發(fā)布時(shí)間：2024-02-24 17:16

　　阿維菌素(Avermectins)是阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)產(chǎn)生的內(nèi)酯類抗生素,具有廣譜抑菌、低毒、易降解等特點(diǎn),廣泛運(yùn)用于農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)和醫(yī)藥等領(lǐng)域。阿維菌素是次級(jí)代謝產(chǎn)物,其復(fù)雜的代謝調(diào)控機(jī)制使得運(yùn)用代謝工程手段提高阿維菌素產(chǎn)量極其困難。本研究首先通過(guò)物理、化學(xué)誘變建立了阿維鏈霉菌孢子突變文庫(kù)。并建立了一種集成Qpix420微生物篩選系統(tǒng)、自動(dòng)化移液工作站操作系統(tǒng)和酶標(biāo)儀多孔板檢測(cè)為一體的高通量篩選方法和一種基于流式細(xì)胞術(shù)的高效單細(xì)胞分選技術(shù)的高通量篩選方法。建立的篩選方法可從突變文庫(kù)中快速獲得高產(chǎn)阿維菌素突變菌株,并通過(guò)比較基因組學(xué)技術(shù)研究了高產(chǎn)阿維菌素突變菌株的調(diào)控機(jī)制。本文研究成果如下:(1)全波長(zhǎng)掃描發(fā)現(xiàn)阿維菌素在245 nm處有特異性吸收峰且培養(yǎng)基無(wú)干擾�；诖颂匦�,結(jié)合Qpix挑菌系統(tǒng)、自動(dòng)化移液工作站操作系統(tǒng)和酶標(biāo)儀等自動(dòng)化儀器建立了一種阿維菌素高產(chǎn)菌株的高通量篩選方法。以阿維鏈霉菌ATCC 31267為出發(fā)菌株,通過(guò)常壓室溫等離子體(ARTP)誘變、甲基磺酸乙酯(EMS)誘變以及亞硝基胍(NTG)誘變建立了大量突變子庫(kù),獲得了每種...

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2.3以氨基酸為前體的阿維菌素生物合成途徑F19.2.3AvermeetinbiosynthesisusingPrecursoraminoaeids

F19.2.4AvermeetinBlaProduetionofdifferenteolonialmorphology2.3.2.2紫外誘變后L一lle定向選育高產(chǎn)阿維菌素菌株阿維菌素的生物合成途徑(圖2.3)說(shuō)明L一異亮氨酸(L一ne)供應(yīng)阿維菌素“a，，組分的2一甲基丁酞基(....

圖2.3阿維鏈霉菌AV60s一32突變株的傳代穩(wěn)定性F19.2.3Thestabilityof及avermililis(AV60s一32)

F19.2.4AvermeetinBlaProduetionofdifferenteolonialmorphology2.3.2.2紫外誘變后L一lle定向選育高產(chǎn)阿維菌素菌株阿維菌素的生物合成途徑(圖2.3)說(shuō)明L一異亮氨酸(L一ne)供應(yīng)阿維菌素“a，，組分的2一甲基丁酞基(....

圖1-1阿維菌素的化學(xué)結(jié)構(gòu)

1.1阿維鏈霉菌及阿維菌素1.1.1阿維菌素簡(jiǎn)介阿維菌素是由阿維鏈霉菌發(fā)酵得到的一種廣譜、低毒、高效內(nèi)酯類抗生素。阿維菌素主要由八個(gè)組分構(gòu)成，包括A1a、A2a、A1b、A2b、B1a、B2a、B1b和B2b，其中B1a組分抗蟲(chóng)能力最強(qiáng)[1]。作為一種生物農(nóng)藥，阿維菌....

圖1-2阿維菌素生物合成Fig.1-2Biosynthesisofavermectin

江南大學(xué)碩士學(xué)位論文催化構(gòu)成阿維菌素中C-6和C-8a間的呋喃環(huán)。C5酮基的還原由AveF催化，C5的甲基化由AveD催化，具有“A”和“B”組分的糖苷配基由此構(gòu)成。AveBII-VIII催2個(gè)葡萄糖-1-磷酸成為脫氧胸甘二磷酸-齊果墩糖，脫氧胸苷二磷酸....

本文編號(hào)：3909350