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紅樹莓及其提取物對HepG2細(xì)胞脂肪積累的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-04-09 12:47
【摘要】:紅樹莓主要栽培在我國東北地區(qū),富含多種生物活性成分,具有較高的藥用價(jià)值、食用價(jià)值和食療價(jià)值,對脂類代謝的調(diào)節(jié)也具有一定的積極作用。本文研究了紅樹莓原汁、紅樹莓果酒、紅樹莓果提取物、籽提取物的活性成分含量、多酚物質(zhì)構(gòu)成及其與鞣花酸、覆盆子酮對HepG2細(xì)胞脂肪積累的影響,得到的主要結(jié)論如下:1.測定紅樹莓原汁、紅樹莓果酒、紅樹莓果和籽提取物中總酚、黃酮、原花青素、花色苷的含量。試驗(yàn)結(jié)果表明:紅樹莓原汁中總酚14.90±0.78 mg GAE/g、黃酮7.45±0.52mg RE/g、原花青素 75.42±3.79mg CE/g、花色苷 3.53±0.26mg CGE/g;紅樹莓果酒中總酚 35.01±2.06 mg GAE/g、黃酮 21.21±1.03 mg RE/g、原花青素 149.20±4.90 mg CE/g、花色苷 4.69±0.32 mg CGE/g;紅樹莓果提取物中總酚 15.18±0.94 mg GAE/g、黃酮 1.25±0.07mg RE/g、原花青素 20.35±1.06mg CE/g、花色苷 1.15±0.70mg CGE/g;紅樹莓籽提取物中總酚15.35±1.55 mg GAE/g、黃酮11.22±0.66 mg RE/g、原花青素27.08±0.99mg CE/g、花色苷未檢出。2.采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)對紅樹莓原汁、果酒、果提取物和籽提取物中的活性成分進(jìn)行分析,試驗(yàn)結(jié)果表明:紅樹莓原汁、果酒、果提取物和籽提取物中共鑒定出蘆丁、槲皮素、異鼠李素、沒食子酸、咖啡酸、鞣花酸六種活性成分,其中紅樹莓果酒中總量化多酚含量最高;紅樹莓原汁中含有蘆丁、兒茶素、隱綠原酸、異鼠李素等10種活性成分;紅樹莓果酒中含有沒食子酸、槲皮素、鞣花酸、咖啡酸等9種活性成分;紅樹莓果提取物中含有兒茶素、表兒茶素、蘆丁、鞣花酸等13種活性成分;紅樹莓籽提取物中含有表兒茶素、兒茶素、鞣花酸、槲皮素等12種活性成分。3.采用油紅O染色方法,以脂質(zhì)含量和甘油三酯(triglyceride,TG)含量為指標(biāo),對不同油酸造模劑誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)脂肪積累情況進(jìn)行研究比較,篩選出合適的造模劑誘導(dǎo)細(xì)胞建立脂肪積累模型。試驗(yàn)結(jié)果表明:以二甲基亞砜(DMSO)為溶劑的油酸造模劑A選用500 μmol/L的濃度誘導(dǎo)效果最好,此時(shí)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量和TG含量最高,分別是對照組的1.75倍和1.71倍;以牛血清白蛋白(BSA)為溶劑的油酸造模劑B選用1000 μmol/L的濃度誘導(dǎo)效果最好,此時(shí)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量和TG含量最高,分別是對照組的2.10倍和1.93倍;酒精造模劑誘導(dǎo)細(xì)胞后未能觀察到細(xì)胞內(nèi)明顯地脂肪積累;通過比較不同油酸造模劑對細(xì)胞脂肪積累影響,最終采用1000 μmol/L的油酸造模劑B誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞建立脂肪積累模型。4.噻唑藍(lán)(MTT)法試驗(yàn)結(jié)果表明:分別采用濃度為200 μg/mL的紅樹莓果提取物、4mg/mL的紅樹莓籽提取物、2%的紅樹莓原汁、1%的紅樹莓果灑、40μmol/L的鞣花酸、250 μmol/L的覆盆子酮作為紅樹莓及其活性成分干預(yù)HepG2細(xì)胞脂肪積累的上限質(zhì)量濃度。5.紅樹莓提取物能顯著降低1000 μmol/L油酸誘導(dǎo)的肝細(xì)胞脂肪積累,其中200μg/mL紅樹莓果提取物處理細(xì)胞時(shí),與模型組相比,胞內(nèi)脂質(zhì)含量降低了 25.93%,TG含量降低了 37.23%,低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量降低了 32.03%,高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量升高了 32.36%;4 mg/mL紅樹莓籽提取物處理時(shí),胞內(nèi)脂質(zhì)含量降低了47.12%,TG含量降低了 46.23%,LDL-C含量降低了 35.32%,HDL-C含量升高了35.51%;2%紅樹莓原汁處理時(shí),胞內(nèi)脂質(zhì)含量降低了 27.61%,TG含量降低了27.20%,LDL-C含量降低了 23.30%,HDL-C含量升高了 23.60%;1%紅樹莓果酒處理時(shí),胞內(nèi)脂質(zhì)含量降低了 15.13%,TG含量降低了 11.22%,LDL-C含量降低了11.33%,HDL-C含量升高了 12.36%;40 μmol/L鞣花酸處理時(shí),胞內(nèi)脂質(zhì)含量降低了29.64%,TG含量降低了 29.40%,LDL-C含量降低了 20.09%,HDL-C含量升高了14.61%;250 μmol/L覆盆子酮處理時(shí),胞內(nèi)脂質(zhì)含量降低了 23.18%,TG含量降低了28.24%,LDL-C含量降低了 13.64%,HDL-C含量升高了 19.27%。表明紅樹莓及其提取物能夠降低HepG2細(xì)胞內(nèi)脂肪的積累。
【圖文】:

色譜圖,提取物,色譜圖,酚類物質(zhì)


為進(jìn)一步明確紅樹莓及其提取物中的酚類物質(zhì)的具體組成,利用UPLC-MS/MS法逡逑分析鑒定紅樹莓及其提取物中酚類物質(zhì)。采用外標(biāo)法進(jìn)行酚類物質(zhì)的定量分析。紅樹莓逡逑及其提取物的色譜圖如圖2-1。質(zhì)譜檢測參數(shù)如表2-2所示,,測定結(jié)果如表2-3所示。逡逑-nz邋wrm逡逑|?io*1邐〖紅樹

本文編號:2620775

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