【摘要】：白皮杉醇(Piceatannol,Pic)是一種天然多酚芪類化學(xué)物,是植物產(chǎn)生抵抗生物或非生物脅迫的多酚抗毒素,具有優(yōu)良的生物活性。目前Pic的檢測(cè)方法主要有液相色譜法、氣相色譜法,以及與質(zhì)譜、核磁等方法聯(lián)用。這些方法較為單一,前處理比較繁瑣,需要大型儀器。碳量子點(diǎn)(Carbon quantum dots,CDs)熒光探針技術(shù)和表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)(Surface enhanced Raman spectroscopy,SERS)是近年來應(yīng)用于食品檢測(cè)領(lǐng)域熱門的技術(shù),具有快速、所需試劑簡(jiǎn)單等優(yōu)勢(shì)。本論文基于CDs熒光探針技術(shù)和SERS技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)Pic的快速檢測(cè),為多酚快速檢測(cè)提供借鑒方法,對(duì)豐富多酚的檢測(cè)方法具有重要意義。本文先合成了在水中發(fā)射波長(zhǎng)為570 nm的CDs,后構(gòu)建CDs/Cu~(2+)熒光探針實(shí)現(xiàn)了對(duì)Pic的檢測(cè),獲得良好的線性檢測(cè)范圍和較低的檢測(cè)限,最后運(yùn)用洗發(fā)檢測(cè)藍(lán)莓和提子中加入的Pic,有較好的回收率。而后,利用SRES技術(shù)建立檢測(cè)Pic的方法。先合成銀包金納米粒子(Silver-coated gold nanoparticles,Au@Ag NPs),再修飾對(duì)氨基苯硫酚(4-Aminothiophenol,ATP)信號(hào)分子,通過ATP分子與Pic的作用,改變ATP拉曼強(qiáng)度,實(shí)現(xiàn)Pic檢測(cè)。結(jié)論如下:1)黃綠色CDs的制備及其性能研究。以鄰苯二胺和乙醇為原料,通過溶劑熱法合成CDs,后利用薄層色譜板純化出黃綠色熒光CDs,再利用紫外可見吸收光譜、熒光激發(fā)發(fā)射光譜、透射電鏡、傅里葉紅外光譜對(duì)CDs進(jìn)行表征,最后研究CDs對(duì)紫外光、溫度、pH、離子強(qiáng)度的穩(wěn)定性。結(jié)果表明,展開劑中V_(甲醇):V_(二氯甲烷):V_(三乙胺)=1:25:0.39時(shí),CDs在薄層板上分離良好。CDs最佳激發(fā)波長(zhǎng)為385 nm,發(fā)射波長(zhǎng)與溶劑極性有關(guān),水中最佳發(fā)射波長(zhǎng)為570 nm,乙醇中為540 nm。CDs平均粒徑為7.4±0.6 nm,具有良好的抗光漂白性,對(duì)溫度和離子強(qiáng)度不敏感,在pH 5~9范圍內(nèi)熒光性質(zhì)穩(wěn)定。2)構(gòu)建CDs/Cu~(2+)熒光探針檢測(cè)Pic的方法。首先選用合適濃度的Cu~(2+)構(gòu)建CDs/Cu~(2+)熒光探針,其次優(yōu)化檢測(cè)時(shí)間與溫度,然后改變CDs/Cu~(2+)中Cu~(2+)濃度,得到檢測(cè)Pic的線性范圍和檢測(cè)限(Limit of detection,LOD),結(jié)果表明:在25、100、400?mol/L Cu~(2+)條件下檢測(cè)Pic,線性范圍分別為0.1~25?mol/L、0.75~25?mol/L、0.75~50?mol/L,LOD分別為0.04、0.01、0.03?mol/L。隨后對(duì)LOD較高是否與CDs有關(guān)進(jìn)行探究,結(jié)果表明4 mol/L H_2O_2可以造成CDs 94.63%的淬滅,即LOD較高與CDs無關(guān)。再是使用乙二胺四乙酸二鈉和丁基羥基茴香醚研究檢測(cè)機(jī)理,得出Cu~(2+)與自由基對(duì)檢測(cè)至關(guān)重要,推出原理為Pic與Cu~(2+)反應(yīng)生成自由基,造成碳量子點(diǎn)熒光淬滅,從而定量測(cè)定Pic。最后進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)和加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示CDs/Cu~(2+)對(duì)Pic的選擇性良好,加標(biāo)回收率為85%~129%,RSD為14%~20%。3)以Au@Ag-ATP為基底的SERS技術(shù)檢測(cè)Pic。先制備Au@Ag NPs,后修飾ATP信標(biāo)分子,再以Au@Ag-ATP傳感器檢測(cè)Pic,并研究了此法的重現(xiàn)性,最后對(duì)檢測(cè)機(jī)理進(jìn)行初步探究。結(jié)果表明:Au@Ag NPs中金核約為32 nm,銀殼厚度約5 nm。Au@Ag-ATP對(duì)Pic檢測(cè)線性區(qū)間為5~100?mol/L,線性關(guān)系為Y=338X-166,檢測(cè)限為0.62?mol/L,RSD為4.14%。并且,此法有良好的重現(xiàn)性。
【圖文】：

Pic）是一種植物產(chǎn)生抵抗生物或非生物脅迫的多雙鍵連接兩個(gè)酚環(huán)組成，與白皮杉醇類似，如圖 1-1 所示。分子量為 244.24，不溶于水，但可以溶于乙醇和二甲基亞砜O）等有機(jī)溶劑，對(duì)光敏感，易被氧化。結(jié)構(gòu)中雙鍵的存在反式異構(gòu)體在空間上更為穩(wěn)定。天然白皮杉醇主要存在于番蓮等中藥材和水果中[1]，是一種很好的抗氧化劑，同時(shí)，增殖的能力，如淋巴瘤、乳腺癌、前列癌、結(jié)腸癌、黑素瘤疾病方面有極大潛力，所以發(fā)展為一種潛在保健食品。然而醇植物種類遠(yuǎn)低于其他多酚類物質(zhì)，這可能歸結(jié)于白皮杉醇法較單一，從而限制了發(fā)現(xiàn)含有白皮杉醇植物的速度以及其同時(shí)，白皮杉醇因易氧化而不穩(wěn)定，給樣品的制備和檢測(cè)測(cè)主要集中于色譜方法，，以液相色譜為主。這些儀器昂貴，白皮杉醇開發(fā)快速、靈敏、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法有重要意義。

圖 1-2 兒茶酚骨架的多酚與 Cu（II）凋零 HepG2 細(xì)胞機(jī)制的示意圖[17]. 1-2 Schematic representation for the proposed mechanisms of killing HepG2 cells by a cooperatpolyphenols with catechol skeleton and Cu(II)（3）抗炎。炎癥是對(duì)病原體、組織損傷等致炎因子的反應(yīng)。免疫細(xì)胞識(shí)別非，然后釋放組胺、一氧化氮、白三烯和前列腺素等炎癥介質(zhì)。這些炎癥介質(zhì)又細(xì)胞集中到損傷部位，并在那里引發(fā)發(fā)熱、發(fā)紅、水腫和疼痛等癥狀，甚至導(dǎo)病。炎癥發(fā)生時(shí)常用甾體、非甾體抗炎藥，這類藥品有多種嚴(yán)重副作用并且功白皮杉醇作為潛在抗炎藥物被廣泛研究。其抗炎作用通過抑制主要炎癥介質(zhì)如（COX-2）、誘導(dǎo)型 NO 合酶(iNOS)，以及轉(zhuǎn)錄因子如核轉(zhuǎn)錄因子 κB(NF-κB)和-1(AP-1)而發(fā)揮效應(yīng)[25]。在人上皮細(xì)胞模型中，Jeong 等[26]觀察到白皮杉醇抑酸誘導(dǎo)的炎癥和生成的 ROS，這可能與白皮杉醇能誘導(dǎo)血紅素加氧酶-1（HO達(dá)有關(guān)。同時(shí)也有體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明白皮杉醇有抗過敏性炎癥性質(zhì)，主要表現(xiàn)在：杉醇預(yù)處理的小鼠降低了誘導(dǎo)全身性過敏反應(yīng)[27]，在這種情況下，白皮
【學(xué)位授予單位】：華南理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：O657.3;TS207.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2616850