi)期;D.盛開(kāi)期逡逑Fig.2-2邋Total邋ion邋flow邋diagram邋of邋water邋extract邋of邋rose邋in邋different邋opening邋stages逡逑budding邋stage;邋B.邋early邋opening邋stage;邋C.邋half-opening邋stage;邋D.邋full邋opening邋stage逡逑
【學(xué)位授予單位】:揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:TS207.3
【圖文】:
20邐揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文邐逡逑2.1.2試驗(yàn)方法逡逑2.1.2.1樣品制備逡逑取干燥的玫瑰花朵粉碎,稱(chēng)。担缰脠A底燒瓶中,加50mL水,99°C±1°C恒溫加熱,逡逑提。常板澹恚椋睿脽徇^(guò)濾得上清液,,冷卻后轉(zhuǎn)移至50邋mL的容量瓶中,檢測(cè)前過(guò)0.22邐濾逡逑膜,分別進(jìn)行液質(zhì)分析和抗氧化能力測(cè)定試驗(yàn)。逡逑
邐方學(xué)敏玫瑰功能性成分分析及毛狀根誘導(dǎo)研宄邐25逡逑圖2-2不同開(kāi)放程度的玫瑰花水提取液的總離子流圖逡逑A.花蕾期;B.初開(kāi)期;C.半開(kāi)期;D.盛開(kāi)期逡逑Fig.2-2邋Total邋ion邋flow邋diagram邋of邋water邋extract邋of邋rose邋in邋different邋opening邋stages逡逑budding邋stage;邋B.邋early邋opening邋stage;邋C.邋half-opening邋stage;邋D.邋full邋opening邋stage逡逑
【學(xué)位授予單位】:揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:TS207.3
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本文編號(hào):2648016
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